Question

18．根據某基因上游和下游的堿基序列，設計合成了用于該基因PCR的兩段引物（單鏈DNA）．引物與該基因變性DNA（單鏈DNA）結合為雙鏈DNA的過程稱為復性．如圖是兩引物的Tm（引物熔解溫度，即50%的引物與其互補序列形成雙鏈DNA分子時的溫度）測定結果，以下分析錯誤的是（　�。�

• A． 兩引物分別與DNA的兩條互補單鏈結合，是子鏈延伸的起點
• B． PCR過程中，復性溫度應高于引物的Tm值以提高PCR效率
• C． 若兩引物的脫氧核苷酸數(shù)相同，推測引物2的（G+C）含量較高
• D． 適當減少引物2的脫氧核苷酸數(shù)，可使其Tm值接近引物1

Answer 1

分析 PCR技術：
1、概念：PCR全稱為聚合酶鏈式反應，是一項在生物體外復制特定DNA的核酸合成技術．
2、原理：DNA復制．
3、前提條件：要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一對引物．
4、條件：模板DNA、四種脫氧核苷酸、一對引物、熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）
5、過程：①高溫變性：DNA解旋過程（PCR擴增中雙鏈DNA解開不需要解旋酶，高溫條件下氫鍵可自動解開）；低溫復性：引物結合到互補鏈DNA上；③中溫延伸：合成子鏈．

解答 解：A、兩引物分別與DNA的兩條互補單鏈結合，是子鏈延伸的起點，A正確；
B、較高的復性溫度可大大減少引物和模板間的非特異性結合，提高PCR反應的特異性，而不是提高PCR效率，B錯誤；
C、DNA分子中C和G的含量越高，DNA分子越穩(wěn)定，引物2的Tm高，由此推測引物2的（G+C）含量較高，C正確；
D、由C選項可知，適當減少引物2的脫氧核苷酸數(shù)，可使其Tm值接近引物1，D正確．
故選：B．

點評 本題結合曲線圖，考查PCR技術的相關知識，要求考生識記PCR技術的原理、條件、產物等基礎知識，能結合圖中信息準確判斷各選項，屬于考綱識記和理解層次的考查．