Question

1．某科研機構(gòu)研發(fā)的幽門螺桿菌疫苗為基因工程疫苗，對該菌引發(fā)的胃炎、胃潰瘍等疾病具有較好的預防效果，其有效成分是該菌的一種表面抗原蛋白質(zhì)，請回答下列問題．
（1）要獲得編碼該菌表面抗原的基因，可提取出該菌的mRNA，并將mRNA逆轉(zhuǎn)錄成DNA．要大量獲得表達特異抗原的基因，可采用PCR技術(shù)．
（2）基因工程的核心步驟是基因表達載體的構(gòu)建，該結(jié)構(gòu)除了抗原基因（目的基因）外，還必須有啟動子、終止子以及標記基因．
（3）目的基因進入受體細胞內(nèi)，并且在受體細胞內(nèi)穩(wěn)定和表達的過程，稱為轉(zhuǎn)化．在表達過程中，啟動子需與RNA聚合酶識別和結(jié)合，從而驅(qū)動轉(zhuǎn)錄過程．最終翻譯是否成功，常用的檢測方法是抗原-抗體雜交．
（4）基因疫苗是在基因治療技術(shù)的基礎上發(fā)展而來的，基因治療是把正�；�因?qū)�入病人體內(nèi)，使該基因表達產(chǎn)物發(fā)揮功能，從而達到治療疾病的目的．

Answer 1

分析 1、基因工程技術(shù)的基本步驟：
（1）目的基因的獲�。悍椒ㄓ袕幕�因文庫中獲取、利用PCR技術(shù)擴增和人工合成．
（2）基因表達載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等．（3）將目的基因?qū)�入受體細胞：根據(jù)受體細胞不同，導入的方法也不一樣．將目的基因?qū)�入植物細胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)�入動物細胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)�入微生物細胞的方法是感受態(tài)細胞法．
（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)．個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．
2、DNA疫苗進入機體后進行轉(zhuǎn)錄和翻譯過程形成抗原蛋白質(zhì)，抗原蛋白質(zhì)刺激機體產(chǎn)生產(chǎn)生特異性免疫反應，產(chǎn)生抗體和記憶細胞．當同一病原體進入機體后可以直接刺激記憶細胞，記憶細胞接受抗原刺激后增殖分化成效應細胞快速進行免疫應答，預防傳染病的發(fā)�。�

解答 解：（1）RNA在逆轉(zhuǎn)錄酶的催化下，逆轉(zhuǎn)錄成相應的DNA．要大量獲得表達特異抗原的基因，可采用PCR擴增方法，體外大量增殖．
（2）基因工程的核心步驟是構(gòu)建基因表達的載體．組成包括目的基因+啟動子+終止子+標記基因．
（3）目的基因進入受體細胞內(nèi)，并且在受體細胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達的過程，稱為轉(zhuǎn)化．在表達過程中，啟動子需與RNA聚合酶識和結(jié)合，從而驅(qū)動轉(zhuǎn)錄過程．翻譯的產(chǎn)物是蛋白質(zhì)，因此檢測翻譯是否成功，常用抗原-抗體雜交法．
（4）基基因治療是把正常基因?qū)�入病人體內(nèi)，使該基因表達產(chǎn)物發(fā)揮功能，從而達到治療疾病的目的．
故答案為：
（1）逆轉(zhuǎn)錄成DNA     PCR 
（2）基因表達載體的構(gòu)建     標記基因
（3）轉(zhuǎn)化         RNA聚合酶    抗原-抗體雜交
（4）正�；�因

點評 本題考查基因工程、免疫調(diào)節(jié)等知識，要求考生識記基因工程的概念、原理及操作步驟；識記免疫調(diào)節(jié)的具體過程，能結(jié)合所學的知識準確答題．