Question

在赫爾希和蔡斯的噬菌體侵染細(xì)菌實(shí)驗(yàn)中，用32P標(biāo)記的噬菌體侵染大腸桿菌，在理論上，上清液中不含放射性，下層沉淀物中具有很高的放射性；而實(shí)驗(yàn)的實(shí)際最終結(jié)果顯示：在離心上層液體中，也具有一定的放射性，而下層的放射性強(qiáng)度比理論值略低。

（1）在赫爾希和蔡斯的噬菌體侵染細(xì)菌實(shí)驗(yàn)中，采用的實(shí)驗(yàn)方法是_______________。

（2）在理論上，上層液放射性應(yīng)該為0，其原因是：理論上講，噬菌體已將含32P的DNA全部注入大腸桿菌內(nèi)，上清液中只含噬菌體的________________________________

（3）由于實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)和理論數(shù)據(jù)之間有較大的誤差，由此對(duì)實(shí)驗(yàn)過程進(jìn)行誤差分析：
a.在實(shí)驗(yàn)中，從噬菌體和大腸桿菌混合培養(yǎng)，到用離心機(jī)分離，這一段時(shí)間如果過長(zhǎng)，會(huì)使上清液的放射性含量升高，其原因是：噬菌體在大腸桿菌內(nèi)增殖后釋放出來，經(jīng)離心后______________________________。
b.在實(shí)驗(yàn)中，如果有一部分噬菌體沒有侵染到大腸桿菌細(xì)胞內(nèi)，將__________(填“是”或“不是”)誤差的來源，理由是：沒有侵入大腸桿菌的噬菌體經(jīng)離心后分布于上清液中，使上清液

Answer 1

（1）同位素標(biāo)記法（同位素示蹤法）

（2）蛋白質(zhì)外殼

（3）a: 分布在上清液中 b: 是 出現(xiàn)放射性

沉淀物中放射性很低，上清液中放射性很高，說明是用25S標(biāo)記的噬菌體的蛋白質(zhì)外殼。噬菌體的繁殖必須在大腸桿菌內(nèi)進(jìn)行，要獲得用35S標(biāo)記的噬菌體，需要先用35S的培養(yǎng)基培養(yǎng)大腸桿菌，再用噬菌體云去感染被35S標(biāo)記的大腸桿菌，才可以得到被35S標(biāo)記的噬菌體。噬菌體侵染細(xì)菌實(shí)驗(yàn)中，采用的實(shí)驗(yàn)方法是同位素標(biāo)記法。在DNA中含有P元素，蛋白質(zhì)中沒有，故32P只能進(jìn)入噬菌體的DNA中。在侵染過程中，由于噬菌體的DNA全部注入大腸桿菌，離心后，上清液中是噬菌體蛋白質(zhì)外殼，沉淀物中是被侵染的大腸桿菌，因此上清液中沒有放射性。從噬菌體和大腸桿菌混合培養(yǎng)到用離心機(jī)分離，如果時(shí)間過長(zhǎng)會(huì)使帶有放射性的噬菌體從大腸桿菌中釋放出來，使上清液帶有放射性，如果部分噬菌體侵染到大腸桿菌細(xì)胞內(nèi)，也會(huì)使上清液帶有放射性。噬菌體侵染細(xì)菌實(shí)驗(yàn)表明，在噬菌體中，親代和子代之間具有連續(xù)性的物質(zhì)是DNA，而不是蛋白質(zhì)，證明了DNA是噬菌體的遺傳物質(zhì)。N元素在DNA和蛋白質(zhì)中都含有，因此不能用15N標(biāo)記DNA。