我國首例含綠色熒光蛋白基因(GFP)的克隆豬在東北農(nóng)業(yè)大學(xué)的種豬場自然分娩產(chǎn)出,這標(biāo)志著我國在轉(zhuǎn)基因克隆豬技術(shù)領(lǐng)域已達(dá)到世界領(lǐng)先水平。下圖為我國首例綠色熒光蛋白轉(zhuǎn)基因克隆豬的培育過程示意圖,請據(jù)圖回答:
⑴圖中涉及的現(xiàn)代生物技術(shù)有 、 、 胚胎移植和動物細(xì)胞培養(yǎng)。
⑵寫出GFP在克隆豬細(xì)胞中的表達(dá)過程圖解: 。
⑶過程③將重組質(zhì)粒導(dǎo)入豬胎兒成纖維細(xì)胞時,采用最多也最有效的方法是 。
⑷為了獲得更多的豬卵母細(xì)胞,可通過對母豬注射激素的方法促其 。
⑸早期胚胎的培養(yǎng)液成分較復(fù)雜,除一些無機(jī)鹽和有機(jī)鹽類外,還需添加維生素、激素、氨基酸、核苷酸等營養(yǎng)成分,以及 等物質(zhì)。
⑴轉(zhuǎn)基因技術(shù)(基因工程技術(shù))、核移植
⑵
⑶顯微注射技術(shù) ⑷超數(shù)排卵 、蓜游镅
(1)過程①②③是把外源基因(水母綠色熒光蛋白基因)導(dǎo)入豬胎兒成纖維細(xì)胞,該過程屬于基因工程技術(shù)或轉(zhuǎn)基因技術(shù)。過程④⑤⑥是把豬胎兒成纖維細(xì)胞核植入去核豬卵母細(xì)胞,該過程屬于體細(xì)胞核移植。
(2)蛋白質(zhì)的表達(dá)實(shí)際上就是中心法則的應(yīng)用。如右圖:
(3)重組質(zhì)粒導(dǎo)入受體動物細(xì)胞最常用最有效的方法是顯微注射法。
(4)要獲得更多卵母細(xì)胞可以通過對母體注射促性腺激素實(shí)現(xiàn)母本超數(shù)排卵。
(5)胚胎培養(yǎng)的營養(yǎng)成分有無機(jī)鹽、有機(jī)鹽、維生素、激素、氨基酸、核苷酸、動物血清等。其中動物血清是動物細(xì)胞培養(yǎng)或動物胚胎培養(yǎng)所不能缺少的。
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科目:高中生物 來源:2010-2011學(xué)年吉林省東北師大附中高二下學(xué)期期中考試生物試卷 題型:綜合題
(每空1分,共10分)我國首例綠色熒光蛋白轉(zhuǎn)基因克隆豬在東北農(nóng)業(yè)大學(xué)的種豬場自然分娩產(chǎn)出,這標(biāo)志著我國在轉(zhuǎn)基因克隆豬技術(shù)領(lǐng)域已達(dá)到世界領(lǐng)先水平。下圖為我國首例綠色熒光蛋白轉(zhuǎn)基因克隆豬的培育過程示意圖,請據(jù)圖回答:
(1)一個完整的基因表達(dá)載體除了帶有綠色熒光蛋白基因以外,還必須含有復(fù)制原點(diǎn)、啟動子、終止子和________
__________。啟動子是一段有特殊結(jié)構(gòu)的DNA片段,它是___________酶識別和結(jié)合的部位;而起始密碼子的化學(xué)本質(zhì)則是________(DNA/RNA)。(2)過程③將重組質(zhì)粒導(dǎo)入豬胎兒成纖維細(xì)胞后,要通過DNA分子雜交技術(shù),來檢測綠色熒光蛋白基因是否已重組到豬胎兒成纖維細(xì)胞的__________________上。
(3)從豬中取胎兒成纖維細(xì)胞,用__________________處理,然后進(jìn)行分散培養(yǎng)。培養(yǎng)時,將培養(yǎng)瓶置于含________________________________的混合氣體培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。
(4)過程④表示通過顯微操作法吸出卵母細(xì)胞中的細(xì)胞核,微型吸管除了將細(xì)胞核吸除外,往往還要將__________________一并吸出。
