Question

19．豬的基因和人類的基因存在一定的相似度．據(jù)報道經(jīng)特殊處理的豬皮可在人身上存活3周左右，起保護創(chuàng)面免受感染作用．移植豬皮后，還要在豬皮上開很多小口，在小口處移植人患者的自體皮膚組織，自體皮膚慢慢生長，逐漸覆蓋原先創(chuàng)面，而豬皮最終會掉光．為了使移植的豬皮存活更長時間，有人設法導入人的相關基因（用P表示），獲得轉(zhuǎn)基因小白豬．其簡要流程如圖所示：

據(jù)圖中信息并結合課本知識回答：
（1）過程①中形成重組研蛆常用的酶有限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶；將目的基因?qū)�入成纖維細胞常用的方法是顯微注射法．
（2）過程②中，常用胰蛋白（或膠原蛋白）酶處理，將皮膚組織塊分散戍單個成纖維細胞．在培養(yǎng)成纖維細胞時需要滿足的條件是無菌、無毒、通氣、適宜的溫度、pH以及營養(yǎng)．
（3）圖中的卵母細胞應在體外培養(yǎng)到減數(shù)第二次分裂中期（或MII中期），并作除去細胞核的處理；過程③中所用的技術是（早期）胚胎體外培養(yǎng) 去；能代替圖中卵母細胞的還可以是核的受精卵（或去核的卵細胞）．
（4）移植后的胚胎能在受體子宮中存活的生理基礎是受體子宮對外來胚胎不發(fā)生免疫排斥反應．

Answer 1

分析 分析題圖：圖示為轉(zhuǎn)基因小白豬的培育過程，其中①是基因表載體的構建過程、②是動物細胞培養(yǎng)過程、③是早期胚胎培養(yǎng)過程．該過程中還運用了核移植技術、胚胎移植技術等．

解答 解：（1）在構建基因表達載體時，首先要用同一種限制酶切割運載體和目的基因，使運載體和目的基因產(chǎn)生相同的末端，再用DNA連接酶連接成重組質(zhì)粒；將目的基因?qū)�入動物細胞最有效的方法是顯微注射法．
（2）動物細胞培養(yǎng)時，取動物組織塊（動物胚胎或幼齡動物的器官或組織），用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個細胞．動物細胞培養(yǎng)需要在無菌、無毒的環(huán)境、營養(yǎng)物質(zhì)充沛、適宜的溫度和PH、氣體環(huán)境等條件．
（3）卵母細胞應在體外培養(yǎng)到減數(shù)第二次分裂中期（或MII中期），并作除去細胞核的處理；過程③中所用的技術是（早期）胚胎體外培養(yǎng)；能代替圖中卵母細胞的還可以是去核的受精卵（或去核的卵細胞）．
（4）移植后的胚胎能在受體子宮中存活的生理基礎是受體子宮對外來胚胎不發(fā)生免疫排斥反應．
故答案為：
（1）DNA連接酶      顯微注射法
（2）胰蛋白（或膠原蛋白）      營養(yǎng)
（3）減數(shù)第二次分裂中期（或MII中期）     （早期）胚胎體外培養(yǎng)     去核的受精卵（或去核的卵細胞）
（4）受體子宮對外來胚胎不發(fā)生免疫排斥反應

點評 本題綜合考查了細胞工程、胚胎工程和基因工程的相關知識，考生要識記基因工程的操作工具；掌握目的基因檢測和鑒定的方法；識記動物細胞培養(yǎng)的過程和培養(yǎng)條件等；明確卵母細胞在進行細胞核移植前的準備；識記胚胎工程和基因工程的相關應用．