Question

【題目】回答下列(一)、(二)小題：

（一）回答與生物技術(shù)在食品加工中應(yīng)用有關(guān)的問(wèn)題：

（1）制作蘋(píng)果醋的具體流程如圖所示：

①圖中乙過(guò)程可加入適量的果膠酶和果膠甲酯酶；為鑒定獲得的果汁是否含有果膠，可加入適量的________________。丙過(guò)程為適宜條件下進(jìn)行酒精發(fā)酵，發(fā)酵完成的標(biāo)志是________________。

②若用于醋酸發(fā)酵的醋桿菌被雜菌污染，欲消除污染的雜菌，可通過(guò)劃線(xiàn)分離法獲得________________，然后進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)，常用的培養(yǎng)基是_________。

A．MS培養(yǎng)基 B．LB平面培養(yǎng)基

C．添加蔗糖的豆芽汁 D．含蛋白胨、酵母提取物、甘露醇的培養(yǎng)液

（2）發(fā)酵制作泡菜時(shí)，利用的微生物是從________________（天然/人工培養(yǎng)）中獲得；在發(fā)酵過(guò)程中微生物利用菜中的________________進(jìn)行發(fā)酵產(chǎn)生有機(jī)酸和醇類(lèi)物質(zhì)等，同時(shí)還會(huì)產(chǎn)生一定量的亞硝酸�？梢杂霉怆姳壬�法定量測(cè)定亞硝酸鹽，在對(duì)樣品處理過(guò)程中加入硫酸鋅和氫氧化鈉溶液的作用是________________；進(jìn)行樣品測(cè)定時(shí)，用光程為1cm的比色杯在550nm處測(cè)定OD值，若測(cè)定的OD值偏大可采取的措施是________________。

（二）回答與抗蟲(chóng)棉培育有關(guān)的問(wèn)題：

（1）土壤農(nóng)桿菌中的野生Ti質(zhì)粒能誘導(dǎo)腫瘤形成，但分子量太大，且缺乏可利用的單一________________酶位點(diǎn)，所以需對(duì)野生型Ti質(zhì)粒進(jìn)行改造。改造過(guò)程除了要切除致瘤基因外，還必須保留一段控制質(zhì)粒DNA________________的基因。同時(shí)還要將抗蟲(chóng)基因轉(zhuǎn)入到質(zhì)粒的T-DNA區(qū)，獲得含目的基因的重組Ti質(zhì)粒。下列關(guān)于改造過(guò)程的敘述錯(cuò)誤的是________________

A．去除T-DNA區(qū)的激素基因，因?yàn)榧に鼗�因產(chǎn)物會(huì)導(dǎo)致植物轉(zhuǎn)化細(xì)胞內(nèi)激素不平衡而無(wú)限分裂，阻止正常植株的再生

B．在去除的激素基因的T-DNA區(qū)增加至少一個(gè)可以在植物體內(nèi)表達(dá)的標(biāo)記基因，這樣便于轉(zhuǎn)化細(xì)胞易于被檢測(cè)出來(lái)

C．在T-DNA區(qū)添加一個(gè)可以克隆外源目的基因的多聚接口，便于目的基因的克隆。

D．改造后含目的基因的重組Ti質(zhì)粒可以通過(guò)土壤農(nóng)桿菌胞內(nèi)寄生而進(jìn)入植物細(xì)胞，從而Ti質(zhì)粒整個(gè)整合到植物遺傳物質(zhì)中

（2）含重組Ti質(zhì)粒的農(nóng)桿菌導(dǎo)入植物細(xì)胞：人為地在植株上造成創(chuàng)傷，然后把含重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌接種在創(chuàng)傷面上，使農(nóng)桿菌在植物體內(nèi)進(jìn)行侵染實(shí)現(xiàn)轉(zhuǎn)化的目的。為了獲得較高的轉(zhuǎn)化率，一般采用無(wú)菌種子的實(shí)生苗或者試管苗。農(nóng)桿菌接種后，受傷部位一般________________（會(huì)、不會(huì)）出現(xiàn)腫瘤。在篩選轉(zhuǎn)化細(xì)胞時(shí)，可將感染部位的薄壁組織切下放入選擇培養(yǎng)基上進(jìn)行篩選和愈傷組織的誘導(dǎo)。最后將轉(zhuǎn)化的愈傷組織轉(zhuǎn)移至________________培養(yǎng)基上誘導(dǎo)叢狀苗，再生根誘導(dǎo)出再生植株。

（3）抗蟲(chóng)棉植物的檢測(cè)：可對(duì)成體植株進(jìn)行________________實(shí)驗(yàn)檢測(cè)。

（4）多途徑的植物克�。和ㄟ^(guò)植物組織培養(yǎng)可以培養(yǎng)大量的試管苗，擴(kuò)大抗蟲(chóng)棉的種植面積；通過(guò)大量培養(yǎng)特定的________________，實(shí)現(xiàn)了能產(chǎn)生重要次生代謝產(chǎn)物（如抗蟲(chóng)蛋白）的細(xì)胞的大量克隆和產(chǎn)物的工業(yè)化生產(chǎn)；通過(guò)________________，進(jìn)行單倍體克隆等。

