Question

【題目】現(xiàn)代生物技術(shù)能利用普通山羊生產(chǎn)人β一酪蛋白。請(qǐng)回答有關(guān)問題：

（1）首先需要從人_______中獲得人β一酪蛋白基因，將其與運(yùn)載體結(jié)合成重組人β一酪蛋白基因表達(dá)載體，此過程需要的酶是_______。通過顯微注射技術(shù)將表達(dá)載體注射到_______中。

（2）通過動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)，將培養(yǎng)到_______時(shí)期的胚胎進(jìn)行移植，移植前需要對(duì)受體進(jìn)行_______處理，使其能正常著床，最終獲得表達(dá)人β一酪蛋白的轉(zhuǎn)基因山羊。

（3）要取得經(jīng)濟(jì)效益，可通過_______技術(shù)獲得擴(kuò)大的轉(zhuǎn)基因山羊群體。

（4）若用分子水平方法判斷獲得的轉(zhuǎn)基因山羊中人β一酪蛋白基因是否表達(dá)，可檢測(cè)_______

A．質(zhì)粒載體 B．轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物 C．人β一酪蛋白基因 D．病原微生物

Answer 1

【答案】cDNA文庫(kù)（基因文庫(kù)） 限制性核酸內(nèi)切酶，DNA連接酶 普通山羊的受精卵（普通山羊的卵母細(xì)胞） 桑椹胚（或“囊胚”） 同期發(fā)情 核移植（或“胚胎分割移植”） B

【解析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：

1、目的基因的獲取：方法有從基因文庫(kù)中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。

2、基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。

3、將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不同。將目的基因?qū)�入植物�?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)�入�?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)�入微生物�?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。

4、目的基因的檢測(cè)與鑒定：分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因—DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA—分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)—抗原-抗體雜交技術(shù)；④個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。

（1）本題中獲取β一酪蛋白基因可以從人的cDNA文庫(kù)（基因文庫(kù)）直接獲取目的基因；基因表達(dá)載體的構(gòu)建需要用限制酶切割運(yùn)載體，然后用DNA連接酶將目的基因和運(yùn)載體連接；基因工程中常用動(dòng)物的受精卵作為受體細(xì)胞，因此通過顯微注射技術(shù)，將基因表達(dá)載體注射到普通山羊的受精卵中。

（2）胚胎移植一般選用發(fā)育良好、形態(tài)正常的桑椹胚或囊胚進(jìn)行移植；為了使胚胎移植能成功，需要對(duì)代孕山羊進(jìn)行同期發(fā)情處理，使之與供體的生理狀況保持相同，使胚胎能正常著床。

（3）可通過胚胎分割移植或核移技術(shù)，獲得更多個(gè)體，擴(kuò)大轉(zhuǎn)基因山羊群體。

（4）若從分子水平檢測(cè)轉(zhuǎn)基因山羊中人β一酪蛋白基因是否表達(dá)，可檢測(cè)其是否轉(zhuǎn)錄出相應(yīng)的mRNA，或翻譯出相應(yīng)的蛋白質(zhì)，B正確。

故選B。