Question

【題目】某生物興趣小組在學(xué)習(xí)了生物技術(shù)實(shí)踐的相關(guān)知識(shí)后，欲利用一些實(shí)驗(yàn)裝置來(lái)進(jìn)行相關(guān)實(shí)驗(yàn)。請(qǐng)回答下列問題：

（1）該小組欲了解固定化酶與固定化細(xì)胞的技術(shù)。

①制備固定化酵母細(xì)胞，常用的包埋材料是____________。

②制備固定化酵母細(xì)胞時(shí)，充分混合均勻的酵母細(xì)胞溶液可在飽和___________________溶液中形成凝膠珠。部分同學(xué)實(shí)驗(yàn)制得的凝膠珠不是圓形或橢圓形，其主要原因是____________________________。

（2）該小組欲用甲、乙裝置進(jìn)行血紅蛋白的提取和分離：

①為了提取和分離血紅蛋白，首先對(duì)紅細(xì)胞進(jìn)行洗滌以去除雜質(zhì)蛋白，洗滌時(shí)應(yīng)使用生理鹽水而不使用蒸餾水的原因是___________________________。

②甲裝置中，B是血紅蛋白溶液，則A是______________________；乙裝置中，C溶液的作用是____________。

③自己制作凝膠色譜柱時(shí)，在裝填凝膠色譜柱時(shí)，色譜柱內(nèi)不能有氣泡存在，原因是_____________________________。

Answer 1

【答案】海藻酸鈉 CaCl2 海藻酸鈉濃度過(guò)高 防止紅細(xì)胞吸水破裂 磷酸緩沖液（透析液） 洗脫血紅蛋白 氣泡會(huì)攪亂洗脫液中蛋白質(zhì)的洗脫次序，降低分離效果

【解析】

(1)制備固定化酵母細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)步驟為：酵母細(xì)胞的活化→配制0.05mol/L的CaCl2溶液→配制海藻酸鈉溶液→將海藻酸鈉溶液與酵母細(xì)胞混合→固定化酵母菌細(xì)胞，實(shí)驗(yàn)CaCl2溶液的作用是使海藻酸鈉形成凝膠珠。

（2）血紅蛋的提取與分離的實(shí)驗(yàn)步驟主要有①樣品處理:紅細(xì)胞的洗滌→血紅蛋白的釋放→分離血紅蛋白溶液→透析；②粗分離；③純化:凝膠色譜柱的制作→凝膠色譜柱的裝填→樣品的加入和洗脫；④純度鑒定→聚丙烯酰胺膠電泳。

（1）該小組欲了解固定化酶與固定化細(xì)胞的技術(shù)。①制備固定化酵母細(xì)胞，常用的包埋材料是海藻酸鈉等。

②制備固定化酵母細(xì)胞時(shí)，充分混合均勻的酵母細(xì)胞溶液可在飽和CaCl2溶液中形成凝膠珠。部分同學(xué)實(shí)驗(yàn)制得的凝膠珠不是圓形或橢圓形，其主要原因是海藻酸鈉濃度過(guò)高。

（2）該小組欲用甲、乙裝置進(jìn)行血紅蛋白的提取和分離：

①為了提取和分離血紅蛋白，首先對(duì)紅細(xì)胞進(jìn)行洗滌以去除雜質(zhì)蛋白，不使用蒸餾水的原因是防止紅細(xì)胞吸水破裂，洗滌時(shí)應(yīng)使用生理鹽水。

②甲裝置中，B是血紅蛋白溶液，則A是透析液；乙裝置中，C溶液的作用是洗脫血紅蛋白。

③在裝填凝膠色譜柱時(shí)，色譜柱內(nèi)不能有氣泡存在，氣泡會(huì)攪亂洗脫液中蛋白質(zhì)的洗脫次序，降低分離效果。