Question

18．營養(yǎng)缺陷型菌株就是在人工誘導（或自發(fā)突變）下，微生物細胞代謝調節(jié)機制中的某些酶被破壞掉，使代謝過程中的某些合成反應不能進行，從而為工業(yè)生產積累大量的原料產物．如圖是實驗人員利用影印法初檢氨基酸缺陷型菌株的過程，請回答．

（1）過程①的方法為稀釋涂布平板法，與基本培養(yǎng)基相比，待測培養(yǎng)皿中特有的成分有氨基酸．
（2）過程②應將印在絲絨布上的菌落先轉印至基本培養(yǎng)基上，原因是防止基本培養(yǎng)基中混入特殊的營養(yǎng)成分．
（3）為進一步完成對初檢的缺陷型菌株的鑒定，實驗人員進行了如下操作：
①用接種針挑取菌落A（選填“菌落A”或“菌落B”）菌落接種于盛有完全培養(yǎng)液的離心管中，28℃震蕩培養(yǎng)1-2天后，離心，取沉淀用（無菌）生理鹽水洗滌菌體3次并制備成菌懸液．
②吸取1mL菌懸液加入無菌培養(yǎng)皿中，傾注約15mL融化并冷卻至40-50℃的基本瓊脂培養(yǎng)基，冷凝后用記號筆在培養(yǎng)皿的皿底劃分五個區(qū)域，做好標記．
③在劃分的五個區(qū)域上放入少量分組的氨基酸結晶或粉末（五組混合氨基酸如表所示），經培養(yǎng)后，觀察生長圈出現的區(qū)域，從而確定屬于何種氨基酸缺陷型．

組別	所含氨基酸
A	組氨酸	蘇氨酸	谷氨酸	天冬氨酸	亮氨酸
B	精氨酸	蘇氨酸	賴氨酸	甲硫氨酸	苯丙氨酸
C	酪氨酸	谷氨酸	賴氨酸	色氨酸	丙氨酸
D	甘氨酸	天冬氨酸	甲硫氨酸	色氨酸	絲氨酸
E	胱氨酸	亮氨酸	苯丙氨酸	丙氨酸	絲氨酸

在上述鑒定實驗中，發(fā)現在培養(yǎng)基的A、D區(qū)域出現生長圈，則說明該缺陷型屬于天冬氨酸缺陷型．

Answer 1

分析 分析圖解：圖中首先利用稀釋涂布平板法分離細菌，然后運用“影印法”將菌種接種到兩種培養(yǎng)基中：基本培養(yǎng)基、完全培養(yǎng)基，則在基本培養(yǎng)基中，氨基酸缺陷型菌株不能生長，而在完全培養(yǎng)基中能夠生長，因此可以選擇出氨基酸缺陷型菌株．

解答 解：（1）分析圖解可知，過程①導致菌落均勻分布，因此該方法為稀釋涂布平板法；兩種培養(yǎng)基分別培養(yǎng)是為了篩選出氨基酸缺陷型菌株，因此與基本培養(yǎng)基相比，待測培養(yǎng)皿中特有的成分有氨基酸．類似于完全培養(yǎng)基．
（2）過程②應將印在絲絨布上的菌落先轉印至基本培養(yǎng)基上，原因是防止基本培養(yǎng)基中混入特殊的營養(yǎng)成分．
（3）①比較基本培養(yǎng)基和完全培養(yǎng)基中的菌落可知，菌落A為氨基酸缺陷型菌株，因此需要用接種針挑取菌落A接種于盛有完全培養(yǎng)液的離心管中，28℃震蕩培養(yǎng)1-2天后，離心，取沉淀用（無菌）生理鹽水洗滌菌體3次并制備成菌懸液．
②吸取1mL菌懸液加入無菌培養(yǎng)皿中，傾注約15mL融化并冷卻至40-50℃的基本瓊脂培養(yǎng)基，冷凝后用記號筆在培養(yǎng)皿的皿底劃分五個區(qū)域，做好標記．
③根據題意可知，在培養(yǎng)基的A、D區(qū)域出現生長圈，說明A和D兩種培養(yǎng)基中存在缺陷的氨基酸，因此比較其相同點，說明該缺陷型屬于天冬氨酸缺陷型．
故答案為：
（1）稀釋涂布平板法   氨基酸
（2）基本   防止基本培養(yǎng)基中混入特殊的營養(yǎng)成分
（3）①菌落A   （無菌）生理鹽水
②40-50℃皿底
③天冬氨酸缺陷型

點評 本題考查了微生物的分離與培養(yǎng)的有關知識，要求考生能夠根據題干信息確定該菌種的篩選過程，同時能夠根據表格信息確實能夠缺陷的氨基酸種類，意在考查考生的信息處理能力．