CTAB法是一種從高等真核生物細胞中制備基因組DNA(總DNA)的技術。CTAB能跟核酸形成復合物，在高鹽溶液(>0.7 mol/L的NaCl溶液)中可溶并且穩(wěn)定存在，當降低溶液中鹽的濃度(<0.3 mol/L的NaCl溶液)時，CTAB－核酸的復合物就會因溶解度降低而沉淀，再用70%酒精浸泡可洗脫掉CTAB；氯仿能使蛋白質(zhì)發(fā)生變性而沉淀。提取和檢測水稻基因組DNA的操作步驟如下：

①在50 mL離心管中加入20 mL的CTAB抽提緩沖液(主要成分是1.4 mol/L的NaCl、2%的CTAB)，于65℃水浴中預熱；

②將20 g新鮮的水稻幼嫩葉片剪成小段后放于研缽中，用液氮速凍并研磨成粉末，加入上述離心管中，于65℃水浴中保溫30 min；

③取出離心管，冷卻至室溫，加入20 mL的氯仿，輕輕混勻20 min；

④在室溫下以12000 r/min的轉(zhuǎn)速離心10～20 min；

⑤將上清液移入另一個離心管中，加入2/3體積的經(jīng)冷卻的異丙醇，用玻璃棒輕輕攪動，小心取出聚集于玻璃棒上的CTAB－核酸的復合物沉淀；

⑥將沉淀移入另一個離心管中，加入70%乙醇洗滌，重復洗滌1～2次；

⑦吹干乙醇后，將DNA溶于適量的TE緩沖液中，在0.8%的瓊脂糖凝膠上電泳分離并在核酸紫外檢測儀上觀察。

請回答下列問題：

(1)植物基因組DNA(總DNA)的提取通常采用機械研磨的方法，常溫下研磨時，植物細胞勻漿中含有的多種酶會對DNA的提取產(chǎn)生不利影響。用液氮速凍，材料在研磨時易破碎，同時還具有_______________________________。

(2)實驗步驟③、④的目的是________________________________。

(3)實驗步驟⑤中，玻璃棒上出現(xiàn)沉淀的主要原因是________________________________________________________________________

________________________________________________________________________。

(4)對DNA進行定性檢測常用的試劑是________，瓊脂糖凝膠電泳是利用待分離樣品中各種分子帶電性質(zhì)的差異以及________、________，使帶電分子產(chǎn)生________而實現(xiàn)分離。DNA在260 nm的紫外線波段有一強烈的吸收峰，利用核酸紫外檢測儀可以進行________。

 

(1)降低細胞勻漿中酶的活性，避免對DNA的提取產(chǎn)生不利的影響

(2)去除溶液中的蛋白質(zhì)(使蛋白質(zhì)變性和沉淀)

(3)NaCl溶液的濃度<0.3 mol/L，CTAB－核酸的復合物因溶解度降低而沉淀

(4)二苯胺　分子大小　形狀的不同　不同的遷移速度　DNA含量的測定(或檢測DNA)

 

練習冊系列答案
相關習題

科目：高中生物 來源：2010年江蘇省清江中學高二第二學期期末考試生物試卷 題型：綜合題

（9分）CTAB法是一種從高等真核生物細胞中制備基因組DNA（總DNA）的技術。CTAB能跟核酸形成復合物，在高鹽溶液(＞0.7mol/L的NaCl溶液)中可溶并且穩(wěn)定存在，當降低溶液中鹽的濃度(＜0.3mol/L的 NaCl溶液)，CTAB - 核酸的復合物就會因溶解度降低而沉淀，再用70% 酒精浸泡可洗脫掉CTAB；氯仿能使蛋白質(zhì)發(fā)生變性而沉淀。提取和檢測水稻基因組DNA的操作步驟如下：
①在50ml離心管中加入20mlCTAB抽提緩沖液（主要成分是1.4mol/L 的NaCl、2%的CTAB），于65℃水浴中預熱；
②將20 g新鮮的水稻幼嫩葉片剪成小段后放于研缽中，用液氮速凍并研磨成粉末，加入上述離心管中，于65℃水浴中保溫30min；
③取出離心管中，冷卻至室溫，加入20mL的氯仿，輕輕混勻20min；
④在室溫下以 12000r/min的轉(zhuǎn)速離心10-20 min；
⑤將上清液移入另一個離心管中，加入2/3體積的經(jīng)冷卻的異丙醇，用玻璃棒輕輕攪動，小心取出聚集于玻璃棒上的CTAB - 核酸的復合物沉淀； 
⑥將沉淀移入另一個離心管中，加入70%乙醇洗滌，重復洗滌1-2次；
⑦吹干乙醇后，將DNA溶于適量的TE緩沖液中，在0.8%的瓊脂糖凝膠上電泳分離并在
核酸紫外檢測儀上觀察。
請回答下列問題：
（1）植物基因組DNA（總DNA）的提取通常采用機械研磨的方法，常溫下研磨時，
植物細胞勻漿含有多種酶類對DNA的提取產(chǎn)生不利的影響。用液氮速凍，材料在研磨時易于破碎，同時還具有       的作用。
（2）實驗步驟③、④的目的是       。
（3）實驗步驟⑤中，玻璃棒上出現(xiàn)沉淀的主要原因是      。
（4）對DNA進行定性檢測常用的試劑是          。瓊脂糖凝膠電泳是利用待分離樣品中各種分子帶電性質(zhì)的差異以及           、    ，使帶電分子產(chǎn)生         
而實現(xiàn)分離。DNA在260nm的紫外線波段有一強烈的吸收峰，利用核酸紫外檢測儀可以進行    。

