Question

GDNF是一種神經營養(yǎng)因子。對損傷的神經細胞具有營養(yǎng)和保護作用。研究人員構建了含GDNF基因的表達載體（如圖所示），并導入到大鼠神經干細胞中，用于干細胞基因治療的研究。請回答：

（1）完成圖中A過程必需的工具是 ；該基因治療的受體細胞為 。

（2）基因工程最核心的步驟是 。

（3）若要構建含GDNF基因的表達載體，則需選擇圖中的 限制酶進行酶切。

（4）限制酶XhoI和限制酶HpaI的識別序列及切割位點分別是—C↓AATTG—和—G↓AATTC—。如下圖表示四種質粒,其中,箭頭所指部位為酶的識別位點,質粒的陰影部分表示標記基因。適于作為圖示GDNF基因運載體的是 。

（5）下列有關限制性核酸內切酶和質粒運載體的描述，正確的是_______。

A．限制性核酸內切酶能識別DNA、切割DNA任一序列

B．限制性核酸內切酶的作用部位與RNA聚合酶的相同

C．使用質粒運載體是為了避免目的基因被分解

D．質粒運載體可能是從細菌或者病毒的DNA改造的

（6）經酶切后的載體和GDNF基因進行連接，連接產物經篩選得到的載體主要有三種：單個載體自連、GDNF基因與載體正向連接、GDNF基因與載體反向連接（如圖所示）。為鑒定這3種連接方式，選擇HpaI酶和BamHI酶對篩選的載體進行雙酶切，若是正向連接的重組載體，其產生的酶切片段數(shù)為 個，反向連接的重組載體產生片段有 （多選）。

①100bp ②200bp ③600bp ④700bp ⑤6000bp ⑥6500bp

Answer 1