(12分) 下圖是培育表達(dá)人乳鐵蛋白的乳腺生物反應(yīng)器的技術(shù)。圖中tetR表示四環(huán)素抗性基因，ampR表示氨芐青霉素抗性基因，BamHⅠ、Hind Ⅲ、SmaⅠ直線所示為三種限制酶的酶切位點。

據(jù)圖回答：

(1)圖中將人乳鐵蛋白基因插入載體，需用       限制酶同時酶切載體和人乳鐵蛋白基因,篩選含有重組載體的大腸桿菌首先需要在含        的培養(yǎng)基上進(jìn)行。

(2)能使人乳鐵蛋白基因在乳腺細(xì)胞中特異性表達(dá)的調(diào)控序列是　  (填字母代號)。

A．啟動子       B．tetR       C．復(fù)制原點      D．a(chǎn)mpR

(3)過程①采用的操作方法是         (填字母代號)。

A．農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化     B．大腸桿菌轉(zhuǎn)化   C．顯微注射    D．基因槍法

(4)為檢測人乳鐵蛋白是否表達(dá)成功，可采用        (填字母代號)技術(shù)。

A．核酸分子雜交    B．基因序列分析   C．抗原－抗體雜交    D．PCR

(5)基因工程的核心步驟是              

 

【答案】

(（12分,每空2分) k&s%5u

(1)Hind Ⅲ和BamHⅠ　氨芐青霉素      (2)A　(3)C  (4) C 

(5)構(gòu)建基因表達(dá)載體

【解析】由圖示可知：需用HindⅢ和BamHⅠ限制酶同時酶切載體和人乳鐵蛋白基因，因酶切后tetR四環(huán)素抗性基因結(jié)構(gòu)被破壞而ampR結(jié)構(gòu)完好，故用含氨芐青霉素的選擇培養(yǎng)基可篩選含有重組載體的大腸桿菌。啟動子是一段特殊的DNA序列，是RNA聚合酶識別和結(jié)合的位點，可調(diào)控基因的特異性表達(dá)。過程①表示把重組載體導(dǎo)入受體細(xì)胞的過程，當(dāng)受體細(xì)胞為動物細(xì)胞時，常采用顯微注射法。過程②表示把早期胚胎移植到代孕母牛子宮的過程，屬于胚胎移植技術(shù)。)經(jīng)過程②得到新個體是細(xì)胞全能性的體現(xiàn)。人乳鐵蛋白基因是否成功表達(dá)，關(guān)鍵看是否有其表達(dá)產(chǎn)物即人乳鐵蛋白，可用抗原—抗體雜交法檢測該蛋白是否存在�；蚬こ踢^程的關(guān)鍵步驟是基因表達(dá)載體的構(gòu)建。

 

練習(xí)冊系列答案
相關(guān)習(xí)題

科目：高中生物 來源：2012屆福建省長泰一中高三上學(xué)期期中考試生物試卷 題型：綜合題

(本題分兩小題，12分)
第Ⅰ小題(7分)
洋蔥(2n＝16)為二倍體植物。為比較不同處理方法對洋蔥根尖細(xì)胞分裂指數(shù)(即視野內(nèi)分裂期細(xì)胞數(shù)占細(xì)胞總數(shù)的百分比)的影響，某研究性學(xué)習(xí)小組進(jìn)行了相關(guān)實驗，實驗步驟如下：
①將洋蔥的老根去除，經(jīng)水培生根后取出。
②將洋蔥分組同時轉(zhuǎn)入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.01%、0.1%秋水仙素溶液中，分別培養(yǎng)24 h、36 h、48 h；秋水仙素處理停止后再轉(zhuǎn)入清水中分別培養(yǎng)0 h、12 h、24 h、36 h。
③剪取根尖，用Carnoy固定液(用3份無水乙醇、1份冰乙酸混勻)固定8 h，然后將根尖浸泡在1 mol/L鹽酸溶液中5～8 min。
④將根尖取出，放入盛有清水的培養(yǎng)皿中漂洗。
⑤用石炭酸—品紅試劑染色。
⑥制片、鏡檢；計數(shù)、拍照。
實驗結(jié)果：不同方法處理后的細(xì)胞分裂指數(shù)(%)如下表。

秋水仙素溶液處理
清水培養(yǎng)時間/h
質(zhì)量分?jǐn)?shù)/%
時間/h
0
12
24
36
0.01
24[來]
10.71
13.68
14.19
14.46
36
9.94
11.99
13.59
13.62
48
7.98
10.06
12.22
11.97
0.1
24
7.74
9.09
11.07
10.86
36
6.12
7.87
9.98
9.81
48
5.97
6.68
7.98
8.56
請分析上述實驗，回答有關(guān)問題：
(1)步驟③中“將根尖浸泡在1 mol/L鹽酸溶液中”的作用是__________。
(2)步驟⑥為了獲得相應(yīng)的觀察視野，鏡檢時正確的操作方法是__________。
(3)根據(jù)所學(xué)的知識推測，石炭酸—品紅試劑是一種______性染料。
(4)為了統(tǒng)計數(shù)據(jù)更加科學(xué)，計數(shù)時應(yīng)采取的方法是__________。
(5)根據(jù)上表結(jié)果可以得出如下初步結(jié)論：
①質(zhì)量分?jǐn)?shù)為____        __秋水仙素溶液誘導(dǎo)后的細(xì)胞分裂指數(shù)較高；
②本實驗的各種處理中，提高細(xì)胞分裂指數(shù)的最佳方法是______。
(6)下面為一位同學(xué)在步驟⑥所拍攝的顯微照片，假設(shè)細(xì)胞a的染色體數(shù)目增加了一倍，最可能原因是                             _ ___________ 。

第Ⅱ小題(5分)
原尿中葡萄糖、氨基酸等物質(zhì)的濃度與血漿中的基本相同。原尿經(jīng)腎小管上皮細(xì)胞的選擇性重吸收和分泌作用后形成尿液。正常情況下尿液中不含葡萄糖。腎小管上皮細(xì)胞中的葡萄糖通過被動運輸?shù)姆绞竭M(jìn)入組織液。下圖為腎小管壁及相關(guān)結(jié)構(gòu)示意圖。

回答問題：
(1)腎小管上皮細(xì)胞中的葡萄糖濃度________(高于、低于、等于)組織液中的。
(2)原尿中的葡萄糖進(jìn)入腎小管上皮細(xì)胞的運輸方式是________，需要________的參與。
(3)腎小管上皮細(xì)胞重吸收水分與_____     ___內(nèi)分泌腺密切相關(guān)，原尿中葡萄糖未能被完全重吸收從而導(dǎo)致尿量增加的原因是__                     ______。

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