Question

【題目】新冠病毒是RNA病毒，對(duì)其進(jìn)行檢測(cè)的方法有兩種：核酸檢測(cè)和抗原-抗體雜交檢測(cè)。下圖表示新冠病毒核酸檢測(cè)的部分流程。

（1）以病毒的RNA為模板通過(guò)①__________過(guò)程合成cDNA，再對(duì)cDNA進(jìn)行PCR擴(kuò)增，這項(xiàng)技術(shù)稱為RT-PCR。

（2）進(jìn)行RT-PCR需要加入的酶是__________和__________。

（3）一次病毒核酸檢測(cè)歷時(shí)需16小時(shí)，為快速檢測(cè)可采用抗原-抗體雜交技術(shù)，這一技術(shù)的關(guān)鍵是要生產(chǎn)出能與新冠病毒結(jié)合的特異性抗體。請(qǐng)將下列生產(chǎn)這種抗體的基本思路補(bǔ)充完整：

①向小鼠體內(nèi)注射__________，目的是獲得能產(chǎn)生特異性抗體的效應(yīng)B細(xì)胞；

②提取免疫小鼠的B淋巴細(xì)胞與__________融合，經(jīng)多次__________獲得能產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞；

③將雜交瘤細(xì)胞在體外條件下做大規(guī)模培養(yǎng)或注射到__________增殖，從而獲得大量的特異性抗體。這種生產(chǎn)抗體的技術(shù)稱為__________技術(shù)。通過(guò)這種技術(shù)獲得的抗體最主要的優(yōu)點(diǎn)有__________。請(qǐng)舉出兩例這種抗體在現(xiàn)實(shí)中的具體應(yīng)用：__________。

Answer 1

【答案】逆轉(zhuǎn)錄（反轉(zhuǎn)錄） 逆轉(zhuǎn)錄酶 Taq酶（熱穩(wěn)定性強(qiáng)的DNA聚合酶） 新冠病毒的抗原蛋白（或滅活的新冠病毒） 骨髓瘤細(xì)胞 篩選 小鼠腹腔內(nèi) 生產(chǎn)單克隆抗體 特異性強(qiáng)、靈敏度高、并可大量制備 作為診斷試劑、用于治療疾病和運(yùn)載藥物

【解析】

1、分析題意可知：新冠病毒的遺傳物質(zhì)為RNA，對(duì)其進(jìn)行檢測(cè)的方法有核酸檢測(cè)和抗原-抗體雜交檢測(cè)兩種。

2、RT-PCR即逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)。原理是:提取組織或細(xì)胞中的總RNA，以其中的mRNA作為模板，采用Oligo(dT)或隨機(jī)引物利用逆轉(zhuǎn)錄酶逆轉(zhuǎn)錄（反轉(zhuǎn)錄）成cDNA。再以cDNA為模板進(jìn)行PCR擴(kuò)增，而獲得目的基因或檢測(cè)基因表達(dá)。RT-PCR使RNA檢測(cè)的靈敏性提高了幾個(gè)數(shù)量級(jí)，使一些極為微量RNA樣品分析成為可能。該技術(shù)主要用于:分析基因的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物、獲取目的基因、合成cDNA探針、構(gòu)建RNA高效轉(zhuǎn)錄系統(tǒng)。

（1）以病毒的RNA為模板合成cDNA的過(guò)程為逆轉(zhuǎn)錄（或反轉(zhuǎn)錄）。

（2）進(jìn)行RT-PCR需要加入的酶有：進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄所需的逆轉(zhuǎn)錄酶和進(jìn)行PCR所需的Taq酶（熱穩(wěn)定性強(qiáng)的DNA聚合酶）。

（3）分析題意可知：抗原-抗體雜交技術(shù)關(guān)鍵是要生產(chǎn)出能與新冠病毒結(jié)合的特異性抗體。生產(chǎn)這種抗體的基本思路與生產(chǎn)單克隆抗體的過(guò)程相近，具體如下：

①向小鼠體內(nèi)注射新冠病毒的抗原蛋白（或滅活的新冠病毒），目的是獲得能產(chǎn)生特異性抗體的效應(yīng)B細(xì)胞；

②提取免疫小鼠的B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，經(jīng)多次篩選獲得能產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞；

③將雜交瘤細(xì)胞在體外條件下做大規(guī)模培養(yǎng)或注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖，從而獲得大量的特異性抗體。這種生產(chǎn)抗體的技術(shù)稱為生產(chǎn)單克隆抗體技術(shù)。通過(guò)這種技術(shù)獲得的抗體最主要的優(yōu)點(diǎn)有特異性強(qiáng)、靈敏度高、并可大量制備。這種抗體在現(xiàn)實(shí)中的具體應(yīng)用有：作為診斷試劑、用于治療疾病和運(yùn)載藥物。