Question

PCR技術是一項在生物體外復制特定的DNA片段的核酸合成技術，如圖表示合成過程，請據(jù)圖分析回答問題。

(1)A過程高溫使DNA變性解旋，對該過程的原理敘述，正確的是(　　)。

A．該過程用耐高溫的解旋酶破壞氫鍵

B．該過程用限制酶破壞磷酸二酯鍵

C．該過程不需要解旋酶的作用

D．該過程與人體細胞的過程完全相同

(2)C過程要用到的酶是________，這種酶在高溫下仍保持活性，因此在PCR擴增時可以加入________次，________(需要、不需要)再添加。PCR反應除提供酶外，還需要滿足的基本條件有__________________________________________________________________。

(3)如果把模板DNA的兩條鏈用15N標記，游離的脫氧核苷酸不做標記，控制“95 ℃～55 ℃～72 ℃”溫度循環(huán)3次，則在形成的子代DNA中含有15N標記的DNA占________。

Answer 1

【解析】　本題考查PCR的過程和條件。在熟知細胞內(nèi)DNA復制過程和PCR過程異同點的前提下，會運用DNA復制的有關原理是解答本題的關鍵。(1)高溫所起的作用類似于解旋酶，使雙鏈DNA變?yōu)閱捂�，因此A過程不需要解旋酶的參與。(2)C過程為PCR技術的延伸階段，當系統(tǒng)溫度上升至72  ℃左右時，溶液中的四種脫氧核苷酸在TaqDNA聚合酶的作用下合成新的DNA鏈。TaqDNA聚合酶是耐熱的，高溫下不變性，所以一次性加入即可。(3)PCR技術遵循半保留復制的特點。經(jīng)過3次循環(huán)，共產(chǎn)生2³個DNA分子，其中有2個DNA分子含有¹⁵N標記。

【答案】　(1)C　(2)TaqDNA聚合酶　一　不需要　DNA模板、分別與兩條模板鏈相結合的兩種引物、四種脫氧核苷酸，同時通過控制溫度使DNA復制在體外反復進行

(3)25%