Question

【題目】有機(jī)農(nóng)藥苯磺隆是一種除草劑，長(zhǎng)期使用會(huì)污染環(huán)境。研究發(fā)現(xiàn)，苯磺隆能被土壤中某些微生物降解。分離降解苯磺隆的菌株和探索其降解機(jī)制的實(shí)驗(yàn)過(guò)程如下圖甲、乙所示。

（1）微生物生長(zhǎng)繁殖所需的主要營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)有碳源、水、 四類，該實(shí)驗(yàn)所用的選擇培養(yǎng)基只能以苯磺隆作為唯一碳源，其原因是 。

（2）與微生物培養(yǎng)基相比，植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基常需添加生長(zhǎng)素和 ，這些植物激素一般需要事先單獨(dú)配置成 保存?zhèn)溆谩?/span>

（3）純化菌株時(shí)，通常使用的劃線工具是 。劃線的某個(gè)平板培養(yǎng)后，第一劃線區(qū)域的劃線上都不間斷地長(zhǎng)滿了菌，第二劃線區(qū)域的第一條線上無(wú)菌落，其它劃線上有菌落。造成劃線無(wú)菌落可能的操作失誤有 ， 。

（4）為探究苯磺隆的降解機(jī)制，將該菌種的培養(yǎng)液過(guò)濾離心，取上清液做圖乙所示實(shí)驗(yàn)。該實(shí)驗(yàn)的假設(shè)是 ，該實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)是否合理？為什么？ 。

Answer 1

【答案】

（1）氮源和無(wú)機(jī)鹽 只有能利用苯磺隆的微生物能正常生長(zhǎng)和繁殖

（2）細(xì)胞分裂素 母液

（3）接種環(huán) 接種環(huán)灼燒后未冷卻 劃線未從第一區(qū)域末端開始

（4）目的菌株能分泌降解苯磺隆的蛋白質(zhì) 不合理 缺少空白對(duì)照

【解析】

試題分析：

（1）微生物生長(zhǎng)繁殖所需的主要營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)包括碳源、水、氮源和無(wú)機(jī)鹽四類；選擇培養(yǎng)基只允許特定種類的微生物生長(zhǎng)，又能抑制或阻止其他種類微生物生長(zhǎng)，因而必須以苯磺隆為唯一碳源，只有能利用苯磺隆的微生物能正常生長(zhǎng)和繁殖。

（2）植物組織培養(yǎng)過(guò)程中啟動(dòng)細(xì)胞分裂、脫分化和再分化的關(guān)鍵激素是生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素；為了避免每次配制時(shí)都要稱量，可將植物激素先單獨(dú)配制成母液保存?zhèn)溆谩?/span>

（3）純化菌株時(shí)，通常使用的劃線工具是接種環(huán)（或接種針）；接種環(huán)在平板內(nèi)的每一次劃線前，都要先灼燒滅菌冷卻后再劃線，而且要從上一次劃線末端而非空白處劃線。第二劃線區(qū)域只有第一條線無(wú)菌落，而其他的劃線上卻有菌落，很可能是因?yàn)榻?/span>種環(huán)在灼燒后末冷卻，第一次劃線時(shí)將菌種燙死，而后接種環(huán)冷卻，能正常劃線；也可能是第一次劃線時(shí)劃線未從第一區(qū)域末端開始，使接種環(huán)上無(wú)菌種。

（4）圖乙實(shí)驗(yàn)為取得菌種培養(yǎng)液過(guò)濾后離心上清液中加入蛋白酶溶液，測(cè)得其對(duì)苯磺隆的降解率。蛋白酶是用于水解上清液中的某蛋白質(zhì)的，由此可判定實(shí)驗(yàn)假設(shè)是目的菌株能分泌降解苯磺隆的蛋白質(zhì)，若用蛋白酶處理后，可使該蛋白質(zhì)分解，苯磺隆降解率下降，則假設(shè)成立；但是尚需設(shè)置不加入蛋白酶的空白對(duì)照組實(shí)驗(yàn)，否則沒(méi)有說(shuō)服力，因而不合理。