Question

12．珙桐（2n=40）被稱為植物活化石，為進(jìn)一步研究保護(hù)珙桐，科學(xué)家采集了珙桐材料進(jìn)行了相關(guān)研究，回答下列問題：
（1）為了對(duì)珙桐進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)，可取珙桐植株的分生組織進(jìn)行組織培養(yǎng)，原因是分生組織中病毒少或不含病毒．
（2）為了研究珙桐染色體數(shù)目和性狀的關(guān)系，可以采用以下兩種方式獲得多倍體珙桐．
①取珙桐幼葉細(xì)胞，用纖維素酶和果膠酶酶去除細(xì)胞壁，獲得原生質(zhì)體，讓原生質(zhì)體融合，形成四倍體細(xì)胞．融合細(xì)胞經(jīng)過脫分化形成愈傷組織，再經(jīng)過再分化形成四倍體珙桐幼苗．
②將珙桐幼苗用秋水仙素處理，秋水仙素的作用是抑制紡錘體形成．
（3）為增強(qiáng)珙桐的抗蟲特性，科學(xué)家將抗蟲基因?qū)�入珙桐中�?br />①用限制性內(nèi)切酶酶從蘇云金芽孢桿菌中獲得抗蟲基因，用PCR法對(duì)基因進(jìn)行擴(kuò)增．②該過程的核心步驟是基因表達(dá)載體的構(gòu)建．

Answer 1

分析 1、基因工程技術(shù)的基本步驟：
（1）目的基因的獲�。悍椒ㄓ袕幕�因文庫中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成．
（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等．
（3）將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣．將目的基因?qū)�入植物�?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)�入�?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)�入微生物�?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法．
（4）目的基因的檢測(cè)與鑒定：分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)．個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．
2、植物組織培養(yǎng)的過程：外植體$\stackrel{脫分化}{→}$愈傷組織$\stackrel{再分化}{→}$新植體．

解答 解：（1）分生組織中病毒少或不含病毒，因此為了對(duì)珙桐進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)，可取珙桐植株的分生組織進(jìn)行組織培養(yǎng)，這樣可以獲得脫毒苗．
（2）①植物細(xì)胞壁的主要成分是纖維素和果膠，根據(jù)酶的專一性原理，去除植物細(xì)胞壁應(yīng)用纖維素酶和果膠酶；將融合細(xì)胞培養(yǎng)成多倍體植株還需要采用植物組織培養(yǎng)技術(shù)，該技術(shù)包括脫分化和再分化兩個(gè)階段，即先經(jīng)過脫分化形成愈傷組織，再經(jīng)過再分化形成四倍體珙桐幼苗．
②秋水仙素的作用是抑制紡錘體的形成，導(dǎo)致染色體數(shù)目加倍．
（3）①獲取目的基因應(yīng)該用限制酶切割；PCR技術(shù)可在體外大量擴(kuò)增目的基因．
②基因工程的核心步驟是構(gòu)建基因表達(dá)載體．
故答案為：
（1）分生組織中病毒少或不含病毒 
（2）纖維素酶和果膠        脫分化     愈傷組織      抑制紡錘體形成 
（3）限制性內(nèi)切      PCR       基因表達(dá)載體的構(gòu)建

點(diǎn)評(píng) 本題考查細(xì)胞工程和基因工程的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記基因工程的原理及操作步驟，掌握各操作步驟中需要注意的細(xì)節(jié)；識(shí)記植物組織培養(yǎng)的過程、原理及相關(guān)應(yīng)用，能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確答題．