(5)去核的卵母細(xì)胞與成纖維細(xì)胞通過電刺激后融合,形成重組細(xì)胞。利用物理或化學(xué)方法刺激重組細(xì)胞,使之完成細(xì)胞______________________________,在體外培養(yǎng)成重組早期胚胎。
(6)在進(jìn)行過程⑦操作前,應(yīng)用激素對受體母豬進(jìn)行__________________處理。
(7)本實(shí)驗(yàn)所用到的現(xiàn)代生物科學(xué)技術(shù)有____________________________(填序號)。
A.動物細(xì)胞培養(yǎng) B.胚胎移植
C.胚胎細(xì)胞核移植 D.DNA重組技術(shù)
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科目:高中生物 來源:2012屆吉林省高二下學(xué)期期中考試生物試卷 題型:綜合題
(每空1分,共10分)我國首例綠色熒光蛋白轉(zhuǎn)基因克隆豬在東北農(nóng)業(yè)大學(xué)的種豬場自然分娩產(chǎn)出,這標(biāo)志著我國在轉(zhuǎn)基因克隆豬技術(shù)領(lǐng)域已達(dá)到世界領(lǐng)先水平。下圖為我國首例綠色熒光蛋白轉(zhuǎn)基因克隆豬的培育過程示意圖,請據(jù)圖回答:
(1)一個完整的基因表達(dá)載體除了帶有綠色熒光蛋白基因以外,還必須含有復(fù)制原點(diǎn)、啟動子、終止子和________
__________。啟動子是一段有特殊結(jié)構(gòu)的DNA片段,它是___________酶識別和結(jié)合的部位;而起始密碼子的化學(xué)本質(zhì)則是________(DNA/RNA)。(2)過程③將重組質(zhì)粒導(dǎo)入豬胎兒成纖維細(xì)胞后,要通過DNA分子雜交技術(shù),來檢測綠色熒光蛋白基因是否已重組到豬胎兒成纖維細(xì)胞的__________________上。
(3)從豬中取胎兒成纖維細(xì)胞,用__________________處理,然后進(jìn)行分散培養(yǎng)。培養(yǎng)時,將培養(yǎng)瓶置于含________________________________的混合氣體培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。
(4)過程④表示通過顯微操作法吸出卵母細(xì)胞中的細(xì)胞核,微型吸管除了將細(xì)胞核吸除外,往往還要將__________________一并吸出。
(5)去核的卵母細(xì)胞與成纖維細(xì)胞通過電刺激后融合,形成重組細(xì)胞。利用物理或化學(xué)方法刺激重組細(xì)胞,使之完成細(xì)胞______________________________,在體外培養(yǎng)成重組早期胚胎。
(6)在進(jìn)行過程⑦操作前,應(yīng)用激素對受體母豬進(jìn)行__________________處理。
(7)本實(shí)驗(yàn)所用到的現(xiàn)代生物科學(xué)技術(shù)有____________________________(填序號)。
A.動物細(xì)胞培養(yǎng) B.胚胎移植
C.胚胎細(xì)胞核移植 D.DNA重組技術(shù)
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科目:高中生物 來源: 題型:閱讀理解
回答下列有關(guān)基因工程和克隆技術(shù)的問題。(10分)
2006年12月22日,我國首例綠色熒光蛋白轉(zhuǎn)基因克隆豬在東北農(nóng)業(yè)大學(xué)的種豬場自然分娩產(chǎn)出,這標(biāo)志著我國在轉(zhuǎn)基因克隆豬技術(shù)領(lǐng)域已達(dá)到世界領(lǐng)先水平。下圖為我國首例綠色熒光蛋白轉(zhuǎn)基因克隆豬的培育過程示意圖,請據(jù)圖回答:
63、說出綠色熒光蛋白轉(zhuǎn)基因克隆豬的培育過程中用到了哪些生物工程技術(shù)?
