(12分)PCR是聚合酶鏈式反應(yīng)簡稱,可以完成特定基因的體外復(fù)制,標準的PCR過程如下圖,一次循環(huán),DNA含量就增加一倍,下圖為一次循環(huán)
(1)PCR中使雙鏈DNA模板的形成單鏈DNA,需要加熱,相當于在細胞內(nèi)完成此過程中 的作用。
(2)在合成互補子鏈過程中,一般不使用DNA聚合酶,而使用Taq酶,請你根據(jù)圖解中有關(guān)信息確定最可能原因是Taq酶 。
(3)合成與模板互補的DNA鏈是以dNTP(三磷酸脫氧核糖核苷酸)為原料,若用脫氧核糖核苷酸則不能形成互補的子鏈,dNTP可用簡略用下圖解表示。
推測:最終單個dNTP連接形成子代DNA鏈時,要斷裂 個磷酸鍵,并同時為DNA鏈的形成提供 。
(4)若要用PCR技術(shù)特異性地拷貝DNA分子上“X基因”,需在PCR反應(yīng)中加入兩種引物,兩種引物及其與模板鏈的結(jié)合位置如下圖1所示。經(jīng)過一次循環(huán)后,產(chǎn)物如下圖2所示。則經(jīng) 輪循環(huán)后,產(chǎn)物中出現(xiàn)如下圖3所示DNA分子;此DNA分子共有 個。
科目:高中生物 來源:2009─2010學(xué)年度黑龍江省大慶實驗中學(xué)下學(xué)期期中考試高二年級生物試卷 題型:綜合題
(16分) PCR是聚合酶鏈式反應(yīng)的縮寫,利用PCR技術(shù)可對目的基因進行擴增。請根據(jù)下面PCR反應(yīng)原理示意圖回答有關(guān)問題:
(1)PCR的原理是 。
(2)PCR技術(shù)擴增DNA,需要的條件有:
① ② ③ ④ ⑤ ⑥Mg2+ ⑦緩沖液
(3)PCR技術(shù)使DNA解鏈是通過 實現(xiàn)的,而不需要 酶。 DNA的這種解鏈現(xiàn)象稱為DNA的 ,在一定的條件下是 (填寫“可逆的”或“不可逆的”)
(4)DNA解鏈后冷卻的目的是讓 與 相結(jié)合。
(5)當溫度加熱至70―75 ℃時,是 酶把 脫氧核苷酸,通過 鍵連接到引物上。如此逐漸延伸形成互補鏈,進而使目的基因加倍。這一點體現(xiàn)了該酶與DNA連接酶的不同。
(6)通過重復(fù)循環(huán)(3)、(4)、(5)過程,使目的基因以 形式擴增。
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科目:高中生物 來源:2010年黑龍江省高二下學(xué)期期中考試生物試題 題型:選擇題
下列說法中正確的有幾項( )
(1)PCR是聚合酶鏈式反應(yīng)的縮寫,通過這一技術(shù),可以在短時間內(nèi)大量擴增目的基因。
(2)在基因工程操作中,真正被用作載體的質(zhì)粒,都是在天然質(zhì)粒基礎(chǔ)上人工改造的。
(3)基因探針是mRNA序列的一段,其上一般具有放射性同位素標記。
(4)基因治療包括體內(nèi)基因治療和體外基因治療。
A.一項 B.兩項 C.三項 D.四項
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科目:高中生物 來源:2010年湖北省高一生物期末考試生物試題 題型:選擇題
(12分 )PCR是聚合酶鏈式反應(yīng)簡稱,可以完成特定基因的體外復(fù)制,標準的PCR過程如下圖,一次循環(huán),DNA含量就增加一倍,下圖為一次循環(huán)
(1)PCR中使雙鏈DNA模板的形成單鏈DNA,需要加熱,相當于在細胞內(nèi)完成此過程中 的作用。
(2)在合成互補子鏈過程中,一般不使用DNA聚合酶, 而使用Taq酶,請你根據(jù)圖解中有關(guān)信息確定最可能原因是Taq酶 。
(3)合成與模板互補的DNA鏈是以dNTP(三磷酸脫氧核糖核苷酸)為原料,若用脫氧核糖核苷酸則不能形成互補的子鏈,dNTP可用簡略用下圖解表示。
推測:最終單個dNTP連接形成子代DNA鏈時,要斷裂 個磷酸鍵,并同時為DNA鏈的形成提供 。
(4)若要用PCR技術(shù)特異性地拷貝DNA分子上“X基因”,需在PCR反應(yīng)中加入兩種引物,兩種引物及其與模板鏈的結(jié)合位置如下圖1所示。經(jīng)過一次循環(huán)后,產(chǎn)物如下圖2所示。則經(jīng) 輪循環(huán)后,產(chǎn)物中出現(xiàn)如下圖3所示DNA分子;此DNA分子共有 個。
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科目:高中生物 來源: 題型:
(07蘇、錫、常、鎮(zhèn)四市聯(lián)考)下圖表示在生物體外獲取DNA(或目的基因)的兩種方式。
圖一示經(jīng)PCR技術(shù)擴增獲取DNA的過程。PCR是聚合酶鏈式反應(yīng)的縮寫。PCR方法模仿體內(nèi)DNA的復(fù)制過程,首先使DNA變性(加熱至94℃),兩條鏈解開為單鏈;然后冷卻(至55℃)使引物(DNA復(fù)制時所需的約20個核苷酸的短鏈)與單鏈相應(yīng)堿基互補序列結(jié)合;再在熱穩(wěn)定DNA聚合酶(Taq酶)作用下進行延伸(加熱至72℃),即以4種脫氧核苷酸為原料,在引物的引導(dǎo)下合成與模板互補的DNA新鏈。如果2條DNA單鏈各補上一條新鏈即成2個DNA。如此反復(fù)循環(huán),DNA以指數(shù)形式擴增。上述過程可以在PCR擴增儀中自動完成。
圖二示反轉(zhuǎn)錄形成DNA的過程。即以mRNA為模板,反轉(zhuǎn)錄成互補的單鏈DNA,然后在酶的作用下合成雙鏈DNA。
請據(jù)圖分析回答:
(1)圖一中的DNA聚合酶的化學(xué)本質(zhì)是 ,它與人體內(nèi)的DNA聚合酶相比具有 特性。
(2)圖一A中的DNA解鏈過程在人體內(nèi)可由 催化完成。C過程復(fù)制方式的特點是 ,該過程需要 和能量等基本條件。
(3)圖二E中的堿基互補配對方式與圖一C中的不同之處是 。假設(shè)圖一中的一個模板DNA分子中有800個堿基對,其中含有腺嘌呤600個,若通過PCR技術(shù)共消耗周圍環(huán)境中游離的胞嘧啶脫氧核苷酸6200個,則該模板DNA在PCR擴增儀中已經(jīng)復(fù)制了 次。
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