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科目：高中生物 來源：2010屆江蘇省蘇錫常鎮(zhèn)四市高三教學情況調(diào)查（二）生物試題 題型：綜合題

（8分）CTAB法是一種從高等真核生物細胞中制備基因組DNA（總DNA）的技術。CTAB能跟核酸形成復合物，在高鹽溶液(＞0.7mol/L的NaCl溶液)中可溶并且穩(wěn)定存在，當降低溶液中鹽的濃度(＜0.3mol/L的 NaCl溶液)，CTAB - 核酸的復合物就會因溶解度降低而沉淀，再用70% 酒精浸泡可洗脫掉CTAB；氯仿能使蛋白質(zhì)發(fā)生變性而沉淀。提取和檢測水稻基因組DNA的操作步驟如下：
① 在50ml離心管中加入20mlCTAB抽提緩沖液（主要成分是1.4mol/L 的NaCl、2%的CTAB），于65℃水浴中預熱；
②將20 g新鮮的水稻幼嫩葉片剪成小段后放于研缽中，用液氮速凍并研磨成粉末，加入上述離心管中，于65℃水浴中保溫30min；
③ 取出離心管中，冷卻至室溫，加入20mL的氯仿，輕輕混勻20min；
④ 在室溫下以 12000r/min的轉(zhuǎn)速離心10-20 min；
⑤ 將上清液移入另一個離心管中，加入2/3體積的經(jīng)冷卻的異丙醇，用玻璃棒輕輕攪動，
小心取出聚集于玻璃棒上的CTAB - 核酸的復合物沉淀；
⑥ 將沉淀移入另一個離心管中，加入70%乙醇洗滌，重復洗滌1-2次；
⑦ 吹干乙醇后，將DNA溶于適量的TE緩沖液中，在0.8%的瓊脂糖凝膠上電泳分離并在核酸紫外檢測儀上觀察。
請回答下列問題：
（1）植物基因組DNA（總DNA）的提取通常采用機械研磨的方法，常溫下研磨時，植物細胞勻漿含有多種酶類對DNA的提取產(chǎn)生不利的影響。用液氮速凍，材料在研磨時易于破碎，同時還具有＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿的作用。
（2）實驗步驟③ 、④的目的是＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。
（3）實驗步驟⑤中，玻璃棒上出現(xiàn)沉淀的主要原因是＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。
（4）對DNA進行定性檢測常用的試劑是＿＿＿＿＿。瓊脂糖凝膠電泳是利用待分離樣品中各種分子帶電性質(zhì)的差異以及＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿、＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿，使帶電分子產(chǎn)生＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿而實現(xiàn)分離。DNA在260nm的紫外線波段有一強烈的吸收峰，利用核酸紫外檢測儀可以進行＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。

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科目：高中生物 來源：2010年江蘇省高二第二學期期末考試生物試卷 題型：綜合題

（9分）CTAB法是一種從高等真核生物細胞中制備基因組DNA（總DNA）的技術。CTAB能跟核酸形成復合物，在高鹽溶液(＞0.7mol/L的NaCl溶液)中可溶并且穩(wěn)定存在，當降低溶液中鹽的濃度(＜0.3mol/L的 NaCl溶液)，CTAB - 核酸的復合物就會因溶解度降低而沉淀，再用70% 酒精浸泡可洗脫掉CTAB；氯仿能使蛋白質(zhì)發(fā)生變性而沉淀。提取和檢測水稻基因組DNA的操作步驟如下：

