Question

【題目】回答下列有關(guān)微生物工程的問題。乳糖酶能夠催化乳糖水解為葡萄糖和半乳糖，具有重要應用價值。乳糖酶的制備及固定化步驟如下：

（1）表中的培養(yǎng)液pH均為7．0，若要篩選微生物L，則不能選擇表中的_______培養(yǎng)液。

培養(yǎng)液	乳糖	乳糖酶	NaNO3	牛肉膏	K2HPO4	KCl	MgS4O7H2O	FeSO4
A	25g/L				1g/L	0．5g/L	1g/L	0．01g/L
B			3g/L		1g/L	0．5g/L	1g/L	0．01g/L
C	25g/L	1ug/L		3g/L	1g/L	0．5g/L	1g/L	0．01g/L
D	25g/L		3g/L		1g/L	0．5g/L	1g/L	0．01g/L

（2）為了獲得能產(chǎn)乳糖酶的微生物L的單菌落，可采用_______法將初篩菌液接種在固體培養(yǎng)基上。

（3）擴大培養(yǎng)微生物L時，通過增加營養(yǎng)物質(zhì)的濃度_____________（可以//不可以）提高種群密度，分析說明原因_____________。

（4）在乳糖酶提取純化的過程中，應及時檢測___________。將酶固定化后，則有利于酶的__________。

（5）研究人員用篩選到產(chǎn)乳糖酶的高產(chǎn)菌株J1和J4在不同溫度和pH條件下進行發(fā)酵，測得發(fā)酵液中酶活性的結(jié)果見圖，推測菌株___________更適合用于發(fā)酵，理由是______________。

Answer 1

【答案】ABC 平板劃線法或稀釋涂布平板 不可以 擴大培養(yǎng)的液體培養(yǎng)基由于營養(yǎng)物質(zhì)濃度增高，滲透壓也增高，不利于細菌生長 酶活力或酶活性 回收再利用 J4 發(fā)酵過程中會產(chǎn)熱和產(chǎn)酸，J4菌株在較高溫度和酸性環(huán)境下酶的活性更高

【解析】

本題是對常用的微生物的接種方法、培養(yǎng)基的成分和培養(yǎng)基配制過程、微生物實驗室培養(yǎng)過程中的無菌技術(shù)和選擇培養(yǎng)基的選擇作用的綜合性考查，結(jié)合相關(guān)知識，靈活應用。

（1）分析題干信息可知，該實驗的目的是篩選微生物L，因此所用的培養(yǎng)基應該是乳糖作為唯一碳源的培養(yǎng)基，且培養(yǎng)基的基本成分應包括碳源，氮源、水和無機鹽，分析表格中的培養(yǎng)基的成分可知，A培養(yǎng)基缺乏氮源，微生物不能生長；B沒有碳源，微生物應為無法生長，C不是以乳糖為唯一碳源，牛肉膏也可以作為碳源，因此A、B、C不能用于對篩選微生物L的培養(yǎng)基。
（2）接種微生物常用平板劃線法或稀釋涂布平板法，可將初篩菌液接種在固體培養(yǎng)基上。
（3）由于營養(yǎng)物質(zhì)濃度增高，滲透壓也增高，不利于細菌生長，故擴大培養(yǎng)微生物L時，不能通過增加營養(yǎng)物質(zhì)的比例提高種群密度。
（4）在乳糖酶提取純化的過程中，應及時檢測酶活力或酶活性。將酶固定化后，則有利于酶的回收再利用。
（5）由于發(fā)酵過程中會產(chǎn)熱和產(chǎn)酸，據(jù)圖中曲線可知，J4菌株在較高溫度和酸性環(huán)境下酶的活性更高，故J4更適合用于發(fā)酵。