Question

【題目】科學(xué)家從鏈霉菌提取抗除草劑基因（bar基因），培育抗除草劑作物。回答下列問(wèn)題：

（1）下圖是重組質(zhì)粒示意圖，據(jù)圖分析，需用________酶處理鏈霉菌的DNA，以提取目的基因。為了篩選出成功導(dǎo)入bar基因的受體細(xì)胞，需在受體細(xì)胞培養(yǎng)基中添加_________。

（2）將種子的胚劃傷,簡(jiǎn)稱劃胚。請(qǐng)說(shuō)出農(nóng)桿菌把將bar基因?qū)�入劃胚�?xì)胞的過(guò)程。____________________

（3）某興趣小組要探究各種劃胚方式（包括橫劃、縱劃和穿刺）對(duì)bar基因?qū)�入大豆種子胚細(xì)胞效率的影響。請(qǐng)將有關(guān)實(shí)驗(yàn)步驟補(bǔ)充完整。

步驟1：______________________中培養(yǎng)2-3天。

步驟2：用____________________技術(shù)鑒定萌發(fā)植株的細(xì)胞是否導(dǎo)入bar基因。

（4）下表是不同植物對(duì)除草劑耐受性研究的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。據(jù)表分析可知，玉米對(duì)除草劑耐受性最大，判斷依據(jù)是___________________________。

不同濃度的除草劑處理后植物苗存活率

Answer 1

【答案】 BamHⅠ和BgIⅡ 潮霉素 傷口處的胚細(xì)胞分泌酚類化合物，吸引農(nóng)桿菌移向這些細(xì)胞，使bar基因隨Ti質(zhì)粒上的T-DNA轉(zhuǎn)移至受體細(xì)胞 將數(shù)量相等的各種劃胚方式的種子，浸泡在帶bar基因的農(nóng)桿菌菌液 DNA分子雜交 隨著除草劑濃度的增加，玉米成活苗數(shù)下降幅度最小，且高于大豆和高粱（或“與大豆和高梁相比，在不同除草劑濃度下，玉米苗的存活率最高”）

【解析】試題分析：基因工程的基本步驟包括：目的基因的獲取、構(gòu)建基因表達(dá)載體、將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞、目的基因的檢測(cè)與表達(dá)。據(jù)圖分析，圖中重組質(zhì)粒包括啟動(dòng)子、終止子、目的基因（bar基因）、標(biāo)記基因（潮霉素抗性基因）。

（1）據(jù)圖分析，目的基因（bar基因）兩側(cè)的限制酶切點(diǎn)是BamHⅠ和BgIⅡ的，說(shuō)明提取目的基因時(shí)用了這兩種酶進(jìn)行了切割。標(biāo)記基因的作用是檢測(cè)目的基因是否導(dǎo)入了受體細(xì)胞，所以可以用含有潮霉素的培養(yǎng)基篩選含有目的基因的受體細(xì)胞。

（2）將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞過(guò)程中，將種子的胚劃傷，傷口處的胚細(xì)胞分泌酚類化合物，吸引農(nóng)桿菌移向這些細(xì)胞，使bar基因隨Ti質(zhì)粒上的T-DNA轉(zhuǎn)移至受體細(xì)胞。

（3）實(shí)驗(yàn)的自變量是劃胚方式，因變量是對(duì)bar基因?qū)�入大豆種子胚細(xì)胞效率的影響，所以實(shí)驗(yàn)的基本步驟為：將數(shù)量相等的各種劃胚方式的種子，浸泡在帶bar基因的農(nóng)桿菌菌液中培養(yǎng)2-3天；用DNA分子雜交技術(shù)鑒定萌發(fā)植株的細(xì)胞是否導(dǎo)入bar基因。

（4）根據(jù)表格分析，隨著除草劑濃度的增加，玉米成活苗數(shù)下降幅度最小，且高于大豆和高粱，所以玉米對(duì)除草劑耐受性最大。