Question

【題目】硝基苯酚是工業(yè)污水中的重要污染物，某同學(xué)欲從污水處理廠污泥中分離分解硝基苯酚的細(xì)菌。請(qǐng)回答下列有關(guān)問(wèn)題：

（1）為了篩選污泥中可分解硝基苯酚的細(xì)菌，在配制培養(yǎng)基時(shí)應(yīng)選擇_________（填“硝基苯酚”“硝基苯酚+牛肉膏”或“硝基苯酚”+葡萄糖）作為碳源，不采用其他兩組的原因是 __________________________________。

（2）純化菌株時(shí)，通常使用的劃線工具是_____________。劃線的某個(gè)平板培養(yǎng)后，第一劃線區(qū)域的劃線上都不間斷地長(zhǎng)滿了菌落，第二劃線區(qū)域的第一條線上無(wú)菌落，其他劃線上有菌落。分析造成第二劃線區(qū)域的第一條線無(wú)菌落的可能原因是_________________________。

（3）進(jìn)行梯度稀釋時(shí)的一般操作是將1mL菌液移入________mL的無(wú)菌水中；常用________法接種進(jìn)行活菌計(jì)數(shù)，其原理是_____________________________ ，但統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往____（填“多于”或“少于”）稀釋液中的活菌數(shù)，原因是________________。

（4）實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)顯示，當(dāng)培養(yǎng)基中加入碳源葡萄糖時(shí)，該細(xì)菌降解速率明顯提高，原因可能是_____________________________________________。

Answer 1

【答案】硝基苯酚 其他兩組分別含有其他氮源和碳源，不能保證硝基苯酚是唯一碳源和氮源 接種環(huán) 接種環(huán)灼燒后未冷卻或劃線未從第一區(qū)域末端開始 9 稀釋涂布平板 當(dāng)樣品稀釋度足夠高時(shí)，培養(yǎng)基表面生長(zhǎng)的一個(gè)菌落來(lái)源于一個(gè)活菌 少于 當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是一個(gè)菌落；有些活菌在培養(yǎng)過(guò)程中死亡 葡萄糖為細(xì)菌提供充足的能源，使細(xì)菌代謝繁殖加快

【解析】

微生物生長(zhǎng)繁殖所必需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)主要包括碳源、氮源、水和無(wú)機(jī)鹽等，根據(jù)題意，欲從污水處理廠污泥中分離分解硝基苯酚的細(xì)菌，則需配制以硝基苯酚為唯一碳源的培養(yǎng)基；接種時(shí)常用接種環(huán)，平板劃線法要求灼熱的接種環(huán)冷卻后再劃線，否則會(huì)灼傷菌株甚至導(dǎo)致死亡。劃線時(shí)要從上一次劃線的末端開始劃線，這樣接種環(huán)上才有菌株。

（1）為了篩選污泥中可分解硝基苯酚的細(xì)菌，在配制培養(yǎng)基時(shí)應(yīng)選擇硝基苯酚作為碳源，不采用其他兩組的原因是其他兩組分別含有其他碳源和氮源,不能保證硝基苯酚是唯一碳源和氮源。

（2）利用劃線分離法純化菌株時(shí)使用的劃線工具 是接種環(huán)；劃線的某個(gè)平板經(jīng)培養(yǎng)后,第一劃線區(qū)域的劃線上都不間斷地長(zhǎng)滿了菌落,第二劃線區(qū)域的第一條線上無(wú)菌落，其它劃線上有菌落，造成劃線無(wú)菌落可能的操作失誤有接種環(huán)灼燒后未冷卻或者劃線未從第一區(qū)域末端開始。

（3）進(jìn)行梯度稀釋時(shí)，需要將ImL菌液移入盛有9mL的無(wú)菌水中；稀釋涂布平板法常用來(lái)進(jìn)行微生物的計(jì)數(shù)，其原理是培養(yǎng)基表面的一個(gè)菌落來(lái)源于稀釋液中的一個(gè)活菌；由于菌落可能是由兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞形成或者操作時(shí)有些活菌在培養(yǎng)過(guò)程中死亡，或有些活菌在培養(yǎng)過(guò)程中死亡，所以統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往少于稀釋液中的活菌數(shù)。

(4)當(dāng)培養(yǎng)基中加入碳源葡萄糖時(shí)，該細(xì)菌降解速率明顯提高，因?yàn)榇藭r(shí)能源充足，細(xì)菌代謝繁殖加快。