Question

（9分）在菲律賓首都馬尼拉郊外的一片稻田里，一種被稱為“金色大米”的轉(zhuǎn)基因水稻已經(jīng)悄然收獲。這種轉(zhuǎn)基因大米可以幫助人們補(bǔ)充每天必需的維生素A，由于含有可以生成維生素A的β一胡蘿卜素，它呈現(xiàn)金黃色澤，故稱“金色大米”�！敖鹕�大米”的培育流程如圖所示。請(qǐng)回答下列問(wèn)題.(已知酶I的識(shí)別序列和切點(diǎn)是 -G↓GATCC-，酶II的識(shí)別序列和切點(diǎn)是-↓GATC-)

（1）培育“金色大米”的基因工程操作四步曲中，其核心是 。通過(guò)該操作形成了圖中的c，它的構(gòu)成至少包括目的基因、標(biāo)記基因、復(fù)制原點(diǎn)和 等。

（2）在研究過(guò)程中獲取了目的基因后采用 技術(shù)進(jìn)行擴(kuò)增，在構(gòu)建c的過(guò)程中目的基因用 (限制酶Ⅰ或限制酶Ⅱ)進(jìn)行了切割；檢驗(yàn)重組載體導(dǎo)入能否成功需要利用 作為標(biāo)記基因。

（3）過(guò)程d通常采用 方法，過(guò)程e運(yùn)用了植物組織培養(yǎng)技術(shù)獲得符合要求的個(gè)體。在該技術(shù)應(yīng)用的過(guò)程中，關(guān)鍵步驟是利用含有一定營(yíng)養(yǎng)和激素的培養(yǎng)基誘導(dǎo)植物細(xì)胞進(jìn)行 和 。

（4）若希望該轉(zhuǎn)基因水稻生產(chǎn)的“金色大米”含維生素A含量更高、效果更好，則需要通過(guò) 工程手段對(duì)合成維生素A的相關(guān)目的基因進(jìn)行設(shè)計(jì)。

Answer 1

（1）基因表達(dá)載體的構(gòu)建 啟動(dòng)子、終止子 （2）PCR 限制酶Ⅱ 基因I

（3）農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法 脫分化 再分化 （4）蛋白質(zhì)

【解析】

試題分析：(1)基因工程的核心步驟是基因表達(dá)載體的構(gòu)建。構(gòu)建成的基因表達(dá)載體可用圖中c表示,其結(jié)構(gòu)中至少包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子、標(biāo)記基因。

(2)擴(kuò)增目的基因應(yīng)采用PCR技術(shù)。據(jù)圖可知,限制酶Ⅱ的識(shí)別序列中包含了限制酶Ⅰ的識(shí)別序列,若使用限制酶Ⅰ進(jìn)行切割,則基因Ⅰ和基因Ⅱ都會(huì)被破壞,因此應(yīng)使用限制酶Ⅱ進(jìn)行切割。此時(shí)基因Ⅰ結(jié)構(gòu)完整,可作為標(biāo)記基因。

(3)將目的基因?qū)�入植物�?xì)胞(即過(guò)程d)通常采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法,將受體細(xì)胞培育為完整植株需用植物組織培養(yǎng)技術(shù),該技術(shù)的核心是脫分化和再分化。

(4)對(duì)自然界原有基因的修飾、改造需通過(guò)蛋白質(zhì)工程。

考點(diǎn)：本題考查基因工程的應(yīng)用，意在考查考生能理解所學(xué)知識(shí)的要點(diǎn)，把握知識(shí)間的內(nèi)在聯(lián)系，形成知識(shí)網(wǎng)絡(luò)的能力。