【題目】圖1表示含有目的基因D的DNA片段長度(bp即堿基對(duì))和部分堿基序列,圖2表示一種質(zhì)粒的結(jié)構(gòu)和部分堿基序列.現(xiàn)有MspⅠ、BamHⅠ、MboⅠ、SmaⅠ4種限制性核酸內(nèi)切酶切割的堿基序列和酶切位點(diǎn)分別為C↓CGG、G↓GATCC、↓GATC、CCC↓GGG.請(qǐng)回答下列問題:

(1)基因工程的核心步驟是______________。

(2)若用限制酶SmaⅠ完全切割圖1中DNA片段,產(chǎn)生的末端是__末端。

(3)若圖1中虛線方框內(nèi)的堿基對(duì)被T﹣A堿基對(duì)替換,那么基因D就突變?yōu)榛騞.從雜合子分離出圖1及其對(duì)應(yīng)的DNA片段,用限制酶SmaⅠ完全切割,產(chǎn)物中共有__種不同DNA片段.

(4)在導(dǎo)入重組質(zhì)粒后,為了篩選出含重組質(zhì)粒的大腸桿菌,一般需要用添加__的培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng).

(5)啟動(dòng)子是一段有特殊結(jié)構(gòu)的DNA片段,位于基因的首端,它是__識(shí)別與結(jié)合的位點(diǎn),促進(jìn)轉(zhuǎn)錄的開始.

【答案】基因表達(dá)載體的構(gòu)建 4 抗生素B RNA聚合酶

【解析】

根據(jù)題干信息和圖形分析可知,外源DNA含有MspⅠ、BamHI、MboISmaI4種限制性核酸內(nèi)切酶的識(shí)別序列,其中限制酶MspⅠ和SmaⅠ的切割位點(diǎn)在目的基因D上;質(zhì)粒含有MspⅠ、MspIBamHI、MboI4種限制性核酸內(nèi)切酶的識(shí)別序列,其中BamHI酶的切割位點(diǎn)位于抗生素A的抗性基因上;MboI酶的切割位點(diǎn)位于抗生素B和抗生素A的抗性基因上。

1)基因表達(dá)載體的構(gòu)建是基因工程的核心步驟。

(2)SmaⅠ識(shí)別和切割位點(diǎn)是CCC↓GGG,因此若用限制酶SmaⅠ完全切割圖1中DNA片段,產(chǎn)生的末端是平末端。

(3)根據(jù)題意分析,雜合子的基因型為Dd,其中D基因片段有兩個(gè)SmaⅠ酶切位點(diǎn),完全切割后出現(xiàn)三個(gè)片段長度分別是534+3=537bp、796-3-3=790bp、658+3=661bp,發(fā)生基因突變后的d基因片段只有一個(gè)SmaⅠ酶切位點(diǎn),完全切割后出現(xiàn)兩個(gè)片段長度分別是1327bp、661bp,所以從雜合子中分離的DNA片段被限制酶SmaⅠ完全切割后形成會(huì)四種不同的DNA片段。

4)用限制酶BamHⅠ切割質(zhì)粒會(huì)破壞抗生素A抗性基因,但不會(huì)破壞抗生素B抗性基因,所以導(dǎo)入重組質(zhì)粒的大腸桿菌能在含有抗生素B的培養(yǎng)基上生存,因此為了篩選出含重組質(zhì)粒的大腸桿菌,一般需要用添加抗生素B的培養(yǎng)基培養(yǎng)。

(5)基因表達(dá)載體上的啟動(dòng)子是RNA聚合酶的結(jié)合位點(diǎn)。

練習(xí)冊(cè)系列答案
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【題目】利用裝置甲,在相同條件下分別將綠色植物E、F的葉片制成大小相同的“圓葉”,抽出空氣,進(jìn)行光合作用速率測(cè)定。圖乙是利用裝置甲測(cè)得的數(shù)據(jù)繪制成的坐標(biāo)圖。下列敘述正確的是(  )

