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科目:高中生物 來源:直通2007高考——PCR技術(shù) 題型:013
PCR技術(shù)是一種DNA的擴(kuò)增技術(shù)。在一定條件下,加入模板DNA、DNA聚合酶、dATP、dCTP、dGTP、dTTP可以實(shí)現(xiàn)DNA的擴(kuò)增。據(jù)此判斷不合理的是
A.dATP在DNA擴(kuò)增中可以提供能量,同時(shí)作DNA合成的原料
B.dTTP完全水解后產(chǎn)物有胸腺嘧啶、磷酸、核糖
C.DNA擴(kuò)增過程未加解旋酶,可以通過先適當(dāng)加溫的方法破壞氫鍵,使模板DNA解旋
D.CTP水解脫去兩個(gè)磷酸基后是組成RNA的基本單位之一
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科目:高中生物 來源:2015屆吉林省高二上期期末考試生物卷(解析版) 題型:綜合題
PCR技術(shù)是一種DNA的擴(kuò)增技術(shù),操作步驟簡(jiǎn)介如下:
第一步:準(zhǔn)備反應(yīng)式溶液和模塊DNA。
A.配制聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)溶液:
配方:按如下比例進(jìn)行配制:蒸餾水100、緩沖溶液15、氯化鎂溶液8、引物13、引物23、DNA聚合酶、礦物油1(防止聚合酶在凍結(jié)時(shí)受傷害);dATP、dGTP、dCTP、dTTP每一種各加5。
B.準(zhǔn)備要拷貝的DNA:
提取準(zhǔn)備要拷貝的DNA
(如可以用一牙簽輕刮口腔內(nèi)壁,將牙簽放入蒸餾水中搖動(dòng)。加熱蒸餾水沸騰,使細(xì)胞破碎放出DNA。用離心機(jī)離心后,去除蒸餾水中較大的細(xì)胞碎片。這時(shí)上清液中就有了較純的DNA。)
第二步:聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)。
①將要拷貝的DNA“B”放入反應(yīng)液“A”中。
②水浴加熱。首先,94 ℃,使DNA雙螺旋解旋,歷時(shí)1 min;然后,56 ℃,使引物結(jié)合到DNA上,歷時(shí)90 s;最后,72 ℃,用聚合酶使DNA拷貝,歷時(shí)90 s。③重復(fù)步驟②。每重復(fù)一次,即完成一次拷貝。
分析回答下列問題:
(1)以上材料可以說明( )
A.DNA的復(fù)制必須在活細(xì)胞內(nèi)才能完成
B.DNA能指導(dǎo)蛋白質(zhì)的合成
C.在合適的條件下,非細(xì)胞環(huán)境也能進(jìn)行DNA復(fù)制
D.PCR技術(shù)是一種無性生殖技術(shù)
(2)為什么要加入兩種引物。________________________________________________________________________
________________________________________________________________________。
引物的作用是什么?________________________________________________________________________
________________________________________________________________________。
(3)PCR技術(shù)中用到的DNA聚合酶,取自生長(zhǎng)在溫泉中的一種細(xì)菌,就PCR技術(shù)來講,你認(rèn)為使用這種細(xì)菌中提取的酶較普通的動(dòng)植物體內(nèi)提取的DNA聚合酶的優(yōu)勢(shì)是________________________________________________________________________
________________________________________________________________________。
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科目:高中生物 來源:2013-2014學(xué)年江蘇揚(yáng)州中學(xué)高三上期12月月考試卷生物卷(解析版) 題型:綜合題
(7分)重疊延伸PCR技術(shù)是一種通過寡聚核苷酸鏈之間重疊的部分互相搭橋、互為模板,通過多次PCR擴(kuò)增,從而獲得目的基因的方法。該技術(shù)在擴(kuò)增較長(zhǎng)片段的DNA、不同來源的DNA片段拼接、基因的定點(diǎn)誘變等方面具有廣泛的應(yīng)用前景。右圖是利用重疊延伸PCR技術(shù)擴(kuò)增某目的基因的過程。其主要沒計(jì)思路是用具有互補(bǔ)配對(duì)片段的引物(圖中引物2、引物3),分別PCR,獲得有重疊鏈的兩種 DNA片段,再在隨后的擴(kuò)增反應(yīng)中通過重疊鏈的延伸獲得目的基因。結(jié)合所學(xué)知識(shí),分析下列問題。
(1)引物中G+C的含量影響著引物與模板DNA結(jié)合的穩(wěn)定性,引物中G+C的含量越高,結(jié)合穩(wěn)定性 。
(2)在第一階段獲得兩種具有重疊片段DNA 的過程中,必須將引物l、2和引物3、4 置于不同反應(yīng)系統(tǒng)中,這是因?yàn)?u> 。
(3)引物l、引物2組成的反應(yīng)系統(tǒng)和引物3、引物4組成的反應(yīng)系統(tǒng)中均進(jìn)行一次復(fù)制,共產(chǎn)生 種雙鏈DNA分子。
(4)在引物1、引物2組成的反應(yīng)系統(tǒng)中,經(jīng)第一階段形成圖示雙鏈DNA至少要經(jīng)過 次復(fù)制。
(5)若利用微生物擴(kuò)增該目的基因,其基本步驟包括: 、 、微生物的篩選和培養(yǎng)、從菌群中獲取目的基因。
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科目:高中生物 來源:期末題 題型:單選題
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