Question

6．胡蘿卜素是一種常用的食用色素，可分別從胡蘿卜或產(chǎn)胡蘿卜素的微生物菌體中提取獲得，流程如圖1：
（1）篩選產(chǎn)胡蘿卜素的酵母菌R時，可選用平板劃線法接種．采用平板劃線法接種時需先灼燒接種環(huán)，其目的是殺滅接種環(huán)上的微生物．
（2）培養(yǎng)酵母菌R時，培養(yǎng)基中的蔗糖和硝酸鹽可分別為酵母菌R的生長提供碳源和氮源．
（3）從胡蘿卜中提取胡蘿卜素時，干燥過程應(yīng)控制好溫度和以防止胡蘿卜素的分解；萃取液濃縮前需進行過濾，其目的是除去萃取液中的不溶物．
（4）紙層析法可用于鑒定所提取的胡蘿卜素．鑒定過程中需用胡蘿卜素標準品作為（實驗）對照．
（5）酵母菌R能分泌A酶和B酶兩種酶，圖2是某課題組對A酶和B酶的實驗結(jié)果，請分析回答：
①分析圖中的實驗結(jié)果可知，本實驗研究的課題是探究（研究）溫度對A酶和B酶活性的影響．
②圖中結(jié)果顯示，在40℃至60℃范圍內(nèi)，熱穩(wěn)定性較好的酶是A酶．高溫條件下，酶容易失活，其原因是高溫使酶的空間結(jié)構(gòu)破壞．
③制備A酶和B酶的流程如3圖所示：
圖中方法Ⅰ是離心法，方法Ⅱ是？透析法；分別用凝膠色譜法純化酶的過程中，相對分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì)會較快從層析柱中洗脫出來．

Answer 1

分析 微生物培養(yǎng)時的接種方法主要有稀釋涂布平板法和平板劃線法，實驗成功的關(guān)鍵是無菌操作．微生物的營養(yǎng)物質(zhì)主要有碳源、氮源、水和無機鹽等．胡蘿卜素不溶于水，微溶于乙醇，易溶于石油醚等有機溶劑，常用萃取法提取胡蘿卜素．影響酶活性的因素主要有溫度和酸堿度．

解答 解：（1）為了避免其它雜菌的污染，接種過程要進行無菌操作，接種前對接種環(huán)灼燒就是為了殺滅接種環(huán)上的微生物．
（2）蔗糖主要提供碳源，也可以作為能源物質(zhì)，硝酸鹽含氮元素，可提供氮源．
（3）胡蘿卜素不是很穩(wěn)定，溫度過高、干燥時間過長會導(dǎo)致其分解；萃取后需將原料中的固體物濾去．
（4）鑒定胡蘿卜素粗品時需要使用標準胡蘿卜素樣品進行實驗對照．
（5）①據(jù)圖2分析，自變量為溫度和A酶及B酶．因變量為酶活力，所以實驗研究的課題是探究（研究）溫度對A酶和B酶活性的影響．
②據(jù)圖2分析，在40℃至60℃范圍內(nèi)，熱穩(wěn)定性較好的酶是A酶．高溫條件下，高溫使酶的空間結(jié)構(gòu)破壞，酶容易失活．
③據(jù)圖3分析，Ⅰ是離心法，Ⅱ是透析法，Ⅲ是凝膠色譜法．用凝膠色譜法純化酶的過程中，相對分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì)經(jīng)過的路程短，運動速度快，會較快從層析柱中洗脫出來．
故答案為：
（1）殺滅接種環(huán)上的微生物
（2）碳源和氮源
（3）干燥時間   過濾
（4）（實驗）對照
（5）①探究（研究）溫度對A酶和B酶活性的影響
②A酶    高溫使酶的空間結(jié)構(gòu)破壞
③離心法   相對分子質(zhì)量較大

點評 本題主要考查微生物的培養(yǎng)和胡蘿卜素的提取，意在強化學(xué)生對微生物培養(yǎng)和胡蘿卜素的提取過程的識記、理解與運用．