Question

（12分）普通煙草轉(zhuǎn)入抗鹽基因培育抗鹽煙草的過(guò)程如下圖所示。已知含抗鹽基因的DNA和質(zhì)粒上均有salⅠ、HindⅢ、BamHⅠ酶切位點(diǎn)，質(zhì)粒上另有抗四環(huán)素基因和抗氨芐青霉素基因。請(qǐng)回答問(wèn)題：

1.構(gòu)建重組質(zhì)粒時(shí)，應(yīng)選用限制酶____________對(duì)____________進(jìn)行切割，以保證它們定向連接。限制酶切斷的是DNA分子中特定部位的兩個(gè)脫氧核苷酸之間的鍵，具體說(shuō)就是____________和____________之間的鍵。
2.如果目的基因直接注入煙草細(xì)胞，一般會(huì)被煙草細(xì)胞____________。質(zhì)粒的作用是____________。
3.切割后的目的基因與質(zhì)粒由____________酶連接成重組質(zhì)粒。篩選導(dǎo)入重組質(zhì)粒的細(xì)菌，應(yīng)在其培養(yǎng)基中加入___________，理由是__________________。
4.煙草細(xì)胞經(jīng)_______________形成愈傷組織。某研究性學(xué)習(xí)小組以愈傷組織為材料進(jìn)行了下列實(shí)驗(yàn)：一組在培養(yǎng)基中加30%的蔗糖，另一組不加蔗糖，接種后，每組再分成兩個(gè)小組，分別在光下和黑暗中培養(yǎng)。1個(gè)月后，觀察其生長(zhǎng)、分化情況，結(jié)果見下表：

培養(yǎng)條件	加蔗糖	不加蔗糖
光照	正常生長(zhǎng)，分化	不生長(zhǎng)，死亡
黑暗	只生長(zhǎng)，不分化	不生長(zhǎng)，死亡

你能得出什么結(jié)論？______________________________________。
5.從個(gè)體水平鑒定抗鹽轉(zhuǎn)基因煙草是否培育成功的方法是___________________。

Answer 1

1.salⅠ、HindⅢ酶   含抗鹽基因的DNA和質(zhì)粒進(jìn)行切割   
脫氧核糖   磷酸   
2.核酸酶分解   運(yùn)載體   
3.DNA連接 不同培養(yǎng)基中分別加入氨芐青霉素、四環(huán)素     添加青霉素的培養(yǎng)基中成活，四環(huán)素中不成活的為重組質(zhì)粒。因?yàn)橹亟M質(zhì)粒帶有抗氨芐青霉素基因，而四環(huán)素基因被破壞   
4.脫分化    細(xì)胞生長(zhǎng)需要蔗糖，細(xì)胞分化需要光照。   
5.用一定濃度鹽水澆灌或移栽到鹽堿地中

解析