I 已知SARS是由一種RNA病毒感染所引起的疾病。SARS病毒表面的S蛋白是主要的病毒抗原,在SARS病人康復(fù)后的血清中有抗S蛋白的特異性抗體。某研究小組為了研制預(yù)防SARS病毒的疫苗,開展了前期研究工作。其簡要的操作流程如下:

 
 

 

 

 

 

 

 


(1)實(shí)驗(yàn)步驟①所代表的反應(yīng)過程是             。

(2)步驟②構(gòu)建重組表達(dá)運(yùn)載體A和重組表達(dá)運(yùn)載體B必須使用限制性內(nèi)切酶和

          酶,后者的作用是將用限制性內(nèi)切酶切割的                      連接起來。

(3)如果省略步驟②而將大量擴(kuò)增的S基因直接導(dǎo)入大腸桿菌,一般情況下,不能得到表達(dá)的S蛋白,其原因是S基因在大腸桿菌中不能              ,也不能            。

(4)為了檢驗(yàn)步驟④所表達(dá)的S蛋白是否與病毒S蛋白有相同的免疫反應(yīng)特性,可用

                                  進(jìn)行抗原―抗體特異性反應(yīng)實(shí)驗(yàn),從而得出結(jié)論。

II. 1958年,Meselson和Stahl通過一系列實(shí)驗(yàn)首次證明了DNA的半保留復(fù)制,此后科學(xué)家便開始了有關(guān)DNA復(fù)制起點(diǎn)數(shù)目、方向等方面的研究。試回答下列問題:

(1)由于DNA分子呈___________結(jié)構(gòu),DNA復(fù)制開始時(shí)首先必需解旋從而在復(fù)制起點(diǎn)位置形成復(fù)制叉(如圖1)。因此,研究中可以根據(jù)復(fù)制叉的數(shù)量推測___________________。

(2)1963年Cairns將不含放射性的大腸桿菌(擬核DNA呈環(huán)狀)放在含有3H-胸腺嘧啶的培養(yǎng)基中培養(yǎng),進(jìn)一步證明了DNA的半保留復(fù)制。根據(jù)右邊的大腸桿菌親代環(huán)狀DNA示意圖,在答題紙的相應(yīng)方框內(nèi)用簡圖表示復(fù)制一次和復(fù)制兩次后形成的DNA分子。(注:以“……”表示含放射性的脫氧核苷酸鏈)。

(3)DNA的復(fù)制從一點(diǎn)開始以后是單向還是雙向進(jìn)行的,用不含放射性的大腸桿菌DNA放在含有3H-胸腺嘧啶的培養(yǎng)基中培養(yǎng),給以適當(dāng)?shù)臈l件,讓其進(jìn)行復(fù)制,得到圖3所示結(jié)果,這一結(jié)果說明________________。

(4)為了研究大腸桿菌DNA復(fù)制是單起點(diǎn)復(fù)制還是多起點(diǎn)復(fù)制,用第(2)題的方法,觀察到的大腸桿菌DNA復(fù)制過程如圖4所示,這一結(jié)果說明大腸桿菌細(xì)胞中DNA復(fù)制是            起點(diǎn)復(fù)制的。

 I  (1)逆轉(zhuǎn)錄   

(2)DNA連接     運(yùn)載體     S基因

(3)復(fù)制    合成S基因的mRNA  

(4)大腸桿菌中表達(dá)的S蛋白   SARS康復(fù)病人血清(或抗S蛋白的特異性抗體)

II.

(1)(立體的規(guī)則)雙螺旋      復(fù)制起點(diǎn)數(shù)量 

(2)下圖(4分,每個(gè)正確答案得2分)

(3)DNA復(fù)制是雙向的 

(4)單

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