(05全國卷Ⅰ)鐮刀型細(xì)胞貧血癥的病因是血紅蛋白基因的堿基序列發(fā)生了改變。檢測這種堿基序列改變必須使用的酶是
A、解旋酶 B、DNA連接酶 C、限制性內(nèi)切酶 D、RNA聚合酶
答案:C
解析:選項(xiàng)B,D可以直接排除。對于選A可能理解為的:既然是檢測突變的部位,那么很自然想到用該基因的探針,進(jìn)行堿基互補(bǔ)配對雜交而檢測之,但是分子雜交的前提必須是單鏈DNA,于是很自然想到用解旋酶處理被檢測基因。但是,解開DNA雙鏈結(jié)構(gòu)不一定要用解旋酶,在高溫或者用強(qiáng)堿溶液處理也可以得到單鏈DNA,而且題干上也有“必須使用的酶”的敘述,所以可以排除A選項(xiàng)。
對于C選項(xiàng)的理解:限制酶只是把原DNA切成很多片段,其中某個片段可能包含突變的目的基因,然后再用化學(xué)方法處理成單鏈,最后再和探針雜交,根據(jù)放射性(或熒光)出現(xiàn)部位而檢測出突變部位,這種技術(shù)其實(shí)就是所謂的基因診斷。
如不用限制酶把DNA切割成若干片段,通過其他方法把DNA處理成單鏈,然后與DNA探針雜交,但是,已經(jīng)變性成單鏈的DNA很有可能常溫下復(fù)性,可能回折重新形成許多雙鏈區(qū),如果恰恰突變部位及其臨近區(qū)域和該單鏈其他區(qū)域結(jié)合成雙鏈,那么必然影響探針與相應(yīng)部位的結(jié)合,也就無法準(zhǔn)確檢測到突變部位。
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