Question

【題目】【生物選修1-生物技術(shù)實踐】多氯聯(lián)苯是一種對人體有很大危害的有機(jī)物質(zhì)，呈油狀液體，污染土壤后，很難清除。研究發(fā)現(xiàn)部分酵母菌具有分解多氯聯(lián)苯的作用，為消除這種污染，科研人員計劃從受污染的土壤中篩選出高效分解多氯聯(lián)苯的菌株。

（1）培養(yǎng)基中加入多氯聯(lián)苯作為______________，從功能上講該培養(yǎng)基屬于_____________。

（2）上述培養(yǎng)基的滅菌方法是______________；篩選分解多氯聯(lián)苯的菌株時，應(yīng)將土壤樣品________。

（3）對初步提取到的菌株要進(jìn)行_______________，一般操作方法有兩種，下圖是________法。

（4）將酵母菌溶液分別稀釋10、100、1000倍，每個濃度都接種3個平板，每個平板均接入0.1ml稀釋液。經(jīng)適當(dāng)培養(yǎng)后，平板上的菌落數(shù)如下表所示：

據(jù)此可得出每升溶液中酵母菌活菌數(shù)為_________個/L。

Answer 1

【答案】 唯一碳源 選擇培養(yǎng)基 高壓蒸汽滅菌法 稀釋（溶解） 純化 稀釋涂布平板法 4.6×107

【解析】（1）為了從土壤中分離篩選能分解多氯聯(lián)苯的酵母菌，需要用只含多氯聯(lián)苯作為唯一碳源的培養(yǎng)基，以保留能分解利用多氯聯(lián)苯的酵母菌，而淘汰不能利用多氯聯(lián)苯的微生物。

（2）對培養(yǎng)基滅菌最好用高壓蒸汽滅菌法滅菌。篩選分解多氯聯(lián)苯的菌株時，應(yīng)將土壤樣品稀釋后再接種到選擇培養(yǎng)基上。

（3）由于初步提取到的菌株中可能含有大量的雜菌，所以要進(jìn)行純化培養(yǎng)，一般操作方法有兩種，一種是稀釋涂布平板法，一種是平板劃線法。題中圖示為稀釋涂布平板法。

（4）活菌計數(shù)法的原理是當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時，培養(yǎng)基表面生長的一個菌落，來源于樣品稀釋液中的一個活菌。通過統(tǒng)計平板上的菌落數(shù),就能推測出樣品中大約含有多少活菌。為了增強(qiáng)實驗的說服力與準(zhǔn)確性，同時為了保證結(jié)果準(zhǔn)確，一般選擇菌落數(shù)在30～300的平板進(jìn)行計數(shù)。所以根據(jù)表中統(tǒng)計的菌落數(shù)，只有稀釋100倍的統(tǒng)計結(jié)果符合要求，計算1L培養(yǎng)液中酵母菌數(shù)為（47+50+41）÷3÷0.1×100×1000個=4.6×107個。