Question

為了解基因結(jié)構(gòu)，通常選取一特定長度的線性DNA分子，先用一種限制酶切割，通過電泳技術(shù)將單酶水解片段分離，計(jì)算相對大小；然后再用另一種酶對單酶水解片段進(jìn)一步降解，分析片段大小。下列是某小組進(jìn)行的相關(guān)實(shí)驗(yàn)。

已知一線性DNA序列共有5 000bp（bp為堿基對）	第一步水解	產(chǎn)物（單位：bp）	第二步水解	產(chǎn)物（單位：bp）
	A酶切割	3 100	第一步水解產(chǎn)物分離后，分別用B酶切割	1 900　200
		1 400		800　600
		1 000		1 000
		500		500
	B酶切割	2 500	將第一步水解產(chǎn)物分離后，分別用A酶切割	1 900　600
		1 300		800　500
		1 200		1 000　200
	經(jīng)A酶和B酶同時(shí)切割	1 900　1 000　800　600　500　200

⑴該實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)主要體現(xiàn)了____________________原則。

⑵由實(shí)驗(yàn)可知，在這段已知序列DNA分子上，A酶和B酶的識別位點(diǎn)分別為____________________個(gè)和____________________個(gè)。

⑶根據(jù)表中數(shù)據(jù)，請?jiān)谙聢D中標(biāo)出相應(yīng)限制性酶的酶切位點(diǎn)。

　　　　　

⑷已知BamH 與BglⅡ的識別序列及切割位點(diǎn)如右圖所示，用這兩種酶和DNA連接酶對一段含有數(shù)個(gè)BamHⅠ和BglⅡ識別序列的DNA分子進(jìn)行反復(fù)的切割、連接操作，

	—AGATCC— —TCTAGG—

若干循環(huán)后 ____________________和____________________序列明顯增多，該過程中DNA連接酶催化____________________鍵的形成。

⑸一個(gè)基因表達(dá)載體的組成除了目的基因外，還必須有_________、___________及標(biāo)記基因。

Answer 1

⑴對照（單一變量）

⑵3　2

⑶

—GGATCT— —CCTAGA—

⑷　　　　　　磷酸二酯

⑸啟動(dòng)子　終止子