Question

5．我國規(guī)定每升飲用水中大腸桿菌不能超過3個(gè)．某校兩個(gè)興趣小組嘗試分到對(duì)學(xué)校自來水和池塘水中的大腸桿菌含量進(jìn)行檢測(cè)與分離純化，其中一小組操作簡(jiǎn)圖如圖甲；伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基常用于鑒定大腸桿菌，其配方如圖乙．

回答下列相關(guān)問題：
（1）圖甲中濾膜的孔徑應(yīng)小于（大于/小于）大腸桿菌．受此啟發(fā)，對(duì)某些不耐高溫的試劑可以怎樣除菌？用濾膜過濾除菌．
（2）配制圖乙中的基礎(chǔ)培養(yǎng)基時(shí)，除了水分、無機(jī)鹽以外，還應(yīng)加入氮源（一種營養(yǎng)成分），以及瓊脂，伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基上生長的大腸桿菌菌落呈現(xiàn)黑色．
（3）該小組通過統(tǒng)計(jì)黑色菌落的數(shù)目，計(jì)算出單位體積樣品中大腸桿菌數(shù)目，理論上德們的統(tǒng)計(jì)值比實(shí)際值偏低（偏高/偏低），理由是兩個(gè)或多個(gè)大腸桿菌連在一起時(shí)，平板上只能觀察到1個(gè)菌落．
（4）另一小組采用平板劃線法分離提純池塘水中的大腸桿菌，在劃線前隨機(jī)取若干滅菌后的空白平板先行培養(yǎng)了一段時(shí)間，這樣做的目的是：確定培養(yǎng)基的滅菌是否合格；劃線時(shí)在一個(gè)平板培養(yǎng)基上共劃了4個(gè)區(qū)域，則需要5次灼燒接種環(huán)．
（5）如果是用試管培養(yǎng)微生物在培養(yǎng)基凝固前要擱置斜面，其目的是擴(kuò)大接種面積．

Answer 1

分析 據(jù)圖分析可知，實(shí)驗(yàn)將待測(cè)水樣進(jìn)行過濾，得到的濾膜進(jìn)行微生物培養(yǎng)，因此水中的大腸桿菌應(yīng)留在濾膜上，則濾膜上小孔的直徑大小需要控制．
培養(yǎng)基的基本成分一般包括水、無機(jī)鹽、碳源、氮源，另外鑒別培養(yǎng)基是固體培養(yǎng)基，必須加入凝固劑瓊脂．

解答 解：（1）分析圖解可知，實(shí)驗(yàn)將待測(cè)水樣進(jìn)行過濾，得到的濾膜進(jìn)行微生物培養(yǎng)，因此水中的大腸桿菌應(yīng)留在濾膜上，即圖甲中濾膜的孔徑應(yīng)小于大腸桿菌．受此啟發(fā)，對(duì)某些不耐高溫的試劑可以用濾膜過濾除菌．
（2）培養(yǎng)基的基本成分一般包括水、無機(jī)鹽、碳源、氮源，另外鑒別培養(yǎng)基是固體培養(yǎng)基，必須加入凝固劑瓊脂．圖中乳糖為碳源，因此培養(yǎng)基中還應(yīng)該加入氮源．
（3）在伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基上，可以鑒定出菌落為黑色的具有金屬光澤的大腸桿菌，因此該小組通過統(tǒng)計(jì)黑色菌落的數(shù)目，計(jì)算出單位體積樣品中大腸桿菌數(shù)目．由于培養(yǎng)基中兩個(gè)或多個(gè)大腸桿菌連在一起時(shí)，平板上只能觀察到1個(gè)菌落，因此理論上他們的統(tǒng)計(jì)值比實(shí)際值偏低．
（4）滅菌后的空白平板先行培養(yǎng)的目的是確定培養(yǎng)基的滅菌是否合格，即若不合格空白培養(yǎng)的培養(yǎng)基上會(huì)長出菌落，若合格則空白培養(yǎng)基上不會(huì)長出菌落．劃線時(shí)在一個(gè)平板培養(yǎng)基上共劃了4個(gè)區(qū)域，則需要灼燒接種環(huán)n+1=4+1=5次．
（5）用試管培養(yǎng)微生物在培養(yǎng)基凝固前要擱置斜面的目的是擴(kuò)大接種面積．
故答案為：
（1）小于   用濾膜過濾除菌
（2）氮源      
（3）偏低     兩個(gè)或多個(gè)大腸桿菌連在一起時(shí)，平板上只能觀察到1個(gè)菌落
（4）確定培養(yǎng)基的滅菌是否合格    5
（5）擴(kuò)大接種面積

點(diǎn)評(píng) 本題考查了微生物的分離與培養(yǎng)、培養(yǎng)基的成分以及大腸桿菌的鑒定等有關(guān)知識(shí)，意在考查考生能理解所學(xué)知識(shí)的要點(diǎn)，把握知識(shí)間的內(nèi)在聯(lián)系的能力．