【題目】某植物蛋白酶抑制劑Ⅱ基因是重要的抗蟲(chóng)基因,該基因轉(zhuǎn)錄的mRNA下游序列已知,但其上游序列未知,F(xiàn)利用PCR等技術(shù)擴(kuò)增該基因,具體原理如下圖所示,其中①③表示有關(guān)過(guò)程,ⅠⅢ表示有關(guān)物質(zhì)。請(qǐng)回答下列問(wèn)題:

(1)過(guò)程①反應(yīng)體系中,需要加入_________ 種引物,還需加入_________ 酶,生成雜合鏈物質(zhì)Ⅰ。

(2)利用DNA末段轉(zhuǎn)移酶催化過(guò)程②,使cDNA單鏈左側(cè)末端增加十多個(gè)腺嘌呤脫氧核苷酸序列(AAA(A)n),其目的是_________________,進(jìn)而利于過(guò)程③擴(kuò)增獲得目的基因序列Ⅲ,過(guò)程③反應(yīng)體系需要添加的新引物序列是____________________ 。該過(guò)程需_________酶。

(3)與物質(zhì)Ⅲ相比,物質(zhì)Ⅰ化學(xué)組成不同的是____________________。

(4)在物質(zhì)Ⅲ的兩端通常還需要增加______________ 序列,以便與相應(yīng)的載體重組,再利用 ________ 處理大腸桿菌等,以利于將重組質(zhì)粒導(dǎo)入細(xì)胞,構(gòu)建cDNA文庫(kù)。

【答案】 1 逆轉(zhuǎn)錄 便于設(shè)計(jì)引物 TTT(T)n Taq酶 具有尿嘧啶和核糖 限制酶識(shí)別 Ca2+

【解析】據(jù)圖分析,過(guò)程①表示以mRNA為模板逆轉(zhuǎn)錄形成DNA的過(guò)程,需要1種引物;過(guò)程②表示在DNA末端轉(zhuǎn)移酶催化下,在cDNA單鏈左側(cè)末端增加十多個(gè)腺嘌呤脫氧核苷酸序列(AAA(A)n)的過(guò)程;過(guò)程③表示利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因的過(guò)程。

(1)根據(jù)以上分析可知,過(guò)程①表示表示以mRNA為模板逆轉(zhuǎn)錄形成DNA的過(guò)程,需要1種引物,且需要逆轉(zhuǎn)錄酶的催化。

(2)利用DNA末段轉(zhuǎn)移酶催化過(guò)程②,使cDNA單鏈左側(cè)末端增加十多個(gè)腺嘌呤脫氧核苷酸序列(AAA(A)n),其目的是便于設(shè)計(jì)引物因此在過(guò)程③擴(kuò)增獲得目的基因序列Ⅲ時(shí),反應(yīng)體系需要添加的新引物序列是TTT(T)n,該過(guò)程需具有耐高溫的DNA聚合酶Taq酶。

(3)據(jù)圖分析可知,物質(zhì)Ⅲ的兩條鏈都是DNA鏈,而物質(zhì)的一條鏈?zhǔn)荄NA鏈,一條鏈?zhǔn)荝NA鏈,因此物質(zhì)Ⅰ的化學(xué)組成與物質(zhì)Ⅲ相比,不同之處在于物質(zhì)Ⅰ中含有核糖和尿嘧啶。

(4)根據(jù)題意分析,過(guò)程③表示利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因的過(guò)程,因此在目的基因物質(zhì)Ⅲ的兩端通常還需要增加限制酶的識(shí)別序列,以便限制酶的識(shí)別與切割,然后與相應(yīng)的載體重組;將重組質(zhì)粒導(dǎo)入大腸桿菌前,需要先用鈣離子處理大腸桿菌,使之成為感受態(tài)。

練習(xí)冊(cè)系列答案
相關(guān)習(xí)題

科目:高中生物 來(lái)源: 題型:

【題目】近年誕生的具有劃時(shí)代意義的CRISPR/Cas9基因編輯技術(shù)可簡(jiǎn)單、準(zhǔn)確地進(jìn)行基因定點(diǎn)編輯。其原理是由一條單鏈向?qū)NA引導(dǎo)核酸內(nèi)切酶Cas9到一個(gè)特定的基因位點(diǎn)進(jìn)行切割。通過(guò)設(shè)計(jì)向?qū)NA中20個(gè)堿基的識(shí)別序列,可人為選擇DNA上的目標(biāo)位點(diǎn)進(jìn)行切割(見(jiàn)圖)。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是

A. Cas9蛋白由相應(yīng)基因指導(dǎo)在核糖體中合成

B. 向?qū)NA中的雙鏈區(qū)遵循堿基配對(duì)原則

C. 向?qū)NA可在逆轉(zhuǎn)錄酶催化下合成

D. 若α鏈剪切點(diǎn)附近序列為……TCCACAATC……,則相應(yīng)的識(shí)別序列為……UCCACAAUC……

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科目:高中生物 來(lái)源: 題型:

