Question

6．豬的基因和人類的基因存在一定的相似度．據(jù)報道經(jīng)特殊處理的豬皮可在人身上存活3周左右，起保護(hù)創(chuàng)面免受感染的作用．移植豬皮后，還要在豬皮上開很多小口，在小口處植入患者的自體皮膚組織，自體皮膚慢慢生長，逐漸覆蓋原先創(chuàng)面，而豬皮最終會掉光．為了使移植的豬皮存活更長時間，有人設(shè)法導(dǎo)入人的相關(guān)基因（用P表示），獲得轉(zhuǎn)基因小白豬．其簡要流程如下圖所示：

據(jù)圖中信息并結(jié)合課本知識回答：
（1）過程①中形成重組DNA常用的酶有限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶；將目的基因?qū)�入成纖維細(xì)胞常用的方法是顯微注射法．
（2）過程②中，常用胰蛋白（或膠原蛋白）酶處理，將皮膚組織塊分散成單個成纖維細(xì)胞．在培養(yǎng)成纖維細(xì)胞時需要滿足的條件是無菌、無毒、通氣、適宜的溫度、pH以及營養(yǎng)．
（3）圖中的卵母細(xì)胞應(yīng)在體外培養(yǎng)到減數(shù)第二次分裂中期（或MII中期），并作除去細(xì)胞核的處理；過程③中所用的技術(shù)是（早期）胚胎體外培養(yǎng)；能代替圖中卵母細(xì)胞的還可以是去核的受精卵（或去核的卵細(xì)胞）．
（4）移植后的胚胎能在受體子宮中存活的生理基礎(chǔ)是受體子宮對外來胚胎不發(fā)生免疫排斥反應(yīng)．

Answer 1

分析 根據(jù)圖示，可知①是基因表載體的構(gòu)建、②是動物細(xì)胞培養(yǎng)、③是早期胚胎培養(yǎng)．
通過核移植技術(shù)形成重組細(xì)胞，首先對供體用促性腺激素處理，使其超數(shù)排卵；另需要將卵母細(xì)胞培養(yǎng)到減數(shù)第二次分裂中期才可以去核．
動物細(xì)胞培養(yǎng)基含有葡萄糖、氨基酸、促生長因子、無機(jī)鹽、微量元素等，還需加入血清、血漿等天然物質(zhì)，另外需要無菌和無毒的環(huán)境．

解答 解：（1）在構(gòu)建表達(dá)載體時，要用同一種限制酶切割質(zhì)粒和目的基因，使質(zhì)粒和目的基因產(chǎn)生相同的末端，再用DNA連接酶連接成重組質(zhì)粒．受體細(xì)胞是動物細(xì)胞，可以通過顯微注射法將目的基因轉(zhuǎn)化入受體細(xì)胞．
（2）動物細(xì)胞培養(yǎng)時，取動物組織塊（動物胚胎或幼齡動物的器官或組織），用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個細(xì)胞．動物細(xì)胞培養(yǎng)需要在無菌、無毒的環(huán)境、營養(yǎng)物質(zhì)充沛、適宜的溫度和PH、氣體環(huán)境等條件．
（3）卵母細(xì)胞應(yīng)在體外培養(yǎng)到減數(shù)第二次分裂中期（或MII中期），并作除去細(xì)胞核的處理；過程③中所用的技術(shù)是（早期）胚胎體外培養(yǎng)；能代替圖中卵母細(xì)胞的還可以是去核的受精卵（或去核的卵細(xì)胞）．
（4）移植后的胚胎能在受體子宮中存活的生理基礎(chǔ)是受體子宮對外來胚胎不發(fā)生免疫排斥反應(yīng)．
故答案為：
（1）DNA連接酶      顯微注射法
（2）胰蛋白（或膠原蛋白）      營養(yǎng)
（3）減數(shù)第二次分裂中期（或MII中期）     （早期）胚胎體外培養(yǎng)     去核的受精卵（或去核的卵細(xì)胞）
（4）受體子宮對外來胚胎不發(fā)生免疫排斥反應(yīng)

點評 本題綜合考查了細(xì)胞工程、胚胎工程和基因工程的相關(guān)知識，考生要識記基因工程的操作工具；掌握目的基因檢測和鑒定的方法；識記動物細(xì)胞培養(yǎng)的過程和培養(yǎng)條件等；明確卵母細(xì)胞在進(jìn)行細(xì)胞核移植前的準(zhǔn)備；識記胚胎工程和基因工程的相關(guān)應(yīng)用．