Question

基因敲除是根據(jù)DNA重組原理發(fā)展起來的一門新興技術(shù)。通常用設(shè)計(jì)好的DNA片段替代動(dòng)物細(xì)胞內(nèi)的基因片段，從而達(dá)到基因敲除的目的。運(yùn)用基因敲除技術(shù)構(gòu)建基因敲除動(dòng)物模型是研究基因功能中較為普遍的一種方法，其基本原理如下圖所示。

請(qǐng)回答下列問題：
(1)在將目的基因?qū)�人受體細(xì)胞前，需要構(gòu)建一個(gè)基因表達(dá)載體。一個(gè)理想的基因表達(dá)載體，通常由啟動(dòng)子、終止子、目的基因和_______等四部分組成。在此過程中，所需使用的相關(guān)工具酶是________。
(2)如果要獲得一只含目的基因的小鼠，則選擇的受體細(xì)胞通常為____，基因?qū)�人該�?xì)胞時(shí)，可以采用____等方法。
(3)上述途徑所獲得的動(dòng)物，其后代并非每一個(gè)個(gè)體都含目的基因，原因是____________。
(4)假設(shè)通過基因敲除構(gòu)建了一個(gè)非球形紅細(xì)胞性貧血(Ⅱ型)模型動(dòng)物，該動(dòng)物因丙酮酸激酶缺陷或葡萄糖-6-磷酸脫氫酶(G-6-PD)缺陷，使紅細(xì)胞膜變化引起紅細(xì)胞自溶現(xiàn)象，但若向該動(dòng)物注射ATP后，自溶現(xiàn)象可明顯降低。由此可表明，基因?qū)ι�物性狀的控制方式之一是：_______________。
(5)某實(shí)驗(yàn)小組向正常小鼠胚胎細(xì)胞內(nèi)導(dǎo)入某“X基因”后，發(fā)現(xiàn)靶基因能正常轉(zhuǎn)錄形成mRNA，但細(xì)胞內(nèi)卻不再合成相應(yīng)蛋白質(zhì)，其原因最可能是_____________。

Answer 1

(1)標(biāo)記基因   限制酶、DNA連接酶
(2)受精卵 顯微注射法(或病毒感染法)
(3)轉(zhuǎn)基因動(dòng)物為雜合體，在形成生殖細(xì)胞時(shí)等位基因發(fā)生分離
(4)基因通過控制酶的合成來控制代謝過程，進(jìn)而控制生物性狀
(5)“X基因”轉(zhuǎn)錄形成的mRNA與靶基因控制合成的mRNA雜交，抑制其控制合成G酶(蛋白質(zhì))(或抑制了目的基因的翻譯過程)