Question

12．毛角蛋白Ⅱ型中間絲基因（KIFⅡ）與絨山羊的羊絨質(zhì)量密切相關(guān)．圖甲表示含KIFⅡ基因的DNA片段長度（bp即堿基對）和部分堿基序列，圖乙是獲得轉(zhuǎn)KIFⅡ基因的高絨質(zhì)絨山羊的簡單流程圖（MspI、BamHI、MboI、SmaI四種限制性核酸內(nèi)切酶識別的堿基序列和酶切位點分別為C↓CGG、G↓GATCC、↓GATC、CCC↓GGG）．請分析回答：

（1）用SmaI完全切割圖甲中DNA片段，其最短的產(chǎn)物含537個bp．圖甲中虛線方框內(nèi)的堿基對被T-A堿基對替換，那么基因D就突變?yōu)榛�因d．從隱性純合子中分離出圖甲對應(yīng)的DNA片段，用Sma I完全切割，產(chǎn)物中不同長度的DNA片段有2 種．
（2）上述工程中，KIFⅡ稱為目的基因；為了提高試驗成功率，需要通過PCR（聚合酶鏈反應(yīng)）技術(shù)進行目的基因的擴增，以獲得更多的KIFⅡ．
（3）過程①必須用到的工具酶是DNA連接酶；在過程③中，為了獲得更多的卵（母）細胞，需用促性腺激素處理成年母絨山羊．
（4）過程④稱為核移植，進行過程⑤的最佳時期是桑椹胚期或囊胚期．

Answer 1

分析 分析圖甲：圖中DNA片段含有2個限制酶SmaⅠ切割位點，可被限制酶SmaⅠ切割產(chǎn)生長度為534+3=537bp、796-3-3=790bp、658+3=661bp的三中DNA片段．
分析圖乙：：圖示表示獲得轉(zhuǎn)KIFⅡ基因的高絨質(zhì)絨山羊的簡單流程圖，其中①表示基因表達載體的構(gòu)建過程，該過程需要限制酶和DNA連接酶；②表示動物細胞培養(yǎng)過程，該過程需要采用胰蛋白酶處理組織塊以獲得單個細胞；③表示卵母細胞的采集和培養(yǎng)過程；④表示核移植過程；⑤表示胚胎移植過程．

解答 解：（1）SmaI限制性核酸內(nèi)切酶識別切割的堿基序列CCC↓GGG，由圖可知在SmaI的作用下完全切割可得到三個片段，最短的長度為537個bp，圖甲中虛線方框內(nèi)的堿基對被T-A堿基對替換，則CCC↓GGG的堿基序列就只有一個，所以SmaI只能將DNA片段切為兩段．
（2）KIFⅡ?qū)儆谀康幕�因，基因的擴增常用PCR技術(shù)．
（3）工具酶包括限制酶、DNA連接酶，此處上將目的基因拼接的運載體上，應(yīng)該用DNA連接酶；促性腺激素能夠促進排卵．
（4）過程④是將細胞核導(dǎo)入卵母細胞屬于細胞核移植范疇；過程⑤屬于胚胎移植，胚胎移植的時期通常在桑椹胚期或囊胚期．
故答案為：
（1）537       2
（2）目的基因     PCR（聚合酶鏈反應(yīng)）   目的基因的
（3）DNA連接酶   促性腺激素
（4）核移植   桑椹胚期或囊胚期

點評 本題結(jié)合轉(zhuǎn)基因山羊培育過程圖，考查基因工程、細胞工程和胚胎工程的相關(guān)知識，要求考生識記所列知識要點，能準確判斷圖中各過程的名稱，并能在較簡單的情境中使用，屬于考綱識記層次的考查．