【題目】下列有關(guān)需氧呼吸的敘述,錯(cuò)誤的是

A. 在線粒體中葡萄糖被分解為CO2H2OB. 在檸檬酸循環(huán)過(guò)程中有少量ATP生成

C. 電子傳遞發(fā)生在線粒體內(nèi)膜上D. 與檸檬酸循環(huán)有關(guān)的酶分布在線粒體的嵴上和基質(zhì)中

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科目:高中生物 來(lái)源: 題型:

【題目】下列關(guān)于黑藻、藍(lán)藻、根尖分生區(qū)細(xì)胞以及葉肉細(xì)胞基本共性的描述中,正確的是( )

A. 均具有將CO2轉(zhuǎn)變成為有機(jī)物的能力

B. 均存在 ATP與ADP相互轉(zhuǎn)化的能量供應(yīng)機(jī)制

C. 遺傳信息均儲(chǔ)存 在脫氧核糖核苷酸分子中

D. 均有以磷脂雙分子層作為基本支架的生物膜系統(tǒng)

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科目:高中生物 來(lái)源: 題型:

【題目】在光合作用中,光反應(yīng)為碳反應(yīng)提供的物質(zhì)是

A. NADPHATPB. H2OCO2C. 五碳化合物和酶D. 三碳化合物

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科目:高中生物 來(lái)源: 題型:

【題目】如圖表示光合作用過(guò)程,a、b、c、d表示物質(zhì),甲、乙表示場(chǎng)所,下列分析錯(cuò)誤的是( )

A. 物質(zhì)a表示[H]和ATP

B. 物質(zhì)d表示C5

C. 甲中色素不溶于水,只溶于有機(jī)溶劑

D. 乙中生理過(guò)程在有光、無(wú)光條件下都可進(jìn)行

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科目:高中生物 來(lái)源: 題型:

【題目】某植物上的綠葉經(jīng)錫箔覆蓋處理后在陽(yáng)光照射24小時(shí)后,將其脫色并用碘液處理,結(jié)果有錫箔覆蓋的位置不呈藍(lán)色,而不被錫箔覆蓋的部分呈藍(lán)色,本實(shí)驗(yàn)證明

(1)光合作用需要CO2 (2)光合作用需要光 (3)光合作用需要葉綠體 (4)光合作用放出氧(5)光合作用制造淀粉

A. (1)(2)B. (3)(5)C. (2)(5)D. (1)(3)

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科目:高中生物 來(lái)源: 題型:

【題目】組成蛋白質(zhì)的基本單位是

A. 氨基酸B. 核苷酸C. 核糖D. 脫氧核糖

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科目:高中生物 來(lái)源: 題型:

【題目】回答下列關(guān)于呼吸與光合有關(guān)問(wèn)題:

Ⅰ:圖是探究有活性的水稻種子呼吸作用的裝置,請(qǐng)回答下列問(wèn)題:

(1)將種子浸透的作用是增加種子細(xì)胞中的________水,從而增強(qiáng)種子的代謝。

(2)實(shí)驗(yàn)開(kāi)始時(shí),紅色小液滴位于0點(diǎn),在其它條件適宜的情況下,一段時(shí)間后,紅色小液滴將向____(左或右)移動(dòng)。原因主要是________________________。小液滴停止移動(dòng)后,種子的呼吸方式應(yīng)是_______________,其反應(yīng)式是________________________。

(3)為確保紅色小液滴的移動(dòng)僅由種子的生理活動(dòng)引起,需另設(shè)一個(gè)裝置,該裝置的金屬網(wǎng)上應(yīng)放置_______________,其他部分與原裝置相同。

Ⅱ:黃瓜是我國(guó)重要的蔬菜作物,研究人員以北方生長(zhǎng)的黃瓜品種為材料,用單層黑色遮陽(yáng)網(wǎng)(遮蔭率70%)對(duì)黃瓜幼苗進(jìn)行遮蔭,以自然條件下光照為對(duì)照,一段時(shí)間后,測(cè)定黃瓜的生長(zhǎng)發(fā)育和光合特性變化,實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下表所示。請(qǐng)分析回答:

株葉面積

(cm2

總?cè)~綠素

(mg·g-1FM)

凈光合速率

(μmol·m-2·s-1

胞間CO2濃度

(μmol·mol-1

自然條件

2860

1.43

15.04

187

弱光條件

3730

1.69

4.68

304

(1)實(shí)驗(yàn)組凈光合速率顯著低于對(duì)照組,主要原因是實(shí)驗(yàn)組__________________,使光反應(yīng)產(chǎn)物________________減少,進(jìn)而降低了葉肉細(xì)胞對(duì)___________(CO2或O2)的利用能力。

(2)研究結(jié)果表明,弱光條件下,黃瓜植株株高顯著升高。研究者認(rèn)為,這是由于弱光下植株光合產(chǎn)物向莖分配增多所致。為驗(yàn)證以上假設(shè),需測(cè)定黃瓜植株各部分的_________,若測(cè)定結(jié)果為實(shí)驗(yàn)組莖干重占全株干重的比__________(高于或低于)對(duì)照組,則支持上述假設(shè)。

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