PCR(多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng))技術(shù)是一項在生物體外復(fù)制特定的DNA片段的核酸合成技術(shù),下圖表示合成過程,請據(jù)圖分析回答:
(1)A過程高溫使DNA變性解旋,對該過程的原理敘述,正確的是 _________________。
A.該過程用到耐高溫的解旋酶破壞氫鍵
B.該過程用到限制酶破壞磷酸二酯鍵
C.該過程不需要解旋酶的作用
D.該過程與人體細(xì)胞的過程完全相同
(2)C過程要用到的酶是。這種酶在高溫下仍保持活性,因此在PCR擴增時可以_________________加入,_________________(需要/不需要)再添加。PCR反應(yīng)除提供酶外,還需要滿足的基本條件有:_________________________________。
(3)如果把模板DNA的兩條鏈用15N標(biāo)記,游離的脫氧核苷酸不做標(biāo)記,控制“94℃~55℃~72℃”溫度循環(huán)3次,則在形成的子代DNA中含有15N標(biāo)記的DNA占_________________。
(4)如果模板DNA分子共有a個堿基對,其中含有胞嘧啶m個,則該DNA復(fù)制10次,需要加入胸腺嘧啶脫氧核苷酸個_________________。
(5)PCR中由堿基錯配引起的變異屬于_________________。假設(shè)對一個DNA進行擴增,第一次循環(huán)時某一條模板鏈上發(fā)生堿基錯配,則擴增若干次后檢測所用DNA的擴增片段,與原DNA相應(yīng)片段相同的占_________________。
科目:高中生物 來源: 題型:
(2010屆萊蕪期末)下圖表示在生物體外獲取DNA(或目的基因)的兩種方式。
圖一表示經(jīng)PCR技術(shù)擴增獲取DNA的過程。PCR是多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)的縮寫。PCR方法模仿體內(nèi)DNA的復(fù)制過程,首先使DNA變性(加熱至94℃),兩條鏈解開為單鏈;然后冷卻(至55℃)使引物(DNA復(fù)制時所需的約20個核苷酸的短鏈)與單鏈相應(yīng)的堿基互補序列結(jié)合;再在熱穩(wěn)定DNA聚合酶(TaqDNA聚合酶)作用下進行延伸(加熱至72℃),即以4種脫氧核苷酸為原料,在引物的引導(dǎo)下合成與模板互補的DNA新鏈。如果2條DNA單鏈各補上一條新鏈即成2個DNA分子。如此反復(fù)循環(huán),DNA以指數(shù)形式擴增。上述過程可以在PCR擴增儀中自動完成。圖二表示反轉(zhuǎn)錄形成DNA的過程。即以mRNA為模板,反轉(zhuǎn)錄成互補的單鏈DNA,然后在酶的作用下合成雙鏈DNA。請據(jù)圖分析回答:
(1)圖一中的DNA聚合酶的化學(xué)本質(zhì)是________,它與人體內(nèi)的DNA聚合酶相比具有________特性。
(2)圖一A中的DNA解旋過程在人體內(nèi)可由________催化完成。C過程復(fù)制方式的特點是________。
(3)圖二E中的堿基互補配對方式與圖一C中的不同之處是______________。假設(shè)圖一中的一個模板DNA分子中有800個堿基對,其中含有腺嘌呤600個,若通過PCR技術(shù)共消耗周圍環(huán)境中游離的胞嘧啶脫氧核苷酸6200個,則該模板DNA在PCR擴增儀中已經(jīng)復(fù)制了________次。
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科目:高中生物 來源:2011-2012學(xué)年山西省太原五中高二3月月考考試文科生物試卷(帶解析) 題型:綜合題
近20年來,PCR技術(shù)(多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng))成為分子生物學(xué)實驗室的一種常規(guī)實驗手段,其原理是利用DNA半保留復(fù)制,在試管中進行DNA的人工復(fù)制(如圖),在短時間內(nèi),將DNA擴增幾百萬倍甚至幾十億倍,從而使實驗室所需要的遺傳物質(zhì)不再受限于活的生物體。
(1)加熱使DNA雙鏈間的__________鍵完全打開,稱為________;而在細(xì)胞中是在________酶的作用下進行的。
(2)如果只需要大量克隆模板DNA中間的某個特定區(qū)段,應(yīng)該加入________種特定的引物。當(dāng)溫度降低至55 ℃時,引物與兩條“舒展”的模板的特定位置結(jié)合,在DNA聚合酶的作用下,只能在引物的________端連接脫氧核苷酸,兩條子鏈的延伸方向都是____________。
(3)PCR技術(shù)的必需條件,除了模板、原料、酶之外,至少還有三個條件,即液體環(huán)境、適宜的________和________,前者由________自動調(diào)控,后者則靠____來維持。
(4)通過PCR技術(shù)使DNA分子大量復(fù)制,如果將一個用15N標(biāo)記的DNA分子放入試管中,以14N標(biāo)記的脫氧核苷酸為原料,連續(xù)復(fù)制四次之后,則15N標(biāo)記的DNA分子占全部DNA分子總數(shù)的比例是________。
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科目:高中生物 來源:2011屆高考復(fù)習(xí)單元檢測:選修一生物技術(shù)實踐專題 題型:綜合題
(2010屆萊蕪期末)下圖表示在生物體外獲取DNA(或目的基因)的兩種方式。
