Question

【題目】生物乙醇是指通過微生物的發(fā)酵將各種生物質(zhì)轉(zhuǎn)化為燃料酒精。它可以單獨或與汽油混含配制成乙醇汽油作為汽車燃料。我國成功利用農(nóng)作物廢棄物—秸稈（主要成分為纖維素）代替糧食作為原料來進行燃料乙醇的工業(yè)化生產(chǎn)。其主要技術流程為：秸稈→秸稈顆�！�反應罐水解→過濾除渣→酒精發(fā)酵→蒸餾。

（1）將秸稈顆粒裝入反應罐進行水解，需加入_______________的微生物，從而能將秸稈中的成分轉(zhuǎn)變成葡萄糖。從土壤中獲取該微生物時，首先選擇培養(yǎng)，然后通過_______________法直接篩選出該微生物。

（2）若要對篩選獲得的菌液進行計數(shù)，應將菌液用______________法接種到平板上。如果將1mL菌液稀釋100倍，在3個平板上分別加入0.1mL的稀釋液，經(jīng)過培養(yǎng)后，3個平板的菌落分別是93、96、99，據(jù)此可得出每升菌液中的活菌數(shù)為____________，通常運用該方法統(tǒng)計出的菌落數(shù)目______（高于、低于或等于）活菌的實際數(shù)目，原因是__________________________________________________。

（3）酒精發(fā)酵階段需接種的微生物是___________，該微生物在_______________的發(fā)酵液中可以生長繁殖，而絕大多數(shù)其他的微生物都因無法適應這一環(huán)境而受到抑制。

Answer 1

【答案】 能分解纖維素 剛果紅染色 稀釋涂布平板 9.6X107 低于 當兩個或多個細胞連在一起時，形成和觀察到的只是一個菌落 酵母菌 缺氧（無氧）、呈酸性

【解析】試題分析：微生物的分離是研究和利用微生物的第一步，也是微生物工作的基本方法和重要環(huán)節(jié)。土壤中的微生物很多，本題中要從土壤中獲得分解纖維素的菌。接種最常用的方法是平板劃線法和稀釋涂布平板法，平板劃線分離法：由接種環(huán)以菌操作沾取少許待分離的材料，在無菌平板表面進行平行劃線、扇形劃線或其他形式的連續(xù)劃線，微生物細胞數(shù)量將隨著劃線次數(shù)的增加而減少，并逐步分散開來，如果劃線適宜的話，微生物能一一分散，經(jīng)培養(yǎng)后，可在平板表面得到單菌落。用途：一般多用于從菌種的純化；稀釋平板計數(shù)是根據(jù)微生物在固體培養(yǎng)基上所形成的單個菌落，即是由一個單細胞繁殖而成這一培養(yǎng)特征設計的計數(shù)方法，即一個菌落代表一個單細胞。計數(shù)時，首先將待測樣品制成均勻的系列稀釋液，盡量使樣品中的微生物細胞分散開，使成單個細胞存在(否則一個菌落就不只是代表一個細胞)，再取一定稀釋度、一定量的稀釋液接種到平板中，使其均勻分布于平板中的培養(yǎng)基內(nèi)。。

（1）秸稈的主要成分是纖維素，所以需加入能分解纖維素的微生物，將秸稈分解為葡萄糖。

（2）微生物的接種方法包括平板劃線法和稀釋涂布平板法，后者可以用于計數(shù)。根據(jù)題干提供的數(shù)據(jù)進行計算，每升菌液中的活菌數(shù)=（93+96+99）÷3÷0.1×1000×100=9.6×107個。由于當兩個或多個細胞連在一起時，形成和觀察到的只是一個菌落，導致計出的菌落數(shù)目低于活菌的實際數(shù)目。

（3）酒精發(fā)酵需要的微生物是酵母菌，其在缺氧（無氧）、呈酸性的發(fā)酵液中可以生長繁殖，而絕大多數(shù)其他的微生物都因無法適應這一環(huán)境而受到抑制。