Question

【題目】多環(huán)芳香烴（PAHs）是一類高毒性有機污染物，由于具有致癌性和致突變性而受到關注。實驗小組從土壤中分離出能降解PAHs的細菌，并對其進行培養(yǎng)和計數。請回答下列問題:

（1）實驗小組從富含PAHs的土壤中取樣后，放置在以PAHs為唯一碳源的培養(yǎng)基上培養(yǎng)，其目的是________________________________。

（2）將PAHs降解菌的菌液稀釋105倍后取0.1mL分別涂布在3個平板中，經培養(yǎng)，3個平板上的菌落數分別是79個、57個和41個，則樣液中的活菌數是_________個/mL。也可以在顯微鏡下采用__________直接計數的方法統計樣液中PAHs降解菌的數量。

（3）若采用平板劃線法分離樣液中的PAHs降解菌，操作時，接種環(huán)通過____________滅菌。在涂布平板時，滴加到培養(yǎng)基表面的菌液不宜過多，其原因是____________________________________。示意圖A和B中，圖____________表示的是用稀釋涂布平板法接種培養(yǎng)后得到的結果。

（4）若某一實驗組平板上菌落的平均數為201個，而空白對照組的1個平板上出現了3個菌落，該結果說明這次實驗可能出現了____________________________。

Answer 1

【答案】 增加PAHs分解菌的濃度，以確保能從樣品中分離得到目的菌 5.9×107 血細胞計數板 灼燒 菌液過多會出現積液，導致菌體堆積而不能獲得由單個細菌形成的單菌落 B 雜菌污染

【解析】試題分析：選擇培養(yǎng)基是根據某種微生物的特殊營養(yǎng)要求或其對某化學、物理因素的抗性而設計的培養(yǎng)基使混合菌樣中的劣勢菌變成優(yōu)勢菌，從而提高該菌的篩選率。檢測土壤中細菌總數，可以看出采用的計數方法是稀釋涂布平板法進行計數。用稀釋涂布平板法測定同一土壤樣品中的細菌數時，在每一個梯度濃度內，至少要涂布3個平板，選擇菌落數在30～300的進行記數，求其平均值，再通過計算得出土壤中細菌總數。據圖分析，圖A表示的接種方法是平板劃線法，圖B表示的接種方法是稀釋涂布平板法。

（1）該實驗的目的是從土壤中分離出能降解PAHs的細菌，因此實驗小組從富含PAHs的土壤中取樣后，要放置在以PAHs為唯一碳源的培養(yǎng)基上培養(yǎng)，以增加PAHs分解菌的濃度，確保能從樣品中分離得到目的菌。

（2）已知PAHs降解菌的菌液稀釋了105倍，體積是0.1mL，三個平板上的菌落數分別是79個、57個和41個，則樣液中的活菌數（79+57+41）÷3÷0.1×105=5.9×107個/mL。微生物計數也可以直接用血細胞計數板。

（3）平板劃線法分離樣液中的PAHs降解菌時，接種環(huán)應該用灼燒的方法滅菌；在涂布平板時，菌液過多會出現積液，導致菌體堆積而不能獲得由單個細菌形成的單菌落。據圖分析，圖A表示的是平板劃線法接種培養(yǎng)后得到的結果；圖B表示的是用稀釋涂布平板法接種培養(yǎng)后得到的結果。

（4）若某一實驗組平板上菌落的平均數為201個，而空白對照組的1個平板上出現了3個菌落，說明這次實驗可能出現了雜菌污染。