Question

如圖為單克隆抗體制備流程示意圖．

（1）

 

技術(shù)是單克隆抗體技術(shù)的基礎(chǔ)．
（2）細胞融合是隨機的過程，在HAT培養(yǎng)基中培養(yǎng)，目的是

 

．在細胞培養(yǎng)過程中，培養(yǎng)液中需要添加無機鹽，但要注意無機鹽的

 

，以保證生命活動的正常進行．
（3）為選育出能產(chǎn)生高特異性抗體的細胞，要將從HAT培養(yǎng)基上篩選出的細胞稀釋到7～10個細胞/mL，每孔滴入0.1mL細胞稀釋液，其目的是

 

．
（4）選出的雜交瘤細胞具備

 

特點．
（5）淋巴細胞是由動物體

 

中的

 

細胞分化、發(fā)育而．
（6）圖2表示從正常人和患者體內(nèi)獲取的P⁵³基因的部分區(qū)域．與正常人相比，患者在該區(qū)域的堿基會發(fā)生改變，已知限制酶E識別序列為CCGG，若用限制酶E分別完全切割正常人和患者的P⁵³基因部分區(qū)域（見圖2），那么正常人的會被切成

 

個片段，而患者的則被切割成長度為

 

對堿基的兩種片段．如果某人的P⁵³基因部分區(qū)域經(jīng)限制酶E完全切割后，共出現(xiàn)170、220、290和460堿基對的四種片段，那么該人的基因型是

 

（以P⁺表示正常基因，Pⁿ表示異�；�因）

Answer 1

考點：單克隆抗體的制備過程,基因工程的原理及技術(shù)

專題：

分析：分析圖1，將特定的抗原注射小鼠，篩選出產(chǎn)生抗體的淋巴細胞；與骨髓瘤細胞融合，轉(zhuǎn)移到HAT培養(yǎng)基中培養(yǎng)，未融合的細胞死亡，而雜交瘤細胞存活；雜交瘤細胞分開培養(yǎng)，選育出產(chǎn)生高特異性抗體的細胞．
分析圖2，根據(jù)圖示及限制酶E識別序列為CCGG可知，因為正常人的該基因上有限制酶E和限制酶B的切割位點，正常人的會被切成3個片段；患者的限制酶E的酶切位點消失，只有限制酶B的酶切位點，所以該基因被切除兩段，長度為則被切割成長度為：290+170=460和220．

解答： 解：（1）單克隆抗體制備技術(shù)是動物細胞融合技術(shù)的應(yīng)用之一，其基礎(chǔ)是動物細胞培養(yǎng)．
（2）細胞融合是隨機的過程，在HAT培養(yǎng)基中培養(yǎng)，目的是篩選得到雜交瘤細胞（去掉未雜交的細胞以及自身融合的細胞）．在細胞培養(yǎng)過程中，培養(yǎng)液中需要添加無機鹽，但要注意無機鹽的種類和濃度，關(guān)注培養(yǎng)基的滲透壓和營養(yǎng)充沛，以保證生命活動的正常進行．
（3）為選育出能產(chǎn)生高特異性抗體的細胞，要將從HAT培養(yǎng)基上篩選出的細胞稀釋到7～10個細胞/ml，每孔滴入0.1ml細胞稀釋液，其目的是使每個孔內(nèi)不多于一個細胞，達到單克隆培養(yǎng)的目的（或單一細胞培養(yǎng)以保證抗體的純度）．
（4）雜交瘤細胞具備骨髓瘤細胞在體外能大量增殖的特點，又具備B淋巴細胞能分泌特異性抗體的特點．
（5）淋巴細胞是骨髓中的造血干細胞分化、發(fā)育而來．
（6）由圖示及限制酶E識別序列為CCGG可知，正常人的會被切成3個片段，因為正常人的該基因上有限制酶E和限制酶B的切割位點，患者的限制酶E的酶切位點消失，只有限制酶B的酶切位點，所以該基因被切除兩段，長度為則被切割成長度為：290+170=460和220．如果某人的P⁵³基因部分區(qū)域經(jīng)限制酶E完全切割后，共出現(xiàn)170、220、290和460堿基對的四種片段，可知該人體內(nèi)的一對基因中一個是正常的，一個是突變的（異�；�因），因此該人的基因型是P⁺Pⁿ．
故答案為：
（1）動物細胞培養(yǎng)
（2）篩選雜交瘤細胞   種類和數(shù)量（濃度）
（3）使每個孔內(nèi)不多于一個細胞，達到單克隆培養(yǎng)的目的（或單一細胞培養(yǎng)以保證抗體的純度）
（4）在體外大量增殖和分泌特異性抗體
（5）骨髓     造血干
（6）3      460、220      P⁺Pⁿ

點評：本題以圖形為載體，考查單克隆抗體的制備過程和基因工程知識，意在考查考生的識記能力和理解所學知識要點，把握知識間內(nèi)在聯(lián)系的能力；能運用所學知識，對生物學問題作出準確的判斷．