Question

15．研究發(fā)現(xiàn)ω-3脂肪酸能有效促進(jìn)甘油三酯水平的降低，有益于心腦血管的健康，對(duì)人體多種疾病有治療效果．已知多種海產(chǎn)魚類中含有豐富的ω-3脂肪酸，下面是培育含ω-3脂肪酸轉(zhuǎn)基因奶牛過程．回答下列問題：
（1）在基因工程中，控制合成ω-3脂肪酸的基因稱為目的基因，獲得該基因的方法有從基因文庫中獲�。焕�用PCR技術(shù)擴(kuò)增；人工合成（化學(xué)合成）（至少寫出兩種）．
（2）在培育轉(zhuǎn)基因牛的過程中最核心的步驟是基因表達(dá)載體的構(gòu)建，運(yùn)載體中能控制目的基因表達(dá)的結(jié)構(gòu)是啟動(dòng)子、終止子等．
（3）將ω-3脂肪酸基因?qū)�人的受體細(xì)胞最好是受精卵，采用的方法是顯微注射法．
（4）轉(zhuǎn)基因奶牛的培育過程不僅需要基因工程技術(shù)，還必須依賴于早期胚胎培養(yǎng)、胚胎移植（至少兩個(gè)）等技術(shù)．對(duì)ω-3脂肪酸基因是否含有在轉(zhuǎn)基因奶牛中穩(wěn)定遺傳進(jìn)行檢測(cè)，常采用的方法是DNA分子雜交技術(shù)．

Answer 1

分析 基因工程技術(shù)的基本步驟：
（1）目的基因的獲�。悍椒ㄓ袕幕�因文庫中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成．
（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等．
（3）將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣．將目的基因?qū)�入植物�?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)�入�?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)�入微生物�?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法．
（4）目的基因的檢測(cè)與鑒定：分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)．個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．

解答 （1）獲得目的基因的方法：①從基因文庫中獲�。虎诶�用PCR技術(shù)擴(kuò)增；③人工合成（化學(xué)合成）．
（2）基因工程的核心步驟是基因表達(dá)載體的構(gòu)建；基因表達(dá)載體的組成包括啟動(dòng)子、目的基因、標(biāo)記基因和終止子，其中啟動(dòng)子和終止子等均能控制目的基因表達(dá)．
（3）培育轉(zhuǎn)基因動(dòng)物時(shí)，最好以受精卵為受體細(xì)胞，因?yàn)槭芫�卵的全能性最高；將目的基因�(qū)�入�?dòng)物細(xì)胞常用顯微注射法．
（4）培育轉(zhuǎn)基因動(dòng)物時(shí)，除了采用基因工程技術(shù)，還需要采用早期胚胎培養(yǎng)、胚胎移植等技術(shù)．檢測(cè)目的基因是否導(dǎo)入受體細(xì)胞常用DNA分子雜交技術(shù)．
故答案為：
（1）從基因文庫中獲�。焕�用PCR技術(shù)擴(kuò)增；人工合成（化學(xué)合成）
（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建     啟動(dòng)子、終止子   
（3）受精卵     顯微注射法
（4）早期胚胎培養(yǎng)、胚胎移植      DNA分子雜交技術(shù)

點(diǎn)評(píng) 本題考查基因工程的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記基因工程的概念、原理、工具及操作步驟，掌握各操作步驟中需要注意的細(xì)節(jié)，能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確答題．