Question

15．人組織纖溶酶原激活物（htPA）是一種重要的藥用蛋白，可在轉(zhuǎn)htPA基因母羊的羊乳中獲得．流程如下：

（1）htPA基因與載體用限制性核酸內(nèi)切酶切割后，通過DNA連接酶連接，以構(gòu)建重組表達載體．篩選轉(zhuǎn)基因細胞時，需要用到基因表達載體中的抗性基因．下列不屬于有效篩選出含目的基因受體細胞的方法是A
A．檢測受體細胞是否有質(zhì)粒
B．檢測受體細胞是否有目的基因
C．檢測受體細胞是否有目的基因表達產(chǎn)物
D．檢測受體細胞是否有目的基因轉(zhuǎn)錄出的mRNA
（2）為獲取更多的卵（母）細胞，要對供體母羊注射相應(yīng)激素，使其超數(shù)排卵．采集的精子需要經(jīng)過獲能，才具備受精能力．
（3）為了獲得更多的轉(zhuǎn)htPA基因母羊，移植前首先對含有htPA基因的胚胎進行胚胎分割和培養(yǎng)．然后再通過胚胎移植技術(shù)可獲得較多后代．
（4）下列關(guān)于羊胚胎發(fā)育和胚胎工程的敘述，正確的是B
A．胚胎分割時需將原腸胚的內(nèi)細胞團均等分割
B．移植胚胎的遺傳特性在孕育過程不受代孕羊影響
C．胚胎干細胞具有體積大、細胞核小、核仁明顯等特點
D．經(jīng)胚胎移植得到的哺乳動物是克隆動物．

Answer 1

分析 1、DNA重組技術(shù)至少需要三種工具：限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶）、DNA連接酶、運載體．
2、目的基因分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)．
3、該基因工程需要對羊的性別進行選擇，由于只有母羊能夠分泌乳汁，因此選擇母羊的胚胎進行移植．

解答 解：（1）htPA基因與載體需要用同種限制性核酸內(nèi)切酶（或同種限制酶）切割，形成相同的黏性末端，然后再通過DNA連接酶連接，以構(gòu)建重組表達載體．篩選轉(zhuǎn)基因細胞時，需要用到基因表達載體中的抗性基因（標(biāo)記基因）．
A、導(dǎo)入受體細胞的質(zhì)�？赡苁遣缓�目的基因的重組質(zhì)粒，A錯誤；
B、可通過檢測受體細胞是否有目的基因來篩選出含目的基因受體細胞，B正確；
C、可通過檢測受體細胞是否有目的基因表達產(chǎn)物來篩選出含目的基因受體細胞，C正確；
D、可通過檢測受體細胞是否有目的基因轉(zhuǎn)錄出的mRNA來篩選出含目的基因受體細胞，D正確．
故選：A．
（2）為獲取更多的卵（母）細胞，要對供體母羊注射促性腺激素，使其超數(shù)排卵．采集的精子需要經(jīng)過獲能（處理），才具備受精能力．
（3）來自同一個胚胎的后代具有相同的遺傳物質(zhì)，因此為了獲得更多的轉(zhuǎn)htPA基因母羊，移植前首先對含有htPA基因的胚胎進行胚胎分割和培養(yǎng)，然后再通過胚胎移植技術(shù)可獲得較多后代．
（4）A、胚胎分割時需將囊胚的內(nèi)細胞團均等分割，A錯誤；
B、移植胚胎的遺傳特性在孕育過程不受代孕羊影響，B正確；
C、胚胎干細胞具有體積小、細胞核大、核仁明顯等特點，C錯誤；
D、經(jīng)胚胎移植得到的哺乳動物不一定是克隆動物，也可能是試管動物或轉(zhuǎn)基因動物，D錯誤．
故選：B．
故答案為：
（1）限制性核酸內(nèi)切酶    抗性基因     A
（2）超數(shù)排卵    獲能
（3）胚胎分割    胚胎移植
（4）B

點評 本題考查了基因工程和胚胎工程的相關(guān)知識，要求考生能夠識記基因工程的操作步驟，明確該基因工程中需要選擇母羊進行胚胎移植；識記胚胎工程的相關(guān)技術(shù)及應(yīng)用，能結(jié)合所學(xué)的知識準(zhǔn)確答題，屬于考綱中識記、理解層次的考查．