Question

【題目】的血清白蛋白在臨床上需求量很大，利用轉(zhuǎn)基因奶牛乳腺生物反應器可生產(chǎn)人的血清白蛋白。回答問題：

（1）在培育轉(zhuǎn)基因奶牛時，應將血清白蛋白基因與乳腺蛋白基因的______________等調(diào)控組件重組在一起，通過______________技術(shù)將其導人奶牛的受精卵中。

（2）導入目的基因的受精卵需培養(yǎng)到__________________階段才可進行胚胎移植。暫不移入的早期胚胎可使用______________方法保存。

（3）進行胚胎移植前需要進行______________________，目前最有效最準確的方法是SRY — PCR法，操作的基本程序是:從被檢測的囊胚中取出幾個______________細胞，提取DNA進行擴增，用位于Y染色體上的性別決定基因（即SRY基因）制成的探針進行檢測，若未出現(xiàn)雜交鏈，則胚胎性別為____________，而基因工程中的______________步驟也會用到DNA探針。

Answer 1

【答案】 啟動子 顯微注射 桑椹胚或囊胚 冷凍（或“低溫”） 性別鑒定 滋養(yǎng)層 雌牛 目的基因的檢測和鑒定

【解析】1、體外受精過程包括卵母細胞的采集和培養(yǎng)、精子的采集和獲能、體外受精，其中卵母細胞的采集和培養(yǎng)的方法：（1）主要方法是：用促性腺激素處理，使其超數(shù)排卵，然后，從輸卵管中沖取卵子，直接與獲能的精子體外受精．（2）第二種方法：從已屠宰母畜的卵巢中采集卵母細胞；
（3）第三種方法：是直接從活體動物的卵巢中吸取卵母細胞，叫活體采卵．
2、受精過程為：頂體反應→穿越放射冠→穿越透明帶（透明帶反應）→卵細胞膜反應（卵黃膜封閉作用）→卵子完成減數(shù)第二次分裂并釋放第二極體→雌雄原核的形成、核膜消失，雌、雄原核融合形成合子→第一次卵裂開始

（1）將人的血清白蛋白基因?qū)�入奶牛受精卵最為有效的方法是顯微注射技術(shù)，導入基因前，需要將血清白蛋白基因與奶牛乳腺蛋白基因的啟動子等調(diào)控組件重組在一起，這一步驟屬于基因工程“四步曲”中的核心步驟，其中將血清白蛋白基因與調(diào)控組件結(jié)合時必須用到限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶；

（2）導入目的基因的受精卵需培養(yǎng)到桑椹胚或囊胚階段才可進行胚胎移植。暫不移入的胚胎可使用冷凍（或低溫）方法保存，具體方法是放入-196℃（零下196°C）的液氮；

（3）進行胚胎移植前需要進行性別鑒定，目前，對胚胎的性別進行鑒定的最有效最準確的方法是SRY-PCR法，操作的基本程序是：從被測的囊胚中取出幾個滋養(yǎng)層細胞，提取DNA；然后用位于Y染色體上的性別決定基因（即SRY基因）的一段堿基作引物，在熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）催化作用下進行PCR擴增；與SRY特異性探針出現(xiàn)陽性反應（雜交鏈）者，說明其含有Y染色體，為雄牛，若未出現(xiàn)雜交鏈，則胚胎性別為雌牛，而基因工程中的目的基因的檢測和鑒定步驟也會用到DNA探針。