①在50ml離心管中加入20mlCTAB抽提緩沖液（主要成分是1.4mol/L 的NaCl、2%的CTAB），于65℃水浴中預熱；

②將20 g新鮮的水稻幼嫩葉片剪成小段后放于研缽中，用液氮速凍并研磨成粉末，加入上述離心管中，于65℃水浴中保溫30min；

③取出離心管中，冷卻至室溫，加入20mL的氯仿，輕輕混勻20min；

④在室溫下以 12000r/min的轉(zhuǎn)速離心10-20 min；

⑤將上清液移入另一個離心管中，加入2/3體積的經(jīng)冷卻的異丙醇，用玻璃棒輕輕攪動，小心取出聚集于玻璃棒上的CTAB - 核酸的復合物沉淀； 

⑥將沉淀移入另一個離心管中，加入70%乙醇洗滌，重復洗滌1-2次；

⑦吹干乙醇后，將DNA溶于適量的TE緩沖液中，在0.8%的瓊脂糖凝膠上電泳分離并在

核酸紫外檢測儀上觀察。

請回答下列問題：

（1）植物基因組DNA（總DNA）的提取通常采用機械研磨的方法，常溫下研磨時，

植物細胞勻漿含有多種酶類對DNA的提取產(chǎn)生不利的影響。用液氮速凍，材料在研磨時易于破碎，同時還具有        的作用。

（2）實驗步驟③ 、④的目的是        。

（3）實驗步驟⑤中，玻璃棒上出現(xiàn)沉淀的主要原因是       。

（4）對DNA進行定性檢測常用的試劑是           。瓊脂糖凝膠電泳是利用待分離樣品中各種分子帶電性質(zhì)的差異以及            、     ，使帶電分子產(chǎn)生         

而實現(xiàn)分離。DNA在260nm的紫外線波段有一強烈的吸收峰，利用核酸紫外檢測儀可以進行     。

 

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科目：高中生物 來源：2010屆江蘇省蘇錫常鎮(zhèn)四市高三教學情況調(diào)查（二）生物試題 題型：綜合題

（8分）CTAB法是一種從高等真核生物細胞中制備基因組DNA（總DNA）的技術。CTAB能跟核酸形成復合物，在高鹽溶液(＞0.7mol/L的NaCl溶液)中可溶并且穩(wěn)定存在，當降低溶液中鹽的濃度(＜0.3mol/L的NaCl溶液)，CTAB - 核酸的復合物就會因溶解度降低而沉淀，再用70% 酒精浸泡可洗脫掉CTAB；氯仿能使蛋白質(zhì)發(fā)生變性而沉淀。提取和檢測水稻基因組DNA的操作步驟如下：

① 在50ml離心管中加入20mlCTAB抽提緩沖液（主要成分是1.4mol/L 的NaCl、2%的CTAB），于65℃水浴中預熱；

②將20 g新鮮的水稻幼嫩葉片剪成小段后放于研缽中，用液氮速凍并研磨成粉末，加入上述離心管中，于65℃水浴中保溫30min；

③ 取出離心管中，冷卻至室溫，加入20mL的氯仿，輕輕混勻20min；

④ 在室溫下以 12000r/min的轉(zhuǎn)速離心10-20 min；

⑤ 將上清液移入另一個離心管中，加入2/3體積的經(jīng)冷卻的異丙醇，用玻璃棒輕輕攪動，

小心取出聚集于玻璃棒上的CTAB - 核酸的復合物沉淀；

⑥ 將沉淀移入另一個離心管中，加入70%乙醇洗滌，重復洗滌1-2次；

⑦ 吹干乙醇后，將DNA溶于適量的TE緩沖液中，在0.8%的瓊脂糖凝膠上電泳分離并在核酸紫外檢測儀上觀察。

請回答下列問題：

（1）植物基因組DNA（總DNA）的提取通常采用機械研磨的方法，常溫下研磨時，植物細胞勻漿含有多種酶類對DNA的提取產(chǎn)生不利的影響。用液氮速凍，材料在研磨時易于破碎，同時還具有＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿的作用。

（2）實驗步驟③ 、④的目的是＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。

（3）實驗步驟⑤中，玻璃棒上出現(xiàn)沉淀的主要原因是＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。

（4）對DNA進行定性檢測常用的試劑是＿＿＿＿＿。瓊脂糖凝膠電泳是利用待分離樣品中各種分子帶電性質(zhì)的差異以及＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿、＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿，使帶電分子產(chǎn)生＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿而實現(xiàn)分離。DNA在260nm的紫外線波段有一強烈的吸收峰，利用核酸紫外檢測儀可以進行＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。

 

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