Answer 1

【答案】乙醇 發(fā)酵瓶中停止產(chǎn)生氣泡 單菌落 D 天然 糖和其他營(yíng)養(yǎng)物質(zhì) 沉淀析出蛋白質(zhì)等雜質(zhì) 對(duì)樣品溶液進(jìn)行適當(dāng)?shù)南♂?/span> 限制性核酸內(nèi)切 轉(zhuǎn)移 D 不會(huì) 生芽（或發(fā)芽） 棉鈴蟲(chóng)感染 細(xì)胞系 花藥（花粉）培養(yǎng)

【解析】

1、參與果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陳代謝類(lèi)型是異養(yǎng)需氧型，條件是30～35℃、一直需氧；果醋制作的原理：當(dāng)氧氣、糖源都充足時(shí)，醋酸菌將葡萄汁中的果糖分解成醋酸；當(dāng)缺少糖源時(shí)，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰�，再將乙醛變�(yōu)榇姿帷?/span>

2、泡菜的制作所使用的微生物是乳酸菌，代謝類(lèi)型是異養(yǎng)厭氧型，在無(wú)氧條件下乳酸菌能夠?qū)⑹卟酥械钠咸烟茄趸癁槿樗�。泡菜中的亞硝酸鹽含量可以用比色法測(cè)定，即在鹽酸酸化條件下，亞硝酸鹽與對(duì)氨基苯磺酸發(fā)生重氮化反應(yīng)生成重氮鹽，重氮鹽與N1萘基乙二胺鹽酸鹽結(jié)合形成玫瑰紅色染料。

3、基因工程的基本操作步驟主要包括四步：①目的基因的獲取，②基因表達(dá)載體的構(gòu)建，③將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞，④目的基因的檢測(cè)與鑒定。

（一）（1）①為了鑒定獲得的果汁是否含有果膠，可加入適量的乙醇；酒精發(fā)酵利用的是酵母菌的無(wú)氧呼吸，完成的標(biāo)志是發(fā)酵瓶中停止產(chǎn)生氣泡。

②若用于醋酸發(fā)酵的醋桿菌被雜菌污染，欲消除污染的雜菌，可通過(guò)劃線(xiàn)分離法獲得單菌落；醋酸菌是一種細(xì)菌，其發(fā)酵可以產(chǎn)生醋酸，對(duì)其進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)，應(yīng)該用含蛋白胨、酵母提取物、甘露醇的培養(yǎng)液，故選D。

（2）發(fā)酵制作泡菜時(shí)，利用的菌種是天然獲得的；發(fā)酵過(guò)程中微生物利用菜中的糖和其他營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)進(jìn)行發(fā)酵產(chǎn)生有機(jī)酸和醇類(lèi)物質(zhì)等，同時(shí)還會(huì)產(chǎn)生一定量的亞硝酸；在利用光電比色法定量測(cè)定亞硝酸鹽時(shí)，對(duì)樣品處理過(guò)程中加入硫酸鋅和氫氧化鈉溶液的目的是沉淀析出蛋白質(zhì)等雜質(zhì)；進(jìn)行樣品測(cè)定時(shí)，用光程為1cm的比色杯在550nm處測(cè)定OD值，若測(cè)定的OD值偏大，可以對(duì)樣品溶液進(jìn)行適當(dāng)?shù)南♂尅?/span>

（二）（1）土壤農(nóng)桿菌中的野生Ti質(zhì)粒能誘導(dǎo)腫瘤形成，但分子量太大，且缺乏可利用的單一限制性核酸內(nèi)切酶位點(diǎn)，所以需對(duì)野生型Ti質(zhì)粒進(jìn)行改造；改造過(guò)程中要切除致瘤基因，保留一段控制質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)移的基因。

A、由于激素基因產(chǎn)物會(huì)導(dǎo)致植物轉(zhuǎn)化細(xì)胞內(nèi)激素不平衡而無(wú)限分裂，阻止正常植株的再生，所以改造過(guò)程中應(yīng)該去除T-DNA區(qū)的激素基因，A正確；

B、為了檢測(cè)出轉(zhuǎn)化細(xì)胞，應(yīng)該在去除的激素基因的T-DNA區(qū)增加至少一個(gè)可以在植物體內(nèi)表達(dá)的標(biāo)記基因，B正確；

C、應(yīng)該在T-DNA區(qū)添加一個(gè)可以克隆外源目的基因的多聚接口，便于目的基因的克隆，C正確；

D、改造后含目的基因的重組Ti質(zhì)粒可以通過(guò)土壤農(nóng)桿菌胞內(nèi)寄生而進(jìn)入植物細(xì)胞，但是Ti質(zhì)粒不會(huì)整個(gè)整合到植物遺傳物質(zhì)中，D錯(cuò)誤。

故選D。

（2）由于致瘤基因已經(jīng)被切除，因此農(nóng)桿菌接種后，受傷部位一般不會(huì)出現(xiàn)腫瘤；將轉(zhuǎn)化的愈傷組織轉(zhuǎn)移至生芽培養(yǎng)基上誘導(dǎo)叢狀苗，再生根誘導(dǎo)出再生植株。

（3）對(duì)成體植株進(jìn)行棉鈴蟲(chóng)感染實(shí)驗(yàn)，可以對(duì)轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)棉進(jìn)行個(gè)體水平的檢測(cè)。

（4）通過(guò)大量培養(yǎng)特定的細(xì)胞系，實(shí)現(xiàn)了能產(chǎn)生重要次生代謝產(chǎn)物（如抗蟲(chóng)蛋白）的細(xì)胞的大量克隆和產(chǎn)物的工業(yè)化生產(chǎn)；通過(guò)花藥（花粉）培養(yǎng)，進(jìn)行單倍體克隆等。