圖一表示經(jīng)PCR技術(shù)擴增獲取DNA的過程。PCR是多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)的縮寫。PCR方法模仿體內(nèi)DNA的復(fù)制過程,首先使DNA變性(加熱至94℃),兩條鏈解開為單鏈;然后冷卻(至55℃)使引物(DNA復(fù)制時所需的約20個核苷酸的短鏈)與單鏈相應(yīng)的堿基互補序列結(jié)合;再在熱穩(wěn)定DNA聚合酶(TaqDNA聚合酶)作用下進行延伸(加熱至72℃),即以4種脫氧核苷酸為原料,在引物的引導(dǎo)下合成與模板互補的DNA新鏈。如果2條DNA單鏈各補上一條新鏈即成2個DNA分子。如此反復(fù)循環(huán),DNA以指數(shù)形式擴增。上述過程可以在PCR擴增儀中自動完成。圖二表示反轉(zhuǎn)錄形成DNA的過程。即以mRNA為模板,反轉(zhuǎn)錄成互補的單鏈DNA,然后在酶的作用下合成雙鏈DNA。請據(jù)圖分析回答:
(1)圖一中的DNA聚合酶的化學(xué)本質(zhì)是________,它與人體內(nèi)的DNA聚合酶相比具有________特性。
(2)圖一A中的DNA解旋過程在人體內(nèi)可由________催化完成。C過程復(fù)制方式的特點是________。
(3)圖二E中的堿基互補配對方式與圖一C中的不同之處是______________。假設(shè)圖一中的一個模板DNA分子中有800個堿基對,其中含有腺嘌呤600個,若通過PCR技術(shù)共消耗周圍環(huán)境中游離的胞嘧啶脫氧核苷酸6200個,則該模板DNA在PCR擴增儀中已經(jīng)復(fù)制了________次。
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科目:高中生物 來源:2013屆山西省高二3月月考考試文科生物試卷(解析版) 題型:綜合題
近20年來,PCR技術(shù)(多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng))成為分子生物學(xué)實驗室的一種常規(guī)實驗手段,其原理是利用DNA半保留復(fù)制,在試管中進行DNA的人工復(fù)制(如圖),在短時間內(nèi),將DNA擴增幾百萬倍甚至幾十億倍,從而使實驗室所需要的遺傳物質(zhì)不再受限于活的生物體。
(1)加熱使DNA雙鏈間的__________鍵完全打開,稱為________;而在細(xì)胞中是在________酶的作用下進行的。
(2)如果只需要大量克隆模板DNA中間的某個特定區(qū)段,應(yīng)該加入________種特定的引物。當(dāng)溫度降低至55 ℃時,引物與兩條“舒展”的模板的特定位置結(jié)合,在DNA聚合酶的作用下,只能在引物的________端連接脫氧核苷酸,兩條子鏈的延伸方向都是____________。
(3)PCR技術(shù)的必需條件,除了模板、原料、酶之外,至少還有三個條件,即液體環(huán)境、適宜的________和________,前者由________自動調(diào)控,后者則靠____來維持。
(4)通過PCR技術(shù)使DNA分子大量復(fù)制,如果將一個用15N標(biāo)記的DNA分子放入試管中,以14N標(biāo)記的脫氧核苷酸為原料,連續(xù)復(fù)制四次之后,則15N標(biāo)記的DNA分子占全部DNA分子總數(shù)的比例是________。
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科目:高中生物 來源:2010-2011學(xué)年高考復(fù)習(xí)單元檢測:選修一生物技術(shù)實踐專題 題型:綜合題
(2010屆萊蕪期末)下圖表示在生物體外獲取DNA(或目的基因)的兩種方式。
圖一表示經(jīng)PCR技術(shù)擴增獲取DNA的過程。PCR是多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)的縮寫。PCR方法模仿體內(nèi)DNA的復(fù)制過程,首先使DNA變性(加熱至94℃),兩條鏈解開為單鏈;然后冷卻(至55℃)使引物(DNA復(fù)制時所需的約20個核苷酸的短鏈)與單鏈相應(yīng)的堿基互補序列結(jié)合;再在熱穩(wěn)定DNA聚合酶(TaqDNA聚合酶)作用下進行延伸(加熱至72℃),即以4種脫氧核苷酸為原料,在引物的引導(dǎo)下合成與模板互補的DNA新鏈。如果2條DNA單鏈各補上一條新鏈即成2個DNA分子。如此反復(fù)循環(huán),DNA以指數(shù)形式擴增。上述過程可以在PCR擴增儀中自動完成。圖二表示反轉(zhuǎn)錄形成DNA的過程。即以mRNA為模板,反轉(zhuǎn)錄成互補的單鏈DNA,然后在酶的作用下合成雙鏈DNA。請據(jù)圖分析回答:
(1)圖一中的DNA聚合酶的化學(xué)本質(zhì)是________,它與人體內(nèi)的DNA聚合酶相比具有________特性。
(2)圖一A中的DNA解旋過程在人體內(nèi)可由________催化完成。C過程復(fù)制方式的特點是________。
(3)圖二E中的堿基互補配對方式與圖一C中的不同之處是______________。假設(shè)圖一中的一個模板DNA分子中有800個堿基對,其中含有腺嘌呤600個,若通過PCR技術(shù)共消耗周圍環(huán)境中游離的胞嘧啶脫氧核苷酸6200個,則該模板DNA在PCR擴增儀中已經(jīng)復(fù)制了________次。
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