Question

【題目】基因工程載體是DNA重組技術(shù)使用的基本工具�；卮鹣铝袉栴}

（1）大腸桿菌的質(zhì)粒常被用來做基因工程中的載體，其主要優(yōu)點(diǎn)是_______________（至少兩項(xiàng)）。基因工程中常使用的載體除質(zhì)粒外，還有_______________（至少兩項(xiàng)）。

（2）在進(jìn)行基因工程操作中，真正被用作載體的質(zhì)粒都是在天然質(zhì)粒的基礎(chǔ)上進(jìn)行人工改造過的。在構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，通過人工改造，基因表達(dá)載體中除了含有目的基因外，還必須有_____________________。構(gòu)建目的基因表達(dá)載體的目的一方面是使目的基因在受體細(xì)胞中_______________，并遺傳給下一代；另一方面，使目的基因能夠_______________，從而得到轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品或生物。

（3）利用乳腺生物反應(yīng)器來生產(chǎn)基因工程藥物時(shí)，與藥用蛋白基因連在一起的是__________啟動(dòng)子，這樣才能使該目的基因在乳腺細(xì)胞中表達(dá)。

（4）農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法常用的載體為____________，構(gòu)建此表達(dá)載體時(shí)，要將目的基因插入到質(zhì)粒的___________上，這樣就能夠通過農(nóng)桿菌的轉(zhuǎn)化作用使目的基因進(jìn)入植物細(xì)胞并插入到染色體中DNA上，使目的基因的遺傳特性得以穩(wěn)定維持和表達(dá)。

Answer 1

【答案】分子小，能自主復(fù)制，有標(biāo)記基因，有多個(gè)酶切位點(diǎn) λ噬菌體的衍生物、動(dòng)植物病毒 啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因 穩(wěn)定存在 表達(dá)并發(fā)揮作用 乳腺蛋白基因 Ti質(zhì)粒 T—DNA

【解析】

運(yùn)載體是基因工程進(jìn)行所必須的工具，在進(jìn)行目的基因的轉(zhuǎn)移時(shí)，常常需要將目的基因與運(yùn)載體相結(jié)合，一般常用的運(yùn)載體有質(zhì)粒，噬菌體和動(dòng)植物病毒。目的基因建構(gòu)時(shí)，要保證形成的重組載體具有目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因，識(shí)記基因工程的基本工具和操作步驟是本題的解題關(guān)鍵。

（1）基因工程中常使用的載體為質(zhì)粒，質(zhì)粒的優(yōu)點(diǎn)有：分子小，分子上有一個(gè)至多個(gè)限制酶切割位點(diǎn)，供外源DNA片段插入，質(zhì)�？稍诩�(xì)胞中進(jìn)行自我復(fù)制，質(zhì)粒DNA分子上有特殊的標(biāo)記基因，供重組DNA的鑒定和選擇；除質(zhì)粒外，λ噬菌體的衍生物、動(dòng)植物病毒也是常用的基因工程載體；

（2）構(gòu)建的表達(dá)載體應(yīng)包括啟動(dòng)子、終止子，以便驅(qū)動(dòng)和停止轉(zhuǎn)錄，標(biāo)記基因的作用是為了鑒別受體細(xì)胞中是否含有目的基因；構(gòu)建目基因表達(dá)載體后，通過復(fù)制原點(diǎn)，目的基因一方面在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在，可以遺傳給下一代；同時(shí)，在啟動(dòng)子的調(diào)控下，目的基因能夠表達(dá)和發(fā)揮作用，從而得到轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品或生物；

（3）如果要利用乳腺生物反應(yīng)器來生產(chǎn)基因工程藥物，啟動(dòng)子必須是乳腺蛋白基因的啟動(dòng)子，這樣才能使該目的基因在乳腺細(xì)胞中表達(dá)；

（4）農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法常用的載體為Ti質(zhì)粒，它含有一段可轉(zhuǎn)移的DNA，這段DNA可轉(zhuǎn)移至受體細(xì)胞，并且整合到受體染色體的DNA上；構(gòu)建表達(dá)載體時(shí)，將目的基因插入到質(zhì)粒的T—DNA上，就能夠使目的基因進(jìn)入植物細(xì)胞并插人到染色體的DNA上，使目的基因的遺傳特性得以穩(wěn)定維持和表達(dá)。