大腸桿菌pUC118質粒的某限制酶唯一酶切序列,位于該質粒的lacZ基因中,lacZ基因中如果沒有插入外源基因,lacZ基因便可表達出β-半乳糖苷酶,當培養(yǎng)基中含有IPTG和X-gal時,X-gal便會被β-半乳糖苷酶水解成藍色,大腸桿菌將形成藍色菌落;如果lacZ基因中插入了外源基因,帶有pUC118質粒的大腸桿菌便不能表達β-半乳糖苷酶,培養(yǎng)基中的X-gal不會被水解成藍色,大腸桿菌將形成白色菌落。pUC118還攜帶了氨芐青霉素抗性基因。下圖是利用lacZ基因的插入失活篩選重組質粒示意圖。
據(jù)圖回答下列問題:
(1)作為受體大腸桿菌應________,以方便篩選已導入重組質粒的受體大腸桿菌。取用氯化鈣溶液處理(增加其細胞壁的通透性)過的受體大腸桿菌,置于試管Ⅱ中,并加入________。
(2)圖中的選擇培養(yǎng)基中除含有大腸桿菌必需的葡萄糖、氮源、無機鹽、水、生長因子等營養(yǎng)物質外,還應加入________等物質,用以篩選導入了重組質粒的受體大腸桿菌。
(3)將上述處理后的大腸桿菌置于圖中選擇培養(yǎng)基上培養(yǎng),以檢測受體大腸桿菌是否導入重組質粒,請預測菌落的顏色,并分析結果:
①.________________________________________。
②.________________________________________。
(1)不含氨芐青霉素抗性基因(或對氨芐青霉素敏感)    在試管Ⅰ中制備好的DNA
(2)IPTG、X-gal、氨芐青霉素
(3)①.如果長出藍色菌落,說明自連的運載體pUC118質粒已轉入受體菌,但目的基因沒有接入運載體(或說明重組質粒沒導入受體大腸桿菌)
②.如果長出白色菌落,說明重組質粒已導入受體大腸桿菌
練習冊系列答案
相關習題

科目:高中生物 來源: 題型:閱讀理解

大腸桿菌是生物學及醫(yī)學實驗研究中最有代表性的模式生物之一。

(1)大腸桿菌與飲水安全。

    國家規(guī)定,每升飲用水中大腸菌數(shù)不得超過3個。有人測定某飲用水中的大腸桿菌(群)數(shù):先將1升飲用水水樣濃縮至10毫升,然后各取濃縮水樣的2毫升,涂布到5個培養(yǎng)皿中進行培養(yǎng),培養(yǎng)后計數(shù)的菌落數(shù)分別是9、12、5、8、6。請回答下列問題:

1)根據(jù)上述結果計算,被檢水樣大腸菌群數(shù)為________,水樣________ (能、不能)達標。2)檢測過程中需要培養(yǎng)大腸菌菌群,培養(yǎng)基配方如下:

瓊脂

蛋白胨

乳糖

蔗糖

K2HPO4

伊紅

美藍

蒸餾水

pH

15 g

10 g

5 g

5 g

2 g

0.4 g

0. 065 g

1000 mL

7.2

    從培養(yǎng)基配方可以確定大腸桿菌的營養(yǎng)類型是                 ;從培養(yǎng)基功能可以確定其類型是              培養(yǎng)基,理由是                                    。

3)培養(yǎng)大腸桿菌時,在接種前需要檢測培養(yǎng)基是否被污染。對于固體培養(yǎng)基應采用的檢測方法是_______________________________________________________。

(2)大腸桿菌與基因工程。

大腸桿菌pUC118質粒的某限制酶唯一酶切序列,位于該質粒的lacZ基因中。lacZ基因中如果沒有插入外源基因,lacZ基因便可表達出b-半乳糖苷酶。當培養(yǎng)基中含有IPTG和X-gal時,X-gal便會被b-半乳糖苷酶水解成藍色,大腸桿菌將形成藍色菌落;如果lacZ基因中插入了外源基因,帶有pUC118質粒的大腸桿菌便不能表達b-半乳糖苷酶,培養(yǎng)基中的X-gal不會被水解成藍色,大腸桿菌將形成白色菌落。pUC118還攜帶了氨芐青霉素抗性基因。下圖是利用lacZ基因篩選重組質粒示意圖。據(jù)圖回答問題:

1)質粒結構特點是                       。

2)作為受體大腸桿菌應不含氨芐青霉素抗性基因,原因是                            

3)試管Ⅱ中用氯化鈣溶液處理(增加其細胞壁的通透性)過的受體大腸桿菌,并在培養(yǎng)基中加入                                  

3)將上述處理后的大腸桿菌置于圖中培養(yǎng)基上培養(yǎng),以檢測受體大腸桿菌是否導入重組質粒,請預測菌落的顏色,并分析結果:

                                                                               。

                                                                               。

(3)選擇大腸桿菌作為研究材料,主要原因是:它體積小、結構簡單、             、

             等。

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科目:高中生物 來源:浙江省五校2009—2010學年度高三第一次聯(lián)考(生物)試題 題型:綜合題

