Question

9．某質(zhì)粒上有SalⅠ、HindⅢ、BamHⅠ三種限制酶切割位點(diǎn)，同時(shí)還含有抗四環(huán)素基因和抗氨芐青霉素基因．利用此質(zhì)粒獲得轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草的過程如圖所示，請(qǐng)回答下列問題：
（1）從基因文庫中獲得的抗鹽基因可用PCR技術(shù)進(jìn)行擴(kuò)增．將抗鹽基因?qū)�入煙草�?xì)胞內(nèi)，使煙草植株產(chǎn)生抗鹽性狀，這種新性狀的產(chǎn)生所依據(jù)的原理基因重組．
（2）如果將抗鹽基因直接導(dǎo)入煙草細(xì)胞，一般情況下，煙草不會(huì)具有抗鹽特性，原因是抗鹽基因在煙草細(xì)胞中不能復(fù)制，也不能轉(zhuǎn)錄．
（3）在構(gòu)建重組質(zhì)粒時(shí)，應(yīng)選用SalⅠ和HindⅢ兩種酶對(duì)質(zhì)粒和含抗鹽基因的DNA進(jìn)行切割，以保證重組DNA序列的唯一性．
（4）為了確定抗鹽煙草培育成功，既要用放射性同位素標(biāo)記的抗鹽基因作探針進(jìn)行分子雜交檢測(cè)，又要用抗原-抗體雜交的方法從個(gè)體水平鑒定煙草植株的耐鹽性．

Answer 1

分析 根據(jù)題意和圖示分析可知：質(zhì)粒和含抗鹽基因的DNA片段上均有SalⅠ、HindⅢ、BamHⅠ三種限制性核酸內(nèi)切酶酶切位點(diǎn)．
在質(zhì)粒上，這三種限制酶的切割位點(diǎn)都位于抗四環(huán)素基因上，用其任何一種酶都會(huì)破壞四環(huán)素抗性基因；在含抗鹽基因的DNA片段上，BamHⅠ位于目的基因上，用BamHⅠ切割會(huì)破壞目的基因．

解答 解：（1）從基因文庫中獲得的目的基因可用PCR技術(shù)進(jìn)行擴(kuò)增．將抗鹽基因?qū)�入煙草�?xì)胞內(nèi)，使煙草植株產(chǎn)生抗鹽性狀，這種新性狀的產(chǎn)生所依據(jù)的原理是基因重組．
（2）如果將抗鹽基因直接導(dǎo)入煙草細(xì)胞，一般情況下，培育出的煙草植株不具有抗鹽特性，原因是抗鹽基因在煙草細(xì)胞中不能復(fù)制和轉(zhuǎn)錄，所以需要構(gòu)建基因表達(dá)載體．
（3）只要SalⅠ酶切割含有目的基因的DNA與質(zhì)粒，形成相同的黏性末端，容易發(fā)生自身連接和反向接入；HindⅢ會(huì)破壞目的基因；則在構(gòu)建重組質(zhì)粒時(shí)，應(yīng)選用SalⅠ、HindⅢ兩種酶對(duì)質(zhì)粒和含抗鹽基因的DNA進(jìn)行切割，以保證重組DNA序列的唯一性．
（4）探針是指用放射性同位素標(biāo)記的目的基因（抗鹽基因）．除了從分子水平上進(jìn)行檢測(cè)，還可以從個(gè)體水平上進(jìn)行鑒定，即用一定濃度的鹽水澆灌煙草植株來鑒定煙草的耐鹽性．
故答案為：
（1）PCR 基因重組
（2）復(fù)制  轉(zhuǎn)錄
（2）SalⅠ和HindⅢ質(zhì)粒和含抗鹽基因的DNA
（3）終止子 RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的位點(diǎn)并驅(qū)動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄出mRNA 鑒定受體細(xì)胞中是否含有目的基因并篩選出含目的基因的受體細(xì)胞
（4）抗鹽基因   抗原-抗體雜交

點(diǎn)評(píng) 本題考查基因工程和植物組織培養(yǎng)的相關(guān)知識(shí)，意在考查學(xué)生識(shí)圖能力和判斷能力，運(yùn)用所學(xué)知識(shí)綜合分析問題和解決問題的能力．