Question

【題目】人血清白蛋白（HSA)具有重要的醫(yī)用價(jià)值，只能從血漿中制備。下圖為培育轉(zhuǎn)基因奶牛獲得人血清白蛋白（HSA)的流程�；卮鹣铝袉�(wèn)題：

（1）為了在短時(shí)間內(nèi)獲得大量HSA基因，可以采用___________技術(shù)。

（2）過(guò)程①常用__________法。在過(guò)程②進(jìn)行之前，需對(duì)早期胚胎進(jìn)行性別鑒定，可取胚胎細(xì)胞進(jìn)行DNA分析，其采用的基因探針來(lái)自__________(填“�！被颉靶浴�)染色體。

（3）為了使HSA基因只在轉(zhuǎn)基因奶牛乳腺細(xì)胞中表達(dá)，則構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)需要借助DNA連接酶在HSA基因前接上________________。

（4）檢測(cè)牛奶中是否含有人血清白蛋白，可采用________技術(shù)。

Answer 1

【答案】 PCR 顯微注射 性 乳腺蛋白基因的啟動(dòng)子 抗原一抗體雜交

【解析】試題分析：根據(jù)基因工程技術(shù)的基本步驟：目的基因的獲取（方法有從基因文庫(kù)中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成）→基因表達(dá)載體的構(gòu)建（基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等）→將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞（將目的基因?qū)�入植物�?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)�入�?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)�入微生物�?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法）→目的基因的檢測(cè)與鑒定（分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)；個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲(chóng)鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等）。據(jù)此分析題圖可知，操作①為將目的基因——HSA基因?qū)�入受精卵�?nèi)的過(guò)程，方法是顯微注射法；操作②是對(duì)轉(zhuǎn)基因受精卵培育至早期胚胎并移植到代孕奶牛子宮內(nèi)。

（1）PCR技術(shù)可以在短時(shí)間內(nèi)大量擴(kuò)增目的基因，所以要在短時(shí)間內(nèi)獲得大量HSA基因，可以采用PCR技術(shù)。

（2）結(jié)合前面的分析可知，圖中操作①是將目的基因?qū)�入�?dòng)物細(xì)胞，最有效的方法是顯微注射法；在過(guò)程②進(jìn)行之前，需對(duì)早期胚胎進(jìn)行性別鑒定，可取胚胎細(xì)胞進(jìn)行DNA分析，其采用的基因探針來(lái)自性染色體。

（3）為了使HSA基因只在轉(zhuǎn)基因奶牛乳腺細(xì)胞中表達(dá)，則構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)需要借助DNA連接酶在HSA基因前接上乳腺蛋白基因的啟動(dòng)子。

（4）檢測(cè)目的基因是否表達(dá)產(chǎn)生相應(yīng)的蛋白質(zhì)，可將表達(dá)產(chǎn)生的蛋白質(zhì)看做抗原，用特定的抗體進(jìn)行檢測(cè)，若出現(xiàn)抗原-抗體的特異性結(jié)合反應(yīng)，則說(shuō)明目的基因已經(jīng)成功表達(dá)，反之，則沒(méi)有表達(dá)；所以采用檢測(cè)技術(shù)稱(chēng)為抗原-抗體雜交技術(shù)。