Question

【題目】將重組質(zhì)粒導(dǎo)入大腸桿菌后，需接種在培養(yǎng)基培養(yǎng)，以便進(jìn)一步篩選目的菌株，培養(yǎng)基成分如下：

牛肉膏	蛋白胨	NaCl	X	抗生素	水
0．5g	1g	0．5g	2g	適量	定容至100mg

（1）上述培養(yǎng)基中應(yīng)加入的物質(zhì)X是___________，利用培養(yǎng)基分離純化目的菌株，可用_______（填“平板劃線法”、“稀釋涂布平板法”、“平板劃線法或稀釋涂布平板法”），理由是__________________。接種后，應(yīng)將培養(yǎng)基放入37°C恒溫箱中倒置培養(yǎng)，倒置的目的是__________________。

（2）可將平板上的單個(gè)菌落分別挑取并接種在_____________（填“固體”或“液體”）培養(yǎng)基中擴(kuò)大培養(yǎng)。在接種過程中應(yīng)注意的無菌操作有：_______（至少寫2個(gè)）。

Answer 1

【答案】瓊脂 平板劃線法或者稀釋涂布平板法 這兩種方法都能夠?qū)⒕奂�的菌種逐步稀釋分散成單個(gè)細(xì)胞，可以在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)菌落 既可防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，又可以避免培養(yǎng)基中的水分過快地?fù)]發(fā) 液體 在酒精燈火焰旁進(jìn)行；操作者的手要用酒精消毒（或者接種環(huán)在蘸取菌落之前要灼燒滅菌；在超凈工作臺(tái)中進(jìn)行；培養(yǎng)皿皿蓋打開一條縫隙，操作完要迅速關(guān)閉）

【解析】

接種最常用的方法是平板劃線法和稀釋涂布平板法。接種的目的是使聚集在一起的微生物分散成單個(gè)細(xì)胞，并在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)細(xì)菌繁殖而成的子細(xì)胞群體—菌落。

（1）分離純化菌種的培養(yǎng)基應(yīng)為固體培養(yǎng)基，所以上述培養(yǎng)基中應(yīng)加入的物質(zhì)X是瓊脂。由于平板劃線法或者稀釋涂布平板法都能夠?qū)⒕奂�的菌種逐步稀釋分散成單個(gè)細(xì)胞，可以在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)菌落，所以分離純化目的菌株，可用平板劃線法或稀釋涂布平板法接種。接種后，應(yīng)將培養(yǎng)基放入37°C恒溫箱中倒置培養(yǎng)，倒置的目的是既可防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，又可以避免培養(yǎng)基中的水分過快地?fù)]發(fā)。

（2）液體培養(yǎng)基中菌體和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)可以充分接觸，菌種的擴(kuò)大培養(yǎng)一般是將菌種接種在液體培養(yǎng)基中。在接種過程中應(yīng)保證無菌操作，如接種應(yīng)在酒精燈火焰旁進(jìn)行；操作者的手要用酒精消毒（或者接種環(huán)在蘸取菌落之前要灼燒滅菌；在超凈工作臺(tái)中進(jìn)行；培養(yǎng)皿皿蓋打開一條縫隙，操作完要迅速關(guān)閉）等。