利用了哪些原理? (本題答案從下列所給選項(xiàng)中選擇填寫)
①轉(zhuǎn)基因技術(shù);②細(xì)胞核移植技術(shù);③胚胎移植技術(shù);④干細(xì)胞技術(shù);⑤動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)
⑥基因突變;⑦基因重組;⑧動物細(xì)胞核具有全能性;⑨動物細(xì)胞具有全能性
64、過程①②中必需用到的酶分別是 和 。綠色熒光蛋白基因之所以能與質(zhì)粒重組,原因是 。
65、早期胚胎的培養(yǎng)液成分較復(fù)雜,除一些無機(jī)鹽和有機(jī)鹽類外,還需添加維生素、激素、氨基酸、核苷酸等營養(yǎng)成分,以及 等物質(zhì)。
通過上圖中過程①的方法獲取目的基因的數(shù)量是有限的,要獲得大量的綠色熒光蛋白基因可以利用PCR技術(shù)。PCR擴(kuò)增反應(yīng)(如下圖所示)中加入的TaqDNA聚合酶能在接近沸點(diǎn)的條件下,發(fā)揮延伸DNA子鏈的作用,將單個脫氧核苷酸連續(xù)結(jié)合到雙鏈DNA片段的引物鏈上。請回答:
PCR(DNA聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng))技術(shù)示意圖:
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66、你認(rèn)為TaqDNA聚合酶一定是從下列哪種生物體細(xì)胞中分離提取的?
A.水母細(xì)胞 B.豬胎兒成纖維細(xì)胞 C.極端嗜熱菌 D.大腸桿菌
67、下面的表達(dá)式不能反映TaqDNA聚合酶的功能,為什么? 。
68、用限制酶EcoRV、MboI單獨(dú)或聯(lián)合切割同一種質(zhì)粒,得到DNA片段長度如下圖(1kb即1000個堿基對),請?jiān)诖痤}卡的指定位置畫出質(zhì)粒上EcoRV、MboI的切割位點(diǎn)和標(biāo)出堿基對數(shù)。(2分)
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科目:高中生物 來源: 題型:閱讀理解
2007年12月16日《北京晨報(bào)》報(bào)道,上海誕生世界首例攜綠色熒光蛋白基因的轉(zhuǎn)基因克隆兔,為研究疑難雜癥奠定了基礎(chǔ)。專家介紹,從外表看上去,克隆兔并沒什么與眾不同的地方,但通過設(shè)備檢測會發(fā)現(xiàn)它的體內(nèi)可發(fā)出明亮的綠色熒光。由于兔子克隆胚胎發(fā)育率低、懷孕率低、出生后死亡率高,導(dǎo)致了科學(xué)家較難培育出轉(zhuǎn)基因克隆兔。下面是我國胎兔(妊娠20天左右的兔胚胎)背部皮膚成纖維細(xì)胞克隆試驗(yàn)基本過程:
(1)為便于在①過程中與綠色熒光蛋白基因連接,質(zhì)粒應(yīng)該具有的一個明顯特點(diǎn)是________________________________________________________________________。
(2)在②過程進(jìn)行轉(zhuǎn)基因體細(xì)胞的篩選時,采取的選擇措施是
________________________________________________________________________
________________________________________________________________________。
(3)在③過程培養(yǎng)重組細(xì)胞時,培養(yǎng)液中通常含有葡萄糖、氨基酸、無機(jī)鹽、________和________等。
(4)對于上述過程敘述合理的是( )
A.該培養(yǎng)過程采用了轉(zhuǎn)基因技術(shù)、核移植技術(shù)、動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)、胚胎移植技術(shù)等
B.在③過程進(jìn)行重組細(xì)胞培養(yǎng)時,要不斷的用胰蛋白酶將其制成單細(xì)胞懸浮液
C.甲兔實(shí)際為妊娠20天的兔胚胎,原因是此時的細(xì)胞還沒有分化,分裂能力很強(qiáng)
D.該熒光兔的性別應(yīng)該與乙兔相同
(5)研究小組工作人員還指出,轉(zhuǎn)基因克隆兔由于基因(除熒光蛋白基因外)與原來兔子一樣,同樣具有生殖能力,它可以與家兔交配產(chǎn)下后代,因此大家期待這只轉(zhuǎn)基因克隆兔能夠長大,并進(jìn)一步繁衍后代,從而為人們研究“發(fā)光基因”是否具有遺傳性提供可靠依據(jù)。假設(shè)該克隆兔為雌性個體,請寫出判斷“發(fā)光基因”是否具有遺傳性的實(shí)驗(yàn)思路及預(yù)測結(jié)果結(jié)論。
實(shí)驗(yàn)思路: _______________________________________________________________
________________________________________________________________________。
預(yù)測結(jié)果結(jié)論:①_______________________________________________________
________________________________________________________________________;
②________________________________________________________________________
________________________________________________________________________。
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