A. 從圖乙可看出,F(xiàn)植物適合在較強(qiáng)光照下生長

B. 光照強(qiáng)度為1 klx,裝置甲中放置植物E葉片進(jìn)行測(cè)定時(shí),液滴向左移動(dòng)

C. 光照強(qiáng)度為3 klx時(shí),E、F兩種植物的葉片合成有機(jī)物的速率之比為3∶2

D. 光照強(qiáng)度為6 klx時(shí),裝置甲中E植物葉片比F植物葉片浮到液面所需時(shí)間短

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【題目】某DNA分子上有4個(gè)BamH I的酶切位點(diǎn),如下圖,用BamH I酶切該DNA分子可以生成五種不同長度的DNA片段,F(xiàn)有足夠多的該DNA分子,若每個(gè)DNA分子至少有一處位點(diǎn)被該酶切斷,那么經(jīng)酶切后,最多能產(chǎn)生多少種長度不同的DNA片段?( )

A. 9

B. 12

C. 14

D. 15

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【題目】植物細(xì)胞中具有色素的一組細(xì)胞器是

A.線粒體和高爾基體B.葉綠體和液泡

C.中心體和核糖體D.內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和液泡

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【題目】如圖表示細(xì)胞核的結(jié)構(gòu),下列關(guān)于細(xì)胞核的結(jié)構(gòu)說法錯(cuò)誤的是

A.為核糖體,為染色質(zhì),為核孔

B.圖中的外層膜直接相連,且②③都有附著

C.為核膜,能夠?qū)⒑藘?nèi)物質(zhì)與細(xì)胞質(zhì)分開

D.是遺傳物質(zhì)儲(chǔ)存和復(fù)制的場(chǎng)所,也是細(xì)胞的控制中心

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【題目】某同學(xué)利用綠色植物葉肉細(xì)胞進(jìn)行質(zhì)壁分離及復(fù)原實(shí)驗(yàn),得到圖, 據(jù)圖分析下列說法正確的是

A.若該細(xì)胞正在失水,則細(xì)胞液的吸水能力逐漸下降

B.若該細(xì)胞置于高濃度KNO3溶液中,一定能觀察到質(zhì)壁分離后自動(dòng)復(fù)原

C.若該細(xì)胞置于滴有少量紅墨水的質(zhì)量濃度為0.3g/ml的蔗糖溶液中,則b處為紅色

D.若該細(xì)胞剛好處于平衡狀態(tài),則a、b、c三種溶液的濃度基本相等

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【題目】下列關(guān)于真核細(xì)胞生物膜系統(tǒng)的敘述,錯(cuò)誤的是( 。
A.有絲分裂過程中核膜的變化具有周期性
B.成熟植物細(xì)胞的液泡膜具有選擇透過性
C.高爾基體膜可轉(zhuǎn)變?yōu)榧?xì)胞膜
D.丙酮酸的分解在線粒體內(nèi)膜上進(jìn)行

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【題目】下列關(guān)于植物激素的敘述不正確的是(

A.脫落酸促進(jìn)細(xì)胞分裂B.赤霉素促進(jìn)細(xì)胞伸長

C.乙烯促進(jìn)果實(shí)成熟D.細(xì)胞分裂素主要促進(jìn)細(xì)胞分裂

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【題目】已知某花花色受三對(duì)獨(dú)立遺傳的等位基因(A和a、B和b、C和c)控制,其途如下圖所示,其中藍(lán)色和紅色混合后顯紫色,藍(lán)色和黃色混合形成綠色,F(xiàn)有某紫花植株自交子代出現(xiàn)白花和黃花。據(jù)此判斷下列敘述不正確的是

A. 用于自交的紫花植株的基因型為AaBbCc

B. 自然種群中白花植株的基因型有3種

C. 自交子代出現(xiàn)的黃花植株的比例為3/64

D. 自交子代中綠花植株出現(xiàn)概率為9/64,紅花植株出現(xiàn)概率為3/64

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