Question

【題目】三孢布拉霉菌能用來生產(chǎn)胡蘿卜素，但該菌株的高產(chǎn)性狀容易退化，需要定期篩選出高產(chǎn)菌株，研究表明菌體細(xì)胞內(nèi)含有可將無色的TTC還原為紅色復(fù)合物的物質(zhì)，且菌體細(xì)胞內(nèi)該物質(zhì)的含量越高，還原能力越強(qiáng)，胡蘿卜素合成能力也越強(qiáng)。結(jié)合下列篩選菌株及提取胡蘿卜素的流程圖回答問題：

三孢布拉霉菌→梯度稀釋→涂布到含TTC的培養(yǎng)基上→挑取單菌落→擴(kuò)大培養(yǎng)→收集菌絲并處理→萃取→鑒定

（1）胡蘿卜素的提取方法有從植物中提取等等。上述流程圖中提取到胡蘿卜素后鑒定一般要用________法。胡蘿卜素能夠治療夜盲癥、干皮癥等是因?yàn)橐姑ぐY、干皮癥等疾病是由于缺少維生素A而引起的，而1分子的β-胡蘿卜素可被氧化分解成2分子_____________。根據(jù)胡蘿卜素的理化性質(zhì)分析，為了讓胡蘿卜素更容易被人體吸收，炒胡蘿卜時(shí)要多加些________________。

（2）流程圖中將菌液涂布到含TTC的培養(yǎng)基上，目的是篩選出合成胡蘿卜素較強(qiáng)的菌體(高產(chǎn)菌株），含TTC的培養(yǎng)基屬于__________(填“選擇”或“鑒別”)培養(yǎng)基。對照組需涂布等量的__________以判斷培養(yǎng)基是否被污染。挑取單菌落時(shí)，若菌落周圍____________，則菌株合成胡蘿卜素的能力較強(qiáng)。

（3）為了驗(yàn)證萃取物是否是胡蘿卜素，該同學(xué)將葉綠素b、葉綠素a、葉黃素、萃取物和色素混合液(含葉綠素b、葉綠素a、葉黃素和胡蘿卜素）依次點(diǎn)樣在濾紙的1、2、3、4、5位置（如圖甲所示，并進(jìn)行分離，濾紙條上各色素帶的位置為____________(填字母)時(shí)，即可說明該萃取物最可能是胡蘿卜素。

Answer 1

【答案】 紙層析 維生素A 油 鑒別 無菌水 紅色圈較深(或出現(xiàn)紅色圈或紅色圈較大） B

【解析】試題分析：三孢布拉霉菌在含有TTC的培養(yǎng)基上，由于菌體細(xì)胞內(nèi)含有[H]，可將無色的TTC還原為紅色復(fù)合物，從而確定三孢布拉霉菌的存在，且紅色越深，說明菌體內(nèi)產(chǎn)生[H]越多，越符合生產(chǎn)提取要求。

（1）鑒定萃取物中是否含有胡蘿卜素時(shí)，類比葉綠素提取與分離實(shí)驗(yàn)，根據(jù)不同色素在有機(jī)溶劑中的溶解度不同的原理，采用紙層析法，將色素分離出來，并與標(biāo)準(zhǔn)色素帶進(jìn)行對比。1分子的β-胡蘿卜素可被氧化分解成2分子維生素A；根據(jù)胡蘿卜素易溶于脂質(zhì)性有機(jī)溶劑，難溶于水，所以為了讓胡蘿卜素更容易被人體吸收，炒胡蘿卜時(shí)要多加些油。

（2）由前面的分析可知，在含TTC培養(yǎng)基上培養(yǎng)三孢布拉霉菌，目的是為了更好的鑒別能產(chǎn)生胡蘿卜素的三孢布拉霉菌，對此把該種培養(yǎng)基稱為鑒別培養(yǎng)基。將菌液涂布到含TTC的培養(yǎng)基上的目的是篩選出合成胡蘿卜素較強(qiáng)的菌體，對照組需涂布等量的無菌水。挑取單菌落時(shí)，若菌落周圍紅色較深，則菌株合成胡蘿卜素的能力較強(qiáng)。

（3）各種光合色素在層析液中的溶解度不同，因此在濾紙條上的擴(kuò)散速率也不同，擴(kuò)散最快的是胡蘿卜素，其次分別是葉黃素、葉綠素a、葉綠素b，所以濾紙條從上到下依次是：胡蘿卜素、葉黃素、葉綠素a、葉綠素b，因此濾紙條上各色素帶的位置為乙圖中的B時(shí)，即可說明該萃取物最可能是胡蘿卜素。