大腸桿菌pUC118質粒的某限制酶唯一酶切序列,位于該質粒的lacZ基因中,lacZ基因中如果沒有插入外源基因,lacZ基因便可表達出b-半乳糖苷酶,當培養(yǎng)基中含有IPTG和X-gal時,X-gal便會被b-半乳糖苷酶水解成藍色,大腸桿菌將形成藍色菌落;如果lacZ基因中插入了外源基因,帶有pUC118質粒的大腸桿菌便不能表達b-半乳糖苷酶,培養(yǎng)基中的X-gal不會被水解成藍色,大腸桿菌將形成白色菌落。pUC118還攜帶了氨芐青霉素抗性基因。下圖是利用lacZ基因的插入失活篩選重組質粒示意圖。據(jù)圖回答下列問題:

(1)作為受體大腸桿菌應__________________________,以方便篩選已導入重組質粒的受體大腸桿菌。取用氯化鈣溶液處理(增加其細胞壁的通透性)過的受體大腸桿菌,置于試管Ⅱ中,并加入          。
(2)圖中的選擇培養(yǎng)基中除含有大腸桿菌必需的葡萄糖、氮源、無機鹽、水、生長因子等營養(yǎng)物質外,還應加入____________________等物質,用以篩選導入了重組質粒的受體大腸桿菌。
(3)將上述處理后的大腸桿菌置于圖中選擇培養(yǎng)基上培養(yǎng),以檢測受體大腸桿菌是否導入重組質粒,請預測菌落的顏色,并分析結果:
                                                          
                                                           。

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科目:高中生物 來源:2014屆浙江東陽中學高三10月月考生物試卷(解析版) 題型:選擇題

大腸桿菌pUC118質粒具有氨芐青霉素抗性基因,某限制性核酸內切酶唯一切點位于該質粒的lacZ基因中。在特定的選擇培養(yǎng)基中,若lacZ基因沒有被破壞,則大腸桿菌菌落呈藍色;若lacZ基因被破壞,則菌落呈白色。右圖表示轉基因操作過程。下列說法錯誤的是

A.作為受體大腸桿菌應不含氨芐青霉素抗性基因,以便于篩選

B.若大腸桿菌的菌落為藍色,則質粒未導入大腸桿菌

C.選擇培養(yǎng)基中除必需的營養(yǎng)物質外,還應加入適量氨芐青霉素

D.應選擇白色菌落的大腸桿菌進行擴大培養(yǎng)

 

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科目:高中生物 來源:2012-2013學年浙江省高三第一次月考生物試卷(解析版) 題型:綜合題

(6分)大腸桿菌pUC118質粒的某限制酶唯一酶切序列,位于該質粒的lacZ基因中,lacZ基因中如果沒有插入外源基因,lacZ基因便可表達出b-半乳糖苷酶,當培養(yǎng)基中含有IPTG和X-gal時,X-gal便會被b-半乳糖苷酶水解成藍色,大腸桿菌將形成藍色菌落;如果lacZ基因中插入了外源基因,帶有pUC118質粒的大腸桿菌便不能表達b-半乳糖苷酶,培養(yǎng)基中的X-gal不會被水解成藍色,大腸桿菌將形成白色菌落。pUC118還攜帶了氨芐青霉素抗性基因。右圖是利用lacZ基因的插入失活篩選重組質粒示意圖。據(jù)圖回答下列問題:

(1)作為受體大腸桿菌應______________________,以方便篩選已導入重組質粒的受體大腸桿菌。取用氯化鈣溶液處理(目的是                        )過的受體大腸桿菌,置于試管Ⅱ中,并加入                     

(2)圖中的培養(yǎng)基中除含有大腸桿菌必需的葡萄糖、氮源、無機鹽、水、生長因子等營養(yǎng)物質外,還應加入___________等物質,用以篩選導入了重組質粒的受體大腸桿菌。

(3)將上述處理后的大腸桿菌置于圖中選擇培養(yǎng)基上培養(yǎng),以檢測受體大腸桿菌是否導

入重組質粒,請預測菌落的顏色,并分析結果:

                                                                         。

                                                                         。

 

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科目:高中生物 來源:浙江省五校2009—2010學年度高三第一次聯(lián)考(生物)試題 題型:選擇題

大腸桿菌pUC118質粒的某限制酶唯一酶切序列,位于該質粒的lacZ基因中,lacZ基因中如果沒有插入外源基因,lacZ基因便可表達出b-半乳糖苷酶,當培養(yǎng)基中含有IPTG和X-gal時,X-gal便會被b-半乳糖苷酶水解成藍色,大腸桿菌將形成藍色菌落;如果lacZ基因中插入了外源基因,帶有pUC118質粒的大腸桿菌便不能表達b-半乳糖苷酶,培養(yǎng)基中的X-gal不會被水解成藍色,大腸桿菌將形成白色菌落。pUC118還攜帶了氨芐青霉素抗性基因。下圖是利用lacZ基因的插入失活篩選重組質粒示意圖。據(jù)圖回答下列問題:

   (1)作為受體大腸桿菌應__________________________,以方便篩選已導入重組質粒的受體大腸桿菌。取用氯化鈣溶液處理(增加其細胞壁的通透性)過的受體大腸桿菌,置于試管Ⅱ中,并加入           。

   (2)圖中的選擇培養(yǎng)基中除含有大腸桿菌必需的葡萄糖、氮源、無機鹽、水、生長因子等營養(yǎng)物質外,還應加入____________________等物質,用以篩選導入了重組質粒的受體大腸桿菌。

   (3)將上述處理后的大腸桿菌置于圖中選擇培養(yǎng)基上培養(yǎng),以檢測受體大腸桿菌是否導入重組質粒,請預測菌落的顏色,并分析結果:

                                                           。

                                                            。

 

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