科學家將人的生長激素基因與某種細菌(不含抗生素抗性基因)的DNA分子進行重組,并成功地在該細菌中得以表達(如下圖)。請據(jù)圖分析回答:
(1)過程①所示獲取目的基因的方法是 。
(2)細菌是理想的受體細胞,這是因為它 。(2分)
(3)質粒A與目的基因結合時,首先需要用 酶將質粒切開“缺口”,然后用
酶將質粒與目的基因“縫合”起來。
(4)若將細菌B先接種在含有__________的培養(yǎng)基上能生長,說明該細菌中已經(jīng)導入外源質粒,但不能說明外源質粒是否成功插入目的基因;若將細菌B再重新接種在含有______________的培養(yǎng)基上不能生長,則說明細菌B中已經(jīng)導入了插入目的基因的重組質粒。
(5)檢測工程菌中的生長激素基因是否轉錄出mRNA和是否翻譯出生長激素,可采用的技術分別是____________________、_____________________。
(1)反轉錄法(逆轉錄法)
(2)繁殖快、單細胞、遺傳物質相對較少
(3)限制性內切酶 DNA連接酶
(4)氨芐青霉素 四環(huán)素
(5)分子雜交 抗原——抗體雜交
【解析】
試題分析:(1)過程①人生長激素基因的RNA→人生長激素基因,屬于反轉錄法。(2)細菌是理想的受體細胞,原因是繁殖快、多為單細胞、遺傳物質相對較少。(3)質粒A與目的基因結合時,首先用限制性內切酶分別處理質粒和目的基因,使之形成相同的黏性末端,然后用DNA連接酶將質粒與目的基因“縫合”起來。(4)基因必須保持結構的完整性才能表達,而抗氨芐青霉素基因結構完整,能夠表達而使細菌具有對氨芐青霉素的抗性,在含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基上能存活的是導入了質粒或導入了插入目的基因的重組質粒的細菌。由于將人的生長激素基因導入到質粒的抗四環(huán)素基因上,破壞了抗四環(huán)素基因的完整性,導入了插入目的基因的重組質粒的細菌沒有對四環(huán)素的抗性,在含有四環(huán)素的培養(yǎng)基上不能存活,能存活的是質粒。(5)檢測是否轉錄出mRNA和是否翻譯出生長激素,可采用的技術分別是分子雜交、抗原-抗體雜交。
考點:基因工程的工具和步驟。
點評:本題綜合考查基因工程的相關知識,意在考查考生的識記能力、分析能力和理解應用能力。
科目:高中生物 來源: 題型:
科學家將人的生長激素基因與pBR322質粒進行重組,得到的重組質粒導入牛的受精卵,使其發(fā)育為轉基因牛,再通過細胞工程培育為轉基因克隆牛。pBR322質粒含有兩個抗生素抗性基因和5個限制酶切點(如圖2)。將重組質粒導入大腸桿菌,并成功地在大腸桿菌中得以表達。請據(jù)圖回答問題。
(1)圖1中顯示的人的生長激素基因是通過人工合成的,圖中①過程需要的酶是________。該過程所依據(jù)的堿基互補配對原則是________________(用字母和箭頭表示)。
(2)圖1中的mRNA是從人體的哪些細胞中獲取的?
________________________。
(3)重組質粒形成與否需要鑒定和篩選,方法是將重組質粒的DNA分子導入大腸桿菌,通過含抗生素的培養(yǎng)基進行培養(yǎng),觀察大腸桿菌的生長、繁殖情況進行判斷,如圖3所示:
①如果受體菌在培養(yǎng)基A上能生長、繁殖形成菌落,而不能在培養(yǎng)基B上生長、繁殖,則使用限制酶a的切點是圖2中的________,即目的基因插入了________中。
②如果受體菌在培養(yǎng)基A上不能生長、繁殖形成菌落,而在培養(yǎng)基B上能生長、繁殖,則使用限制酶a的切點是圖2中的________,即目的基因插入了________中。
③如果受體菌在培養(yǎng)基A和培養(yǎng)基B上都能生長、繁殖形成菌落,則使用限制酶a的切點是圖2中的________。
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科目:高中生物 來源:2010年江蘇省江都中學高二第二學期期末考試生物試題 題型:綜合題
(8分)科學家將人的生長激素基因與大腸桿菌的DNA分子進行重組,并成功地在大腸桿菌中得以表達。但在進行基因工程的操作過程中,需使用特定的限制酶切割目的基因和質粒,便于重組和篩選。已知限制酶I的識別序列和切點是—G↓GATCC— ,限制酶II的識別序列和切點是—↓GATC—,據(jù)圖回答:
(1)由上述質粒結構圖可知基因工程中的載體至少應具備的條件是
①_________________________________ ,②_________________________________ 。
(2)根據(jù)圖示分析,在構建基因表達載體過程中,應選用限制酶_________(填“I”或“II”)切割質粒,再用_____________縫合目的基因和質粒之間的缺口,可獲得_____種重組質粒。
(3)將得到的大腸桿菌B涂布在一個含有_____________的培養(yǎng)基上,待平板冷凝后為避免污染,需將培養(yǎng)皿呈________狀態(tài)放置。經(jīng)過一定時間培養(yǎng)后,能夠在培養(yǎng)基上生長的,說明已導入了__________________________,反之則沒有導入。
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科目:高中生物 來源:2010-2011學年高考復習單元檢測:第五章基因突變和其它變異;第六章從雜交育種到基因工程 題型:選擇題
美國科學家將人的生長激素基因轉移到了小鼠體內,得到了超級小鼠,此轉基因技術的受體細胞是( )
A.卵細胞 B.去核卵細胞
C.受精卵細胞 D.乳腺上皮細胞
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科目:高中生物 來源:2010屆山東省淄博市高三一模理綜生物 題型:綜合題
科學家將人的生長激素基因與質粒重組后,導入牛的受精卵,并成功從牛奶中提取到了人生長激素,操作流程如下圖所示,請據(jù)圖回答。(已知限制酶I的識別序列和切點是-G↓GATCC- ,限制酶II的識別序列和切點是-↓GATC-)。
(1)獲取目的基因的主要途徑包括從已有物種細胞中提取和____________。
(2)據(jù)圖分析,在構建重組質粒的過程中,目的基因用________進行了切割。
(3)獲能的精子和卵細胞相遇后首先發(fā)生______反應,之后精子接觸卵黃膜,并進一步與卵結合,在該過程中,____________和____________可以防止其它精子入卵。
(4)圖中“受體”是________________________;“符合要求的個體”是指________________________。
(5)將牛受精卵進行人工培養(yǎng)后,一般可選擇____________期的、發(fā)育良好的胚胎進行移植。
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科目:高中生物 來源:2013屆河北省高一第二學期期末考試生物試卷 題型:選擇題
美國科學家將人的生長激素基因轉移到了小鼠體內,得到了超級小鼠,此轉基因技術的受體細胞是( )
A.卵細胞 B.去核卵細胞 C.受精卵細胞 D.乳腺上皮細胞
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