Question

10．多氯聯(lián)苯是一種對人體有很大危害的有機(jī)物質(zhì)，呈油狀液體，污染土壤后，很難清除．研究發(fā)現(xiàn)部分酵母菌具有分解多氯聯(lián)苯的作用，為消除這種污染，科研人員計(jì)劃從受污染的土壤中篩選出高效分解多氯聯(lián)苯的菌株．
（1）篩選分解多氯聯(lián)苯的菌株時(shí)，應(yīng)將土壤樣品稀釋（溶解），接種到以多氯聯(lián)苯為唯一的碳源培養(yǎng)基上，從功能上講，該培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基．
（2）對初步提取到的菌株要進(jìn)行純化，一般操作方法有兩種，如圖是平板劃線法．
（3）若要測定培養(yǎng)液酵母菌的菌體數(shù)，可在顯微鏡下直接計(jì)數(shù)．若用稀釋涂布平板法（或涂布平板）法統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)，在涂布接種前，隨機(jī)取若干滅菌后的空白平板進(jìn)行培養(yǎng)一段時(shí)間，這樣做的目的是檢驗(yàn)培養(yǎng)基平板滅菌是否成功（倒平板是否感染雜菌或是否徹底滅菌）．
（4）將1ml酵母菌溶液稀釋100倍，在3個(gè)平板上用涂布法分別接入0.1ml稀釋液經(jīng)適當(dāng)培養(yǎng)后，3個(gè)平板上的菌落數(shù)分別為56、57、58，據(jù)此可得出每升溶液中酵母菌活菌數(shù)為5.7×10⁷個(gè)/L．

Answer 1

分析 1、培養(yǎng)基按功能分：

種類	制備方法	特征	用途
選擇培養(yǎng)基	培養(yǎng)基中加入某種化學(xué)成分	根據(jù)某種微生物的特殊營養(yǎng)要求或其對某化學(xué)、物理因素的抗性而設(shè)計(jì)的培養(yǎng)基使混合菌樣中的劣勢菌變成優(yōu)勢菌，從而提高該菌的篩選率	加入青霉素分離得到酵母菌和霉菌
鑒別培養(yǎng)基	加入某種試劑或化學(xué)藥品	依據(jù)微生物產(chǎn)生的某種代謝產(chǎn)物與培養(yǎng)基中特定試劑或化學(xué)藥品反應(yīng)，產(chǎn)生明顯的特征變化而設(shè)計(jì)	鑒別和區(qū)分菌落相似的微生物伊紅和美藍(lán)培養(yǎng)基可以鑒別大腸桿菌

2、微生物常見的接種的方法
①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)．在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個(gè)菌落．
②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個(gè)菌落．

解答 解：（1）篩選分解多氯聯(lián)苯的菌株時(shí)，應(yīng)將土壤樣品稀釋，接種到以多氯聯(lián)苯為唯一碳源的培養(yǎng)基上；只有能分解多氯聯(lián)苯的菌株才能在這樣的培養(yǎng)基中生存，因此從功能上講，該培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基．
（2）對初步提取到的菌株要進(jìn)行分離純化，一般操作方法有兩種，即平板劃線法和稀釋涂布平板法，圖示是利用平板劃線法進(jìn)行微生物接種，把聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面．
（3）若要測定培養(yǎng)液酵母菌的菌體數(shù)，可在顯微鏡下用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板直接計(jì)數(shù)．若用稀釋涂布平板法統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)，在涂布接種前，隨機(jī)取若干滅菌后的空白平板進(jìn)行培養(yǎng)一段時(shí)間，這樣做的目的是檢測培養(yǎng)基平板滅菌是否合格．
（4）由題意知1ml水樣中的菌落數(shù)是（56+57+58）÷3÷0.1×100=5.7×10⁴個(gè)，每升水樣中的活菌數(shù)為5.7×10⁴×10³=5.7×10⁷個(gè)．
故答案為：
（1）稀釋（溶解）    多氯聯(lián)苯     選擇培養(yǎng)基
（2）純化      平板劃線
（3）稀釋涂布平板法（或涂布平板）     檢驗(yàn)培養(yǎng)基平板滅菌是否成功 （倒平板是否感染雜菌或是否徹底滅菌）
（4）5.7×10⁷個(gè)/L

點(diǎn)評 本題考查微生物的分離和培養(yǎng)，要求考生識記培養(yǎng)基的成分、培養(yǎng)基的類型及功能；識記接種微生物常用的兩種方法，掌握計(jì)數(shù)微生物的兩種方法，能結(jié)合所學(xué)的知識準(zhǔn)確答題．