Question

【題目】鮮牛奶容易被金黃色葡萄球菌污染，該菌高度耐鹽，可引起人類肺炎等疾病。在血平板(培養(yǎng)基中添加適量血液)上生長(zhǎng)時(shí)，可破壞菌落周圍的紅細(xì)胞，使其褪色。下圖為檢測(cè)鮮牛奶是否被金黃色葡萄球菌污染的操作流程，請(qǐng)據(jù)圖回答：

(1)鮮牛奶經(jīng)乳酸桿菌發(fā)酵可制成酸奶，在酸奶發(fā)酵過(guò)程中需控制的氣體條件是________。

(2)用7.5% NaCl肉湯培養(yǎng)基培養(yǎng)的主要目的是_____________。經(jīng)多次規(guī)范操作、重復(fù)實(shí)驗(yàn)，血平板上均出現(xiàn)_________的菌落，初步證明鮮牛奶中存在金黃色葡萄球菌。從功能上分類，血平板屬于____________培養(yǎng)基。

(3)在3個(gè)血平板上各接種稀釋倍數(shù)為103的菌液樣品0.1mL，培養(yǎng)一段時(shí)間后平板上的菌落數(shù)分別為38、46、54，則每升原菌液樣品中細(xì)菌數(shù)為________。

(4)分離純化微生物時(shí)，除了圖中接種方法，還常用平板劃線法。若要在五個(gè)區(qū)域劃線，共需灼燒接種環(huán)_____次，最后一次灼燒滅菌的目的是_______________________。

Answer 1

【答案】 無(wú)氧（隔絕空氣） 篩選出金黃色葡萄球菌 周圍存在透明圈（無(wú)色、紅色消褪） 鑒別 4.6×108 6 防止污染環(huán)境和感染操作者

【解析】試題分析：微生物的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)有5類，分別是水、無(wú)機(jī)鹽、碳源、氮源及生長(zhǎng)因子；培養(yǎng)基按功能分為選擇培養(yǎng)基和鑒別培養(yǎng)基。剛果紅染色法篩選纖維素分解菌的原理：剛果紅是一種染料，它可以與像纖維素這樣的多糖物質(zhì)形成紅色復(fù)合物，但并不和水解后的纖維二糖和葡萄糖發(fā)生這種反應(yīng)。

（1）乳酸桿菌是厭氧型微生物，因此其發(fā)酵過(guò)程中必需嚴(yán)格控制無(wú)氧條件。

（2）高濃度的鹽溶液可以對(duì)微生物進(jìn)行選擇，而葡萄球菌可以生存在高濃度的鹽溶液中，因此用7.5% NaCl肉湯培養(yǎng)基培養(yǎng)的主要目的是篩選出金黃色葡萄球菌；根據(jù)題意，“金黃色葡萄球菌在血平板（培養(yǎng)基中添加適量血液）上生長(zhǎng)時(shí)，可破壞菌落周圍的紅細(xì)胞，使其褪色”，所以如果經(jīng)多次規(guī)范操作、重復(fù)實(shí)驗(yàn)，血平板上均出現(xiàn)透明圈的菌落，說(shuō)明初步證明鮮牛奶中存在金黃色葡萄球菌。從功能上分類，血平板屬于鑒別培養(yǎng)基。

（3）三個(gè)培養(yǎng)基上平均數(shù)=（38+46+54）/3=46，所以每升水樣中活菌數(shù)為46×103÷0.1÷10-3=4.6×108個(gè)。

（4）每次接種前后接種環(huán)都需要灼燒滅菌，因此若要在五個(gè)區(qū)域劃線，共需灼燒接種環(huán)5次，最后一次灼燒滅菌的目的是防止污染環(huán